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诺帝对永生化人宫颈上皮细胞HPV16E6基因抑制作用的初步研究

         

摘要

目的:研究诺帝(Nordy)对永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)HPV16E6基因的抑制作用和机制.方法:免疫细胞化学SP法检测诺帝作用前后H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达;免疫细胞化学SP法检测增殖细胞核抗原MCM5表达,RT-PCR检测诺帝作用前后HPV16E6 mRNA的表达情况.结果:免疫细胞化学显示,E6和p53蛋白在对照组细胞内呈阳性表达,阳性物分别位于胞浆和胞核,经100μmol/L诺帝处理72h后,H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达明显减弱,与对照组相比,差异有显著性.MCM5蛋白在对照组细胞内呈强表达,呈棕黄色分布于胞核内,经100μmol/L诺帝处理96h后,MCM5的表达明显下降.用浓度10μmol/L诺帝处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量与对照组表达量无明显差异,而较高浓度的诺帝(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L)处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量相比对照组有明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:诺帝具有一定抑制HPV16病毒的作用,主要表现在抑制HPV16E6基因的mRNA表达,进而影响E6基因的转录,导致病毒E6蛋白和p53蛋白表达降低,降低永生化细胞MCM5表达,抑制细胞的增殖活性.

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