BTF红色荧光蛋白表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达和定位研究

马云; 王昌博; 杨满君; 秦凌雪; 李斌元; 何淑雅

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目的构建Bcl-2相关转录因子1（BTF）与红色荧光蛋白（RFP）融合表达载体并在大鼠血管平滑肌VSMC细胞中表达，为进一步研究BTF的相互作用蛋白及作用机制奠定实验基础。方法以人体外周血白细胞cDNA为模板，PCR扩增Btf基因，插入红色荧光蛋白表达载体pDsRed-N1中．构建重组表达载体pDsRed-N1-Btf，转染大鼠血管平滑肌VSMC细胞，通过激光共聚胶显微镜观察其在转染细胞中的表达及定位。结果DNA测序、酶切鉴定的结果显示，红色荧光蛋白表达载体pDsRed-N1-Btf构建成功，且序列正确。转染后经激光共聚胶显微镜观察到VSMC细胞中有红色荧光。且BTF主要定位于细胞质中。结论成功构建了pDsRed-N1-Btf表达载体，并主要定位于VSMC的胞质中，为后期研究BTF的相互作用蛋白及其与相互作用蛋白之间的作用机制奠定了良好的基础。

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来源
《医学分子生物学杂志》 |2014年第3期|161-164|共4页
作者
马云; 王昌博; 杨满君; 秦凌雪; 李斌元; 何淑雅;
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作者单位

南华大学生物化学与分子生物学研究所;

湖南省衡阳市421001;

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正文语种 chi
中图分类 R34;
关键词
Bcl-2相关转录因子1; 红色荧光蛋白; 融合蛋白;

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