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首页> 中文期刊> 《吉林大学学报（医学版）》 >小鼠骨髓干细胞体外诱导成熟的树突状细胞对T细胞增殖的影响

小鼠骨髓干细胞体外诱导成熟的树突状细胞对T细胞增殖的影响

         
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目的:研究小鼠骨髓干细胞体外诱导分化的树突状细胞对T细胞增殖的影响,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤的治疗提供有效的实验方法.方法:应用IL-4和GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5～7 d,光镜下观察细胞形态学变化;培养至第5～6天,加入黑色素瘤(B16)冻融抗原继续培养1～2 d,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86,并与同种异体T细胞混合培养72 h,终止培养前16 h加入3H-TdR(18.5 kBq/孔),γ-液体闪烁仪测定cpm值.结果:用IL-4和GM-CSF培养3 d可见细胞形态发生改变,细胞形状不规则,培养5～6 d时,有刺状突起、拉长,为典型树突状细胞形态学特征;抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达,IL-4+GM-CSF+TNF-α组(61.68%、71.25%)及IL-4+GM-CSF+冻融抗原组(63.11%、76.88%)明显高于对照组(2.41%、3.88%)及单纯IL-4+GM-CSF培养组(21.86%、28.69%)(P＜0.001),IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较,CD83和CD86表达差异无显著性;液闪仪检测结果显示,IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其他组,且差异具有显著性(P＜0.001,P＜0.05).结论:小鼠骨髓细胞体外培养成功地诱导扩增出足量树突状细胞,经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟,并能够刺激同种异体T细胞大量增殖,参与免疫应答.

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