重组质粒pCR3.1-brZPC'的构建及其体内外表达

徐丽; 彭景楩

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重组质粒pCR3.1-brZPC'的构建及其体内外表达

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目的构建重组质粒pCR3.1-brZPC',检验其在细胞及动物体内的表达. 方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法克隆基因,与真核表达载体pCR3.1相连,转化感受态菌后酶切鉴定重组质粒.脂质体法转染Hela细胞,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA水平的表达;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白水平的表达.接种BALB/c小鼠,一周后提取其各组织的总RNA,RT-PCR检测重组质粒在被免疫动物体内mRNA水平的表达情况. 结果重组质粒pCR3.1-brZPC'能在细胞和被免疫动物体内高效表达.被免疫动物可以产生相应的抗体,且与该重组蛋白在细胞外结合. 结论重组质粒pCR3.1-brZPC'能在动物体内表达并激起相应的抗体反应.

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来源
《生殖医学杂志》 |2003年第6期|323-328|共6页
作者
徐丽; 彭景楩;
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作者单位

中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北京,100080;

中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北京,100080;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
卵透明带; DNA疫苗; 抗体; 免疫荧光;

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