猪细小病毒结构蛋白VP2主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

周洁; 陈义平; 楚电峰; 朱吕昌; 罗飞; 张秀娟

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猪细小病毒结构蛋白VP2主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

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本丈参照GenBank发表的猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,设计一对引物,通过PCR方法扩增出一段包含VP2主要抗原表位编码区的片段,产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-VP2经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量为39.1KDa,主要以包涵体形式存在.BandScan分析,表达量约占菌体蛋白的65.2%.表达产物用His亲和层析柱纯化.Western blotting结果显示,该种蛋白能与阳性血清发生特异性反应.结果说明,该重组蛋白具有抗原性,可以作为鉴别诊断用抗原.

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来源
《中国动物检疫》 |2009年第2期|42-44|共3页
作者
周洁; 陈义平; 楚电峰; 朱吕昌; 罗飞; 张秀娟;
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作者单位

中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂室,山东青岛,266032;

扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009;

中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂室,山东青岛,266032;

扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009;

中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂室,山东青岛,266032;

扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009;

中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂室,山东青岛,266032;

扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009;

中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂室,山东青岛,266032;

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正文语种 chi
中图分类 S852.659.2;
关键词
猪细小病毒; 结构蛋白VP2; 主要抗原表位; 原核表达;

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