激光共聚焦显微镜

摘要： 我校生命与环境科学学院配备有两台Zeiss LSM 710激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy,LSCM),LSCM具有高分辨率、高灵敏度等特点,被广泛应用于各个学科领域。本文中,作者结合自己的使用和管理经验,通过介绍Zeiss LSM 710的工作原理、主要配置以及仪器功能等,对激光扫描共聚焦显微镜的规范使用和维护提出了一系列建议和意见,以期为广大师生以及科研工作者开展相关研究时提供参考。

摘要： 海军军医大学神经生物学教研室创建于1988年,1998年与第二军医大学神经科学研究所合并。经过三十余年的建设和发展,现已成为国家教育部“分子神经生物学重点实验室”、军队后勤科研“分子神经生物学”重点实验室。实验室占地2 000余平方米,拥有超高分辨激光共聚焦显微镜、转盘显微镜、流式细胞仪、膜片钳等大型仪器设备,建立了成熟的分子与细胞生物学、电生理学、神经形态学、神经行为学等技术体系,建成了先进、完善的教育部与全军重点实验室核心技术平台。

摘要： 农业农村部种羊及羊毛羊绒质量监督检验测试中心(乌鲁木齐)2001年通过首次双认证正式成立。2008年由新疆编制委员会批准成立新疆畜牧科学院畜牧业质量标准研究所。2012年挂牌农业农村部畜禽产品风险评估实验室(乌鲁木齐),自治区重点实验室和毛绒工程中心,承担“新疆畜牧业标准化技术委员会”秘书处、全国羊业及特色畜产业标准化委员会的日常工作。现有固定工作人员32人,其中产业体系岗位科学家2人,国家各技术委员会委员5人。实验室面积近4000 m2。拥有LC-MS/MS、激光共聚焦显微镜、环境真空扫描电镜、基因芯片扫描系统、阿尔米特仪、激光细度检测仪等先进设备共计120台。

摘要： 经云南省科技厅批准,由云南省第一人民医院及昆明理工大学共建的“云南省临床病毒学重点实验室”于2020年正式授牌。平台拥有近2000平方米的科研场地,建立了P2级别病毒学实验室,具备对有潜在生物危险因子(病毒、细菌等)核酸检测及鉴定的闭环操作能力,实验室配有冷冻超速离心机、高分辨激光共聚焦显微镜及小动物活体成像系统等实验硬件及信息化管理软件,可开展分子生物学和细胞生物学实验等科研活动。

摘要： 目的:探究盐质量分数对金枪鱼头汤熬煮过程中微纳米颗粒(micro/nano particles,MNPs)形成的影响.方法:在优化的鱼水质量比1:8、油煎时间40 s、油煎温度120°C、熬煮时间150 min条件下熬煮鱼头汤,探究不同的加盐质量分数(0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％)对熬煮鱼头汤中营养物质迁移的影响;利用纳米粒度电位仪分析盐质量分数对鱼头汤熬煮过程中MNPs形成的影响;通过光学显微镜和激光共聚焦显微镜结合分子荧光标记研究盐质量分数对熬煮鱼头汤中MNPs形态变化及其各组分之间相互作用的影响.结果表明,在加盐质量分数为0.5％的条件下,汤中营养物质的溶出量达到最大.纳米粒度电位仪分析结果显示,不同盐质量分数对MNPs的平均粒径、聚合物分散性指数和Zeta-电位有显著影响(P<0.05).当加盐质量分数为0.5％时,MNPs的尺寸最小.加盐能促进汤中MNPs的形成,当盐质量分数为0.5％时,汤中形成了具有稳定双分子层、平均粒径为(519.10±3.11)nm的MNPs.激光共聚焦显微镜观察结果显示,Cl-渗透进入MNPs的中心并与甘油三酯结合,Na+则与分布在MNPs外围的电负性多糖结合并抵消其负电荷.在适宜盐质量分数下,熬煮的金枪鱼头汤中营养物质的迁移量达到最大,熬汤过程由甘油三酯、磷脂、蛋白质和糖基化分子(糖脂和糖蛋白)自组装形成的MNPs稳定性也达到最大,营养物质在汤中的稳定性增加.

摘要： 我们可以从这张用激光共聚焦显微镜拍摄的照片中看到拟南芥的生殖器官——花药,它内部的小孢子囊是制造和储存花粉粒的地方,夹在里面的绿色小圆球就是花粉粒。花粉成熟后,花药就会打开小孔释放出花粉。有些包含着精子的花粉会落到拟南芥的雌性生殖器官——雌蕊上,最终进入子房,从而成功孕育出种子。

摘要： 目前牙科粘接技术及材料以其优良的性能,已被广泛应用于口腔治疗的各个领域。为提高粘接效果,各种新型粘接技术及材料被不断研发。而粘接界面的观察分析是评估粘接效果最重要的实验室检测手段之一。本文通过对相关文献进行收集整理,筛选出目前最常用的6种牙体组织粘接界面观察方法,包括扫描电子显微镜、透射电子显微镜、激光共聚焦显微镜、拉曼光谱、光学相干层析成像、原子力显微镜。分析其特点可发现:扫描电子显微镜及透射电子显微镜多用于界面细微结构的观察;激光共聚焦显微镜、光学相干层析成像多用于微渗漏、外源性荧光、自发荧光等特征性图像信息的获取;而拉曼光谱及原子力显微镜则能对粘接界面的化学组成及机械性能进行分析。

摘要： 目的 探讨法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜的抑制作用.方法 采用微量平板法制备24 h和48 h白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜,每组膜分别加入不同浓度法尼醇(100～800μmol/L)培养24 h,XTT减低法检测法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜的抑制作用,倒置显微镜下观察混合生物膜形态,激光共聚焦显微镜下观察法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜的抑菌效果.结果 法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜有抑制作用,随着法尼醇浓度的增加,抑制作用呈上升趋势.培养24 h,抑制混合生物膜50％活性的法尼醇最低药物浓度(sessile minimum inhibitory concentration 50％,SMIC50)为150μmol/L;培养48 h,抑制混合生物膜50％活性的法尼醇SMIC50为200μmol/L.结论 法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌混合生物膜生长具有明显抑制作用.法尼醇对白念珠菌和粪肠球菌的混合生物膜抑制强度与法尼醇浓度和生物膜时相相关,高浓度法尼醇的抑制效果高于低浓度法尼醇.

摘要： 目前牙科粘接技术及材料以其优良的性能,已被广泛应用于口腔治疗的各个领域.为提高粘接效果,各种新型粘接技术及材料被不断研发.而粘接界面的观察分析是评估粘接效果最重要的实验室检测手段之一.本文通过对相关文献进行收集整理,筛选出目前最常用的6种牙体组织粘接界面观察方法,包括扫描电子显微镜、透射电子显微镜、激光共聚焦显微镜、拉曼光谱、光学相干层析成像、原子力显微镜.分析其特点可发现:扫描电子显微镜及透射电子显微镜多用于界面细微结构的观察;激光共聚焦显微镜、光学相干层析成像多用于微渗漏、外源性荧光、自发荧光等特征性图像信息的获取;而拉曼光谱及原子力显微镜则能对粘接界面的化学组成及机械性能进行分析.

摘要： 激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)的Overview功能,即对大视野的总览扫描,可以对视野的不同位置进行分别定焦,在扫描大图像过程中实现对焦面变化的平滑过渡,得到聚焦准确、亮度均衡的完整大图像.为了推广LSCM在古气候纹层学的应用,本文以古气候学研究载体-石笋为例,使用Nikon A1的Overview功能,通过LSCM软件功能的灵活运用,实现了其荧光微层的大视野扫描成像,为古气候纹层学的进一步发展提供支持.

摘要： 在淀粉研究中，淀粉颗粒结构的研究是重要的内容。激光共聚焦显微镜通过仪器进行的一种无损伤性的方法，可以原位测定淀粉颗粒结构及糊化淀粉的残余结构。CLSM足淀粉研究中的一个强有力的工具，将会在淀粉研究的各个方面得到广泛的应用。

摘要： 涂布纸的涂层结构对纸张的光学性能、物理性能和印刷质量有很大的影响。油墨转移到纸张上并在涂层表面固着渗透,其固着渗透情况最终影响印刷品的质量和油墨的使用。目前有关油墨渗透的研究报道中较为精确的是切割法,但切割的过程对于纸张有一定的损伤性,使测量结果的可靠性大大降低。本实验的主要目的是用激光共聚焦显微镜表征涂布纸的涂层厚度对油墨渗透的影响,并对其渗透深度和渗透轨迹进行定量化研究。在实验中选用荧光油墨作为激光共聚焦显微镜观察描绘油墨的渗透深度和分布的印刷油墨,将所有的XY平面图像进行重构得到油墨颜料渗透的三维图像。实验研究表明用激光共聚焦显微镜表征油墨颜料的渗透深度和分布的均匀程度是有效和可靠的,这种方法对实验对象无损伤性,利用荧光油墨中的荧光颜料作为示踪剂,省去了荧光着色等步骤,减小了人工操作的误差.实验结果证实纸张的印刷质量可以通过增加涂布时涂层厚度的方法来调整和改善。

摘要： 铜绿假单胞菌是慢性呼吸道感染性疾病的常见分离菌，常常形成生物被膜，导致感染迁延不愈。N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)是半胱氨酸N-乙酰化的衍生物，具有迅速强力溶解黏液的作用，临床主要用做化痰药。国外学者近年来的研究显示，NAC对某些细菌产生的生物被膜有一定破坏作用。因此，本文应用国际公认的研究细菌生物被膜的方法——激光共聚焦显微镜和相应分析软件，研究NAC对铜绿假单胞菌生物被膜的影响，为临床有效治疗铜绿假单胞菌生物被膜感染提供又一有效措施。

摘要： 目的：探讨中药复方解毒消癥饮对人胃癌细胞凋亡相关基因的影响。rn 方法：将培养的人胃腺癌细胞株BGC-823分成低、中、高剂量含药血清组及空白血清对照组，分别加入相应剂量的解毒消癥饮大鼠含药血清和空白对照血清，培养24h、48h和72h；免疫荧光染色法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及Fas-L的表达，应用激光共聚焦显微镜观察并做半定量分析。rn 结果：胃癌细胞经解毒消癥饮含药血清干预后，Bax、Fas表达明显增加(P<0.05)，且随药物浓度的增加该趋势更加明显，Fas-L则随药物浓度的增加表达明显减弱(P<0.05)；各含药血清组与空白血清对照组相比，Bcl-2的表达量无明显变化。rn 结论：解毒消癥饮可能通过调控胃癌细胞Bax、Fas及Fas-L等基因，从而促进细胞凋亡，并降低细胞免疫逃逸的功能。

摘要： 采用激光共聚焦显微镜测定了硅基绝热层制备过程中不同工艺段后碳纤维的长度,通过碳纤维的平均长以及长度分布等参数,评价不同工艺段后碳纤维长度的变化规律.结果表明,随着工艺过程步骤的增加,碳纤维的长度有变短的趋势.

摘要： 目的：探讨中药复方解毒消癥饮对人胃癌细胞凋亡相关基因表达的影响。rn 方法：将人胃癌细胞株BGC-823分成空白对照组及药物干预低、中、高剂量组，分别加入空白对照血清和相应剂量的解毒消癥饮大鼠含药血清，培养24h、48h和72h;免疫荧光染色法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及Fas-L的表达，应用激光共聚焦显微镜观察并做半定量分析;另行电镜制样、观察。rn 结果：胃癌细胞经解毒消癥饮含药血清干预后，Bax、Fas表达明显增加(P<0.05)，且随药物浓度增加该趋势更加明显，Fas-L则随药物浓度的增加表达明显减弱(P<0.05);Bcl-2表达量无明显变化。电镜见胃癌细胞出现早期凋亡现象，主要为细胞核异染色质边聚;线粒体嵴消失、基质深染。rn 结论：解毒消癥饮可能通过调控胃癌细胞Bax、Fas及Fas-L等基因，从而促进细胞凋亡，并降低细胞免疫逃逸的功能。

摘要： 目的:通过采用D-273内质网荧光分子探针来观察针刺血清调节内质网活性的作用，从而探讨针刺作用的细胞分子水平机理。方法:选用原代培养的9～11 d的新生SD大鼠海马细胞，应用激光共聚焦显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针“百会”“足三里”“曲池”“三阴交”2周后的血清对培养的正常和模拟缺血缺氧海马神经元内质网活性的影响。结果:加入正常血清后对照和模型组海马神经元内质网荧光值均下降，而加入针刺血清后下降的荧光强度变化值减小。结论:针刺血清阻抑了神经元内质网活性的下降，显示针刺血清可能有提高海马神经元的内质网活性效应。

摘要： 目的：研究欧前胡素衍生IMP-8的舒张血管作用及机制。方法：在欧前胡素降血压作用的基础上，筛选出欧前胡素衍生物IMP-8，利用激光共聚焦显微镜并运用新型的血管固定方式测定探究其药理活性的作用机制。结果：欧前胡素衍生物IMP-8对血管可以产生较好的舒张作用，在激光共聚焦显微镜下其也可使血管平滑肌细胞内的Ca2+的荧光强度降低。结论：欧前胡素衍生物IMP-8有舒张血管的作用，其作用机制是抑制了细胞内Ca2+的浓度。

摘要： 目的：观察伽玛刀对正常大鼠皮层神经元胞浆内游离钙离子水平的影响。rn 方法：12只雄性Wistar大鼠随机分为假照射组和照射组,以大鼠左侧额叶为靶区进行伽玛刀照射,分别于照射后24b、30d、60d处死动物,急性分离皮层神经元并负载荧光染料fluo-3,激光共聚焦显微镜观察皮层神经元胞浆内钙离子荧光强度。rn 结果：24h组靶区皮层神经元胞浆内游离钙离子荧光强度与假照射组相比无显著性差异,30d组和60d组靶区皮层神经元胞浆内游离钙离子荧光强度与假照射组相比分别升高65.4%和57.8%,有显著性差异。rn 结论：伽玛刀可以引起靶区神经元胞浆内游离钙离子水平在较长时期内保持相对超载状态。

摘要： 目的：研究不同pH值的精子获能液对精子胞浆内Ca2-水平的影响。 方法：取15例正常生育男性精液,离心所得精子沉淀用不同pH值(4.2,5.2,6.2,7.2,8.2,9.2,10.2,11.2)的精子获能液处理,采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分别检测精子胞浆内游离钙离子的平均荧光强度值。 结果：流式细胞仪结果显示,与pH7.2(209.94±89.02)相比,pH为6.2时,精子胞浆内钙离子的平均荧光强度值(161.91±53.92 nmol/L)降低(P＜0.05),pH为8.2,9.2时没有差异(p＞0.05),其余各组分别与对照组相比,均具有显著性降低(P＜0.01)；同时,激光共聚焦显微镜结果显示,与pH7.2(200.87±27.43)相比,pH为6.2时,精子胞浆内钙离子的平均荧光强度值(152.18±38.05)也降低(P＜0.05),pH为8.2,9.2时没有差异(P＞0.05),其余各组与对照组相比,均具有显著性降低(P＜0.01)； 结论：不同pH的精子获能液,可能影响精子胞浆内的钙离子水平的变化,进而导致精子的各种生理活动的改变。

摘要： 本发明公开了一种激光共聚焦显微镜生物被膜观测载物台，包括载物台组件和生物被膜附着片承载组件；载物台组件包括两个平行间隔设置的滑动条，生物被膜附着片承载组件包括两个平行间隔设置的移动台，移动台的两端分别与两个滑动条滑动连接，每个移动台的下方均设置有一个可上下移动的调节块，两个调节块相对的侧面底部向外延伸一段距离形成用于放置生物被膜附着片的支撑台。本发明结构简单、易于组装、操作便利，可以解决实验过程中生物被膜附着片在激光共聚焦显微镜观察时的固定和支撑问题，同时，本发明也可以应用于其它的电镜平台，如倒置显微镜、普通光学显微镜和荧光显微镜等。

摘要： 本发明公开了一种基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法。该方法是由核酸适配体特异性地识别癌症标志物，在结合量子点后，可以用于成像的研究。利用这种方法，以循环肿瘤细胞表面的上皮细胞黏附分子为目标物，实现了激光共聚焦显微镜下的成像。这种方法快速，灵敏，特异性优良，成像清晰准确，是一种具有潜在应用前景的方法。

摘要： 本发明属于激光共聚焦显微镜成像技术领域，一种激光共聚焦显微镜的自动聚焦的方法，利用数字CCD进行实时采集样品玻片表面（反射激光的面）的反射光，将采集到的图像转换成原始图片灰度值二维矩阵，利用压缩模块将原始图片灰度值二维矩阵压缩成压缩图片灰度值二维矩阵，压缩图片灰度值二维矩阵中图片灰度值最大的值即压缩聚光特征值a即为实际聚焦点位置；改变放有样品纳米台z轴的位置，得到不同位置所对应的a值，通过比较这些a值，其中最大的a值所对应的显微镜的位置就是激光的聚焦位置。

摘要： 本发明提供了一种激光共聚焦显微镜的漂移补偿方法、系统以及设备，该方法包括：包括以下步骤：采集半圆形激光照射到激光共聚焦显微镜的交界面处的反射光线形成的光斑，对第一光斑图像进行二值化处理得到相应的二值图像；对第一光斑图像的二值图像的边缘进行圆拟合处理；将圆的圆心坐标赋值给参考聚焦位置变量；对第二光斑图像进行二值化处理得到相应的二值图像；计算第二光斑图像的二值图像的质心坐标；判断第二光斑图像的二值图像的质心坐标与赋值为圆心坐标的参考聚焦位置变量之间的距离是否小于第一预设值，若否，调整激光共聚焦显微镜的Z轴位移台。本发明可以将激光共聚焦显微镜的聚焦位置保持在样品的表面，且实现方式较为简单。

摘要： 本发明公开了一种利用倒置激光共聚焦显微镜进行活细胞观察以及加药刺激的实验方法，其包括：在倒置激光共聚焦显微镜的激光共聚焦小皿中放置具有中空结构的支撑架，再将载有活细胞的片状载体材料倒扣于支撑架上，并使片状载体材料上的活细胞位于支撑架的中空结构处，以保持片状载体材料的部分待观察面处于自然悬空状态；再采用倒置激光共聚焦显微镜的物镜对处于自然悬空状态的待观察面的活细胞进行观察。通过这种方法，能够避免在观察过程中对活细胞产生压力，并给对细胞进行加药刺激，适时观察药物对细胞的作用，从而扩展倒置激光共聚焦显微镜的适用范围，提高利用率。

摘要： 本实用新型公开了可重复使用的激光共聚焦显微镜专用细胞培养皿，包括培养皿主体，培养皿主体顶端的外壁开设有螺纹口，培养皿主体和螺纹口均以玻璃为主材料，培养皿主体顶端的外壁与培养皿盖的内壁螺纹连接，培养皿主体的外壁开设有空槽，培养皿主体的外部设有套环，培养皿主体的两侧分别设有拉杆，本实用新型通过设置有空槽、套环、通孔、拉杆和夹块，通过通孔的宽度差异设置，使得拉动拉杆时可以将夹块全部深入到套环的内部，随后通过推动拉杆，使得夹块进入到空槽的内部，利用空槽对夹块的限位，方便工作人员通过拉杆完成对该装置的拿取，避免了含有细菌的手部对该装置造成污染，从而影响培养的效果。

摘要： 本实用新型公开了一种激光共聚焦显微镜专用玻片，包括载玻片主体，所述载玻片主体外表面靠近边缘位置设置有橡胶喷涂层，所述载玻片主体上表面靠近一侧边缘位置和载玻片主体下表面靠近一侧边缘位置均设置有磨砂层，所述载玻片主体上表面靠近另一侧边缘位置设置有热熔胶培养槽，所述载玻片主体的厚度为0.13‑0.16mm，所述载玻片主体上表面靠近边缘位置设置有一号喷涂区，所述载玻片主体上表面靠近一侧边缘位置和所述载玻片主体下表面靠近一侧边缘位置均设置有二号喷涂区。本实用新型所述的一种激光共聚焦显微镜专用玻片，可避免载玻片主体在受到磕碰的时候损坏，还可方便使用者对载玻片主体进行拿持，为使用者的操作提供便利条件。

摘要： 本实用新型公开了一种用于激光共聚焦显微镜的细胞培养装置，包括主板，所述主板上表面吸附安装有盖板，所述盖板和所述主板之间放置有载玻片，所述载玻片上表面设置有热熔胶培养槽，所述盖板内侧表面固定安装有分隔条，所述盖板下表面靠近四角位置均固定安装有橡胶支撑脚，所述盖板下表面靠近边缘位置开设有磁吸槽，所述磁吸槽的底面嵌入固定安装有二号磁石，所述主板两侧表面均固定安装有防滑条，所述主板上表面靠近边缘位置固定安装有接触垫。本实用新型所述的一种用于激光共聚焦显微镜的细胞培养装置，能够解决载玻片和盖板以及主板接触位置容易磨损的问题，还能够完成对载玻片的全方位防护。

摘要： 本实用新型涉及一种高温激光共聚焦显微镜制样辅助装置，包括配重块、外套筒，所述配重块的一端带有外檐，所述外套筒与配重块配合套接，所述外套筒的一端与配重块的外檐顶接，实验时在所述配重块带有外檐一端的相对一端的底面黏贴试样。与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：辅助装置结构简单，方便加工出各种尺寸及形状，适用于各种形状的试样，可单次制备多个试样，试样安装拆卸简单，实现高效、实用、便捷制样。解决传统手持按压制样时受力不均，造成观察面倾斜的问题。

摘要： 本实用新型公开了一种激光共聚焦显微镜用样品夹持装置，包括玻片底座，所述玻片底座上表面靠近边缘的位置开设有螺丝通孔，所述螺丝通孔的内部设有内六角螺丝，所述玻片底座上表面靠近前端与后端的位置开设有调整滑槽，所述玻片底座上表面位于调整滑槽之间设有玻片夹具，所述玻片夹具包括矩形外框、固定桩、橡胶滚轮、轨道滑槽、C形夹框、固定滑块、防滑海绵、倾斜夹条、U形固定框与C形弹簧片。本实用新型所述的一种激光共聚焦显微镜用样品夹持装置，通过玻片夹具可以夹住样品玻片，操作过程方便简单，且调整滑槽配合玻片夹具可以在通过激光共聚焦显微镜观察样品玻片的过程中，调整样品玻片的位置。