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基于无标记的核酸适配体荧光生物传感器检测凝血酶

         

摘要

设计了一个简单、通用、基于核酸适配体无标记的高敏感、高专一检测凝血酶的荧光方法.以无标记凝血酶核酸适配体单链DNA为识别元素,PicoGreen染料传导互补双链的荧光信号.PicoGreen是一种不对称菁,当其单独存在时不产生荧光信号,而当其被吸附到互补的双链DNA上时,可产生很强的荧光信号,但被吸附到单链DNA上时,却无明显的信号改变.基于该性质,将其用于凝血酶的检测.该方法对凝血酶的响应线性范围为1.0×10-14~ 1.0×10-7 mol/L,相关系数(r2)为0.99,检出限为1.0×10-14 mol/L. 1.0×10-8 mol/L两种干扰物质(牛血清蛋白和细胞色素C)的存在不影响凝血酶的检测,表明该方法对凝血酶具有非常好的专一性.该方法成功应用于对人血清样品的检测,其平均回收率为97% ~ 102%.方法可简单、灵敏、特异性地检测凝血酶,有望用于医学临床诊断等领域.

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