重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡

刘磊; 方艳秋; 许淑芬; 谭岩

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重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡

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目的:获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白,并探讨其应用于非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的前景.方法:RT-PCR从外周血单核细胞(PBMCs)中获取目的基因片段,构建重组质粒PQEh30-TRAIL并转化人大肠杆菌(E.coli)M15,IPTG诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯化,MTT法检测细胞增殖情况,荧光显微镜观察H460wt细胞的形态学改变,流式细胞仪检测其凋亡率.结果:获得与GenBank中报道一致的TRAIL基因片段.SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,获得具有TRAIL免疫原性、相对分子质量约为21 000目的蛋白.Ni2+-NTA agarose纯化得到单一条带蛋白.rsTRAIL处理H460wt细胞24 h后,细胞凋亡率为43.2%,顺铂可以增强rsTRAIL对A549细胞的杀伤作用.结论:获得了与天然TRAIL蛋白具有相同生物学活性的目的蛋白,该目的蛋白具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,联合顺铂能够增强rsTRAIL对NSCLC的杀伤作用.

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来源
《吉林大学学报（医学版）》 |2008年第2期|270-273|共4页
作者
刘磊; 方艳秋; 许淑芬; 谭岩;
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作者单位

吉林大学第一医院中心实验室,吉林,长春,130021;

吉林大学第一医院中心实验室,吉林,长春,130021;

吉林大学第一医院中心实验室,吉林,长春,130021;

吉林大学第一医院中心实验室,吉林,长春,130021;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;肺肿瘤;
关键词
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体; 细胞凋亡; 癌,非小细胞肺; 顺铂;

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