不同代数SD大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖和成骨分化能力的实验研究

王冬佳; 张雄

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目的:探讨不同代数SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外增殖和成骨分化能力的差异.方法:从SD大鼠骨髓中分离并培养原代BMSCs,免疫荧光染色鉴定BMSCs.传代培养分别获取P1、P3、P5、P7、P9代BMSCs.CCK-8实验检测不同代数BMSCs的增殖能力;显微镜下观察细胞形态学特征;免疫荧光染色检测细胞骨架;流式细胞术检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色比较不同代数BMSCs的体外成骨分化能力;实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫荧光检测不同代数BMSCs成骨分化标志物Ⅰ型胶原A1(collagen typeⅠα1,COL1A1)、骨钙素(osteocalcin,OCN)基因表达和蛋白水平.结果:P1、P3、P5代间BMSCs的细胞形态、体外增殖、细胞凋亡及成骨分化能力无显著差别;而P7和P9代BMSCs各方面指标与P1代BMSCs比较,均明显降低(P<0.05).结论:5代以后的BMSCs随着传代次数的增加,其细胞增殖和成骨分化能力显著降低.

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来源
《口腔颌面外科杂志》 |2021年第1期|16-23|共8页
作者
王冬佳; 张雄;
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作者单位

浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院口腔科浙江杭州 310006;

浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院口腔科浙江杭州 310006;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类口腔颌面部外科学;
关键词
不同代数; 骨髓间充质干细胞; 成骨分化; 组织工程; 细胞骨架;

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