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卵母细胞敲除Rictor对纺锤体和早期胚胎发育的影响

         

摘要

目的探讨Rictor对卵母细胞及早期胚胎发育的影响。方法获得卵母细胞条件性敲除(Rictor-cKO)小鼠(KO组),取同窝未敲除雌性小鼠作为对照组(WT组),腹腔注射促性腺激素后收集卵母细胞,观察条件性敲除小鼠排出的卵母细胞的形态及排卵的数量;免疫荧光化学结合激光共聚焦技术观察卵母细胞条件性敲除Rictor对染色体数量、纺锤体形态的影响;采用卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术向敲除鼠卵母细胞内注射野生型雄鼠的精子头,观察胚胎发育情况。结果卵母细胞条件性敲除Rictor不显著影响小鼠的排卵数量(P>0.05)及卵母细胞的基本形态(P>0.05);然而早期胚胎发育出现明显迟缓,同时段内观察到敲除鼠的2PN率、发育到2-细胞期胚胎数量均显著低于对照组(P<0.05),发育到4-细胞期胚胎数量亦减少(44.4%)。免疫荧光化学结果显示,条件性敲除Rictor后,卵母细胞的染色体数量正常,但部分卵母细胞的纺锤体微管异常比例升高,对照组小鼠仅有少部分卵母细胞出现异常(11.57%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论Rictor可能通过影响卵母细胞纺锤体的排列进而影响早期胚胎发育。

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