猪细小病毒GZ分离株NS1基因主要抗原表位区原核表达研究

刘建; 汤德元; 姜德荣; 王洪光; 李达

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根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株NS1基因序列设计1对特异性引物,对贵州大学动物生物技术实验中心分离的猪细小病毒GZ株接种ST细胞传代培养后,提取病毒DNA,进行PCR扩增PPVNS1基因主要抗原表住区,克隆后测序,随后将该基因亚克隆至pET-32a(+)载体,构建pET-32a-NS1重组质粒,转化得到重组菌,经IPTG诱导表达,通过亲和柱纯化并复性,制备重组蛋白.Western-blot检测发现,经诱导表达的NS1基因主要抗原表位区蛋白约为64 ku,与预测的大小一致,而且,重组蛋白在纯化复性后能被PPV阳性血清所识别,具有较好的反应原性.

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来源
《山地农业生物学报》 |2013年第5期|397-402|共6页
作者
刘建; 汤德元; 姜德荣; 王洪光; 李达;
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作者单位

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;

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正文语种 chi
中图分类 S852.659.2;
关键词
猪细小病毒; NS1基因; 主要抗原表位区; 原核表达;

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