免疫荧光

摘要： 背景:目前获取原代皮质神经元和星形胶质细胞的方法很多,传统方法通常是分别获取这两种细胞,但实验方法过于繁琐且浪费实验材料。找到一种简单、经济、可行并同时提取这两种细胞的培养方法尤为重要。目的:观察同时提取培养SD乳鼠大脑皮质神经元及星形胶质细胞的效果及注意事项。方法:选用出生24 h内的SD乳鼠,用体积分数为75%乙醇浸泡消毒,待乳鼠昏迷后断脊处死,沿乳鼠颈部用剪刀离断头颅并放入装有高糖DMEM的小烧杯中,沿矢状缝打开头颅并取出大脑放入盛有高糖DMEM的培养皿中。在冰上剥出脑膜及血管,夹取皮质表面2.0-3.0 mm的脑组织,通过木瓜酶和DNA酶进行消化20 min,用含有体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12终止消化。以细胞浓度为1.0×10^(9) L^(-1)种植于含有爬片(用多聚赖氨酸处理)的6孔板中,分别于1,3,5,7 d通过倒置荧光显微镜下观察神经元的形态变化,使用Calcien-AM进行活细胞染色观察细胞活性,β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色对神经元进行鉴定。将剩余大脑皮质进行星形胶质细胞的提取,经过胰酶消化、过滤、吹打,以适宜的浓度接种于培养瓶中,待细胞融合度达到90%时,进行恒温水平摇床振荡24 h以纯化星形胶质细胞。当细胞传代纯化后以1.0×10^(9) L^(-1)接种于6孔板中培养,GFAP免疫荧光染色对星形胶质细胞进行鉴定。结果与结论:①培养1 d后可见神经元贴壁生长,胞体增大,部分聚集生长,细胞间有少量的突触连接;培养3,5 d后胞体进一步增大,突触增粗伸长相互连接;培养7 d后神经元明显聚集,突触增长增粗,相互连接形成致密的细胞网。Calcien-AM活细胞染色可见神经元活性较好,经β-Tubulin、MAP2免疫荧光鉴定细胞纯度大于90%。②培养3 d后星形胶质细胞胞体增大,呈现梭状、不规则状,细胞间出现少量相互连接,细胞间存在较多小胶质细胞;培养5 d后胞体、突起进一步增大;培养7 d发现细胞间的小胶质细胞及其他杂质明显减少,背景较为干净。经GFAP免疫荧光鉴定细胞纯度大于95%。③此方法获得的皮质神经元和星形胶质细胞形态好、杂质少、纯度高,可满足神经科学研究对高纯度的皮质神经元及星形胶质细胞的需求。

摘要： 近视是常见的眼科疾病[1],高度近视眼底病变是致盲的主要原因,随着近视屈光度的增加和眼轴的增长,眼底病发生率升高,如后巩膜葡萄肿、黄斑劈裂、黄斑出血、豹纹状眼底等[2]。因此近视防控是社会关注的焦点,也是研究的热点。而豚鼠是建立近视模型中最常用的实验动物,其视网膜组织的病理切片在实验中有着重要作用,但因视网膜结构复杂,在制作视网膜组织病理切片时,易出现视网膜断裂折叠、细胞固缩、胞核不清等问题,影响实验研究.

摘要： 为了进一步研究notch3基因在斑马鱼中的功能,构建了斑马鱼notch3真核表达载体并在真核细胞中成功表达。其中斑马鱼notch3基因编码序列(coding sequence,CDS)从NCBI的在线数据库中获得,根据序列克隆其胞内段(notch intracellular domain,NICD),接着利用同源重组技术构建pCMV-N3ICD表达载体。再通过双酶切和测序筛选阳性重组载体,借由脂质体法转染至HEK293T细胞中,最后经细胞免疫荧光技术和蛋白质印迹法验证N3ICD的表达。结果显示,重组质粒经酶切电泳片段及测序比对均与预期结果一致。在蛋白质印迹实验中N3ICD蛋白可正常表达,且大小与预测结果一致。细胞免疫荧光显示重组质粒可以在HEK293T细胞的细胞核中表达。同时,构建的N3ICD真核表达载体能够明显增强NF-κB(nuclear factor-кB)家族中rela和nfκb1启动子的活性。成功构建了pCMV-N3ICD真核表达载体。

摘要： 目的探讨乳腺癌转移性胸腔积液的临床与预后改变、细胞学特点及分子分型。方法回顾性分析14例乳腺癌转移性胸腔积液的临床病理学资料,并进行液基细胞学制片、常规细胞蜡块HE染色,从癌细胞的形态学、免疫细胞化学染色及免疫荧光染色等方面进行观察。结果乳腺癌转移性胸腔积液以浸润性导管癌为主,也可以为浸润性小叶癌,分子分型以Luminal B型为主,随访期间,7例生存,6例死亡,1例失访,总生存期10个月~13年,出现胸水至死亡时间均在1年内。胸腔积液中的细胞学形态有两种:(1)细胞单个或形成不同大小的圆形、卵圆形或不规则形的三维细胞团,可以互相叠加,又称球形或空心球形。(2)排列方式为单个或成团细胞单层排列,对诊断浸润性小叶癌的价值更大。ER、PR、HER-2、Ki-67、GATA3、p120阳性可支持乳腺癌来源。有6例胸腔积液的分子分型发生改变,其中3例Luminal B型改成三阴型,1例Luminal A型改成三阴型,1例Luminal B型改成Luminal A型,1例Luminal B型改成HER-2过表达型。结论对恶性胸腔积液进行细胞形态学观察,并辅以免疫细胞化学染色和免疫荧光染色分析,对病理诊断及鉴别诊断意义重大;临床资料、预后随访及分子分型的分析,对临床治疗和预后判断具有重要的参考价值。

摘要： 目的:探索针刀、电针治疗对早期膝骨关节炎(KOA)兔模型关节软骨细胞结构及Ⅱ型胶原的表达情况。方法:30只新西兰兔按体质量随机分为空白组(6只)及KOA造模组(24只),KOA造模组应用改良Videman法制动4周建立早期KOA兔模型。干预结束后,对兔股骨内侧髁软骨进行免疫荧光双标染色(激光共聚焦显微镜观察),应用ELISA法检测兔血清、关节液CTX-2的含量。结果:①治疗后针刀组、电针组血清(P=0.091,P=0.657)、关节液(P=0.066,P=0.032)CTX-2含量降低。②治疗后针刀组、电针组细胞核(P=0.058,P=0.051)、F-actin骨架蛋白(P=0.184,P=0.220)和Ⅱ型胶原(P=0.168,P=0.236)IOD表达降低,但差异无统计学意义。结论:针刀、电针对早期KOA兔模型膝关节软骨细胞及Ⅱ型胶原蛋白代谢具有一定保护作用,但效果不如塞来昔布。

摘要： 目的观察猕猴下丘脑-垂体-肾上腺轴组织结构形态学特征,为模拟人的下丘脑-垂体-肾上腺轴的生理功能、病理反应提供参考。方法猕猴安乐死后,完整取出下丘脑、垂体、肾上腺组织,经多聚甲醛(PFA)固定,制作石蜡切片及冰冻切片;HE染色观察基本结构及细胞分布状态;免疫组化法检测分泌的激素及受体;比较冰冻切片和石蜡切片染色的效果,对下丘脑组织的部分细胞组成进行鉴定。结果下丘脑区域呈中空漏斗状,垂体状似豌豆,左右肾上腺位于两侧肝肾之间;HE染色显示下丘脑区域主要分布神经元和小胶质细胞,垂体分神经垂体、腺垂体,肾上腺由皮质和髓质构成;免疫组化检测到下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)并表达糖皮质激素受体(GR),垂体分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)并表达促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)和GR,肾上腺表达促肾上腺皮质激素受体(ACTHR);冰冻切片免疫荧光的结果更好的显示出下丘脑中包含神经元和小胶质细胞。结论本研究成功制作了猕猴下丘脑、垂体、肾上腺组织切片,并观察了其相关解剖学、形态学特征,为模拟人类下丘脑-垂体-肾上腺轴生理和病理反应提供参考方法。

摘要： 目的探讨免疫荧光染色在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)检测中的临床应用价值。方法收集2020年10月至2021年9月温州市中心医院门诊及住院患者1045例,分别采用免疫荧光染色、苏木精-伊红染色、细菌培养和^(13)C-尿素呼气试验(^(13)C-urea breath test,^(13)C-UBT)的检测方法,比较HP的阳性检出率;探讨HP感染与慢性胃炎胃黏膜病理组织学变化的相关性。结果免疫荧光染色的阳性检出率高于苏木精-伊红染色和细菌培养,差异均有统计学意义(χ^(2)=3.953,P0.05)。随着活动性和炎性反应程度的加重,HP的阳性检出率增高,差异均有统计学意义(χ^(2)=283.522,P<0.01;χ^(2)=187.622,P<0.01);随着萎缩和肠化程度的加重,HP的阳性检出率降低,差异均有统计学意义(χ^(2)=14.821,P<0.01;χ^(2)=14.899,P<0.01)。结论HP感染与慢性胃炎胃黏膜病理组织学变化存在相关性;在胃黏膜活检组织中,免疫荧光染色能快速、准确地诊断HP感染,与苏木精-伊红染色相比,HP显示更清晰。

摘要： 目的探究沉默信息调节因子1(SIRT-1)调控紧密连接蛋白保护肠缺血再灌注后引起的屏障损伤的机制。方法选取2014年7月—2021年7月南京医科大学附属江苏盛泽医院因肠系膜血栓导致的部分小肠坏死行手术治疗的5例患者作为研究对象,采集术中切除坏死肠管及部分正常肠管样本,使用生理盐水冲洗肠内容物后,取其中部分坏死和正常的肠黏膜保存于液氮中。提取黏膜中的蛋白,应用蛋白印迹、免疫荧光、qPCR等方法检测SIRT-1和紧密连接蛋白claudin-4表达情况,检测黏膜屏障电阻(TER)的变化。结果坏死肠管肠黏膜claudin-4表达量为(0.06±0.01),少于正常肠管的(0.22±0.06),差异有统计学意义(t=14.189,P<0.05);SIRT-1激活后,其表达升高,claudin-4表达为(0.61±0.12),高于正常肠管,差异有统计学意义(t=42.334,P<0.05),HE染色可见组织破坏减轻,TER呈现出升高趋势;SIRT-1激活后,TER为(1213.29±46.34)Ω·cm^(2),高于未激活的(992.49±24.65)Ω·cm^(2),差异有统计学意义(t=24.624,P<0.001);SIRT-1抑制后,TER降低为(426.50±33.21)Ω·cm^(2),与未激活比较差异有统计学意义(t=161.956,P<0.001)。结论肠缺血再灌注后多伴随屏障损伤,cladin-4表达量降低,SIRT-1能够对紧密连接蛋白cladin-4起到调控作用,保护屏障功能,为小肠缺血再灌注后损伤的治疗提供新的方向。

摘要： 草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是导致该病的主要病原,研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体。结果显示,GCRV-I vp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kD。免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1,2株亚型为IgG2a。Western Blot实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的效价高达204800,亲和常数为4.04×10^(9)。研究制备的VP7蛋白单克隆抗体,为GCRV-I病毒诊断技术开发及病毒感染机制的深入研究提供实验基础。

摘要： 目的研究miR-424-5p/Rictor/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mTORC)信号轴诱导肝癌细胞自噬性死亡的机制。方法选取肝癌细胞系Hep-3B,对照组经PBS处理,过表达miR-424-5p组、干扰miR-424-5p表达组、过表达Rictor组、干扰Rictor表达组分别转染miR-424-5p mimics、miR-424-5p inhibitor、Rictor过表达质粒、Rictor siRNA。检测细胞活性、凋亡、周期,观察切片自噬体形,检测细胞Lc3-Ⅱ、Lc3-Ⅰ、Beclin1、P62 mRNA和蛋白,RT-PCR测定miR-424-5p/Rictor/mTORC2/Akt/mTORC1的mRNA表达,Western blot法检测相关蛋白,并验证miR-424-5p与Rictor靶向关系。结果Hep-3B细胞中miR-424-5p低表达,表达量为(0.45±0.05)。转染后过表达miR-424-5p组G0+G1期细胞高于对照组,细胞活性低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰miR-424-5p表达组及过表达Rictor组G0+G1期细胞比例低于过表达miR-424-5p组,细胞活性高于过表达miR-424-5p组、干扰Rictor表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-424-5p组在488、587 nm激发波长下自噬小体、自噬溶酶体均高于对照组。过表达miR-424-5p组Rictor、mTORC2、Akt、mTORC1表达水平低于干扰miR-424-5p表达组及过表达Rictor组,高于干扰Rictor表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-424-5p组Lc3-Ⅱ、Lc3-Ⅰ、Beclin1表达水平低于另外四组,P62表达水平高于其他四组,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-424-5p可直接抑制Rictor表达,Western blot显示miR-424-5p可抑制Hep-3B细胞内Rictor表达。结论miR-424-5p可通过调控Rictor/mTORC2/Akt/mTORC1表达影响自噬,从而抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡。

摘要： 膜增生性肾小球肾炎(MPGN)并非均一疾病,既往根据电镜分为3型,但对临床指导价值有限.2012年Mayo诊所Sethi教授在新英格兰医学杂志发表综述,首次提出基于免疫荧光的MPGN新分类,把MPGN分为C3肾病和免疫复合物沉积的MPGN,后者又再分为单克隆免疫球蛋白沉积和多克隆沉积两类(主要与肝炎病毒感染、自身免疫病等相关),但目前尚缺乏大样本的验证研究.本研究首次采用这一方法对MPGN进行分类.基于免疫荧光的MPGN新分类对于揭示致病机制、寻找病因、指导治疗有很好的实用价值;单克隆免疫球蛋白病和肝炎病毒感染是我国MPGN的主要病困。40.3%的非肝炎的免疫复合物介导的MPGN为单克隆Ig沉积。

摘要： 本研究旨在确认缓殖子内穿孔素的存在,进而观察其在缓殖子形成和释放中的作用.利用RT-PCR从弓形虫RNA中扩增弓形虫PLP1基因片段,定向克隆入原核细胞表达载体pET-28a(+),转染大肠杆菌(E.coli),以组氨酸结合柱亲和层析法纯化表达产物.以重组蛋白分别免疫小鼠和白兔,获得鼠源和兔源高滴度抗体.小鼠经口感染Pru虫株,分别在感染后15天、30天、60天、90天和120天取小鼠脑组织,分别制作冰冻切片和石蜡切片.观察石蜡切片脑组织中包囊,并利用间接免疫荧光(IFA)和免疫组织化学技术(IHC)证实了PLP1在缓殖子中持续表达.分别用兔源抗体和鼠源抗体分别标记TgPLP1,利用IFA确认TgPLP1与TgMIC3共定位于缓殖子的微线体.应用realtimE-PCR检测体外培养Pru虫株过程中TgBAG1和TgPLP1表达水平,结果显示在Pru株从速殖子转换为缓殖子的过程中TgPLP1表达量显著下降.PLP1在弓形虫缓殖子发育过程中的作用还有待于进一步探讨.

摘要： 目的：利用激光扫描共聚焦显微镜系统(Laser scanning confocal microscope,LSCM)采集图像,加深理解激光扫描共聚焦显微镜的工作原理以及应用研究.方法：培养贴壁细胞,分别将不同免疫荧光染料(FITC、Alexar Fluor 546nm、DAPI)标记于细胞,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的形态及分布特点.结果：激光扫描共聚焦显微镜系统采集得到DAPI标记细胞核、FITC标记细胞浆蛋白以及Alexar Fluor 546nm标记细胞膜蛋白图像,以及三种荧光染料同时标记细胞的叠加图像.结论：不同免疫荧光染料分别标记细胞特异性好,激光扫描共聚焦显微镜采集图像清晰,并深入地理解了激光扫描共聚焦显微镜系统的工作原理和应用方法.激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是在荧光显微镜成像基础上加装激光扫描装置,应用荧光染料标记细胞,利用计算机系统进行图像分析处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,成为研究分子细胞生物学、药理学、植物学等领域新一代强有力的研究工具.本文采用多重免疫荧光标记方法将两种荧光染料分别标记于细胞,通过激光扫描共聚焦显微镜系统得到扫描图像.

摘要： 目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶(Pl3K)/丝氨酸、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路在二氧化硅(SiO2)粉尘诱导的人胚胎支气管上皮细胞(HBE)表达TGF-β和α-SMA中的作用。rn 方法：将体外培养的HBE细胞分成5组:对照组、SiO2组、Akt磷酸化抑制剂组、同时加入SiO2与抑制剂组和先加入抑制剂24h再加入SiO2)； SiO2暴露浓度为100μg/ml, 磷酸化抑制剂Ly294002浓度为10μM；用Western blot检测Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、TGF-β、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。用免疫荧光技术检测上述处理过程中α-SMA蛋白在细胞中的定位和表达情况。rn 结果：SiO2可以明显激活AKT的磷酸化,同时TGF-β和α-SMA表达明显增加,Akt磷酸化抑制剂Ly294002可以有效抑制Akt的磷酸化,明显降低α-SMA的表达,埘TGF-β表达则无明显影响。免疫荧光结果显示SiO2可明显诱导HBE细胞内α-SMA的表达,而Akt磷酸化抑制剂Ly294002可以使HBE细胞内α-SMA蛋白的荧光强度明显减弱.rn 结论：SiO2诱导HBE细胞表达α-SMA是通过Pl3K/Akt信号通路实现的,Akt磷酸化抑制剂Ly294002可以有效抑制SiO2诱导的α-SMA表达.

摘要： 目的：探讨黄芪水提取物对动脉粥样硬化的作用及机制研究。rn 方法：采用不同浓度黄芪水提取物分组干预小鼠动脉内皮细胞,检测小鼠动脉内皮细胞粘附分子表达变化。运用THP-1细胞进行粘附率检测；ELISA法、免疫荧光法检测细胞培养上清液中VCAM-1、ICAM-1、E-选择素表达的变化;Western blot法检测VCAM-1、ICAM-1、E-选择素蛋白水平表达的变化及核转录因子NF-κB、磷酸化i-κB蛋白的表达变化。rn 结论：黄芪水提取物可通过抑制动脉内皮粘附分子VCAM-1，ICAM-1,E-选择素的表达，降低单核细胞的粘附能力及浸润水平，从而减轻血管内皮细胞的损伤，抑制动脉粥样硬化斑块的形成。其机制可能是通过抑制NF-κB的活化有关。

摘要： 本研究旨在探明Cdc42在牛卵母细胞成熟过程中的分布,为研究Cdc42在减数分裂过程中的作用提供基础依据.通过对牛卵母细胞中Cdc42蛋白的免疫荧光检测，发现Cdc42最晚从MI起开始除了分布于卵皮质区域还在染色体周围富集，MI—AI期时Cdc42和纺锤体的定位相似，到TI—MⅡ期时，胞质内的Cdc42绝大部分随极体排出，但皮质部分的Cdc42仍然存在，并在纺锤体附近的皮质处富集。

摘要： 目的：探讨血清降钙素原(procalcitonin，PCT)在脓毒症休克患者预后判断中的作用。rn 方法：按脓毒症休克的诊断标准纳入我院2009年1月至2009年12月在ICU、急诊科及呼吸内科的患者，共62例，采用免疫荧光方法测定第1／3n天血清中前降钙素原含量，常规记录年龄、性别、APACI-IE Ⅱ，住院时间、死亡时间等一般资料。根据住院期间的存活状况将脓毒症休克患者分成死亡组和非死亡组，比较两组第1／3／7天的PCT含量。并做脓毒症休克患者入组第1天血清PCT含量的ROC曲线，分析其对死亡的预测效果。rn 结果：死亡组的第1／3/7天血清中前降钙素原含量均明显高于非死亡组(P<0．05)；PCT对死亡预测的ROC曲线下总面积为0．88，以8ng/ml为其cutoff值，其对死亡预测的灵敏度为87．50％，特异性为77.1%。rn 结论:血清降钙素原含量是脓毒症休克患者预后判断的重要指标。

摘要： 从山东潍坊某肉种鸡场送检的7日龄肉种鸡中分离出一株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为WF0907。在特异性单抗的间接免疫荧光检测中呈现强阳性荧光反应。rn 利用env基因特异性引物扩增出长度为2200bp的目的片段,并对目的片段进行了克隆测序。序列分析发现,WF0907株的gp85基因与国内外各ALV-J毒株相应核苷酸序列的相似性为87.4%～93.9%,其中与ADOL-7501株的相似性最低(87.4%),与SD9902株的相似性最高,也仅为93.9%。这表明雏鸡中分离的ALV-J与从成年鸡分离株相比,gp85基因存在突变和变异。

摘要： 目的：研究吉非替尼对人乳腺癌细胞ZR-75-30，MCF-7，MDA-MB-231增殖的影响。方法：采用免疫荧光方法分别考察细胞系ZR-75-30，MCF-7，MDA-MB-231雌激素受体(ER)表达量，MTT方法检测吉非替尼对三种乳腺癌细胞增殖的抑制作用。结果：ZR-75-30，MCF-7雌激素受体表达为阳性，MDA-MB-231雌激素受体表达为阴性。MTT实验结果表明吉非替尼对ER阳性乳腺癌细胞的抑制作用优于ER阴性的乳腺癌细胞。结论：ER可能成为吉非替尼抗肿瘤的另一个新靶点。

摘要： 目的：研究人高低转移能力乳腺癌细胞株中Tol l样受体(TLRe)的表达,探讨差异表达及意义。方法：选取高转移能力的人乳腺癌细胞株MDA-MB231和低转移能力的人乳腺癌细胞株MCF7，采用RT-PCR、实时荧光定量PCR，流式细胞技术和细胞免疫荧光技术检测TLRI-TLR10mRNA水平和蛋白水平的表达，全面探索两株细胞TLRs的表达及表达差异。结果：人乳腺癌细胞株MDA-MB-23I和MCF-7mRNa水平和蛋白水平都广泛表达TLRa包括TLR1,TLR2,TLR3,TLR4,TLR5,TLR6,TLR7,TLRS,TLR9,TLR10。两细胞株mRNA水平表达差异最明显的是TLR4,TLR6,TLR8和TLR9，MDA-MB-23l中TLR4,TLR6,TLR8和TLR9的表达分别是MCF-7的39.4+-3.2倍、10.8+-2.4倍、5.8+-2.6倍和3.2+-2.5倍；两细胞株蛋白表达差异最大的是TLR4、TLR6、TLR7和TLR5、MDA-MB-23I中TLR4、TLR6、TLR7和TLR5的表达分别是MCF-7的6.4+-l.6倍、4.1+-0.9倍、3.7+-10.8倍和2.8+-0.4倍。结论：TLRa在人高低转移能力乳腺癌细胞株广泛表达且表达水平不一;TLR4是表达差异最显著的受体;差异表达的TLRa可能与乳腺癌细胞转移能力相关，TLR4可能为乳腺癌的靶向基因治疗奠定基础。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及增强LGI1免疫荧光的方法、LGI1抗体的免疫荧光检测方法及应用。本发明利用共表达LGI1和ADAM22；或共表达LGI1和ADAM23的方式增强LGI1免疫荧光，所述ADAM22蛋白或ADAM23蛋白可以促使细胞内LGI1驻留在细胞膜上，并且捕获细胞外的LGI1，能够增强LGI1免疫荧光信号，只需微量的ADAM22或ADAM23质粒即可检测出LGI1信号，解决免疫荧光检测血清中LGI1自身抗体信号差的问题。

摘要： 本发明涉及一种独立多通道免疫荧光微流控芯片和免疫荧光检测方法。该独立多通道免疫荧光微流控芯片包含至少两个独立的通道，每个通道包含依次连接的等量均分流道、过滤区、缓冲区、荧光包被区、时控阀门、检测区和废液区，各个通道的等量均分流道连接同一个进液口。本发明的独立多通道免疫荧光微流控芯片，在进样本阶段即对液体进行等量均分，不同通道拥有独立的荧光抗体包被区以及时空阀门，拥有独立的废液区，解决了不同检测项目可能造成互相干扰的问题；每个独立通道可以集成互相不干扰的多个检测项目，在实现了高通量的同时，提高了检测精度和效率，降低了成本。

摘要： 本发明提供一种免疫荧光检测系统，包括：主控模块，包括主通信接口；驱动模块，与所述主通信接口连接，包括至少两个驱动接口和至少两个光耦接口，其中，每个所述驱动接口与至少两个步进电机连接，每个所述光耦接口与一光耦连接；所述主控模块根据用户所选择的样本检测项目，执行调度控制，所述驱动模块响应于所述调度控制，根据用户所选择的样本检测项目，生成相应步进电机和光耦的控制指令，以控制相应步进电机执行相应操作并监控相应光耦，从而进行样本检测项目。本发明还提供了其控制方法。本发明拓展性强，可支持多个步进电机和光耦。并且可以实现不同模块的升级更新。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提供了一种免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法，所述免疫荧光分析装置包括黑色滤膜，所述免疫荧光分析方法采用黑色滤膜截留被荧光标记抗体染色的待检测对象，同时滤过未与待检测对象结合的荧光标记抗体，之后采用荧光检测装置对所述黑色滤膜表面的截留物进行分析，实现荧光点的阅读和计数；所述免疫荧光分析方法的操作步骤简单，分析成本低，并且检测结果准确；所述免疫荧光分析装置的结构简单，生产成本低，使用方便，检测效果好；本发明的免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法能够广泛使用，不仅适用于大型医院与专业的实验室，在基层的医疗机构也能广泛使用。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪及及其校准方法。

摘要： 本实用新型涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，降低了不同仪器之间的CV值，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪。