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根癌农杆菌介导的芥菜型油菜高效遗传转化

         

摘要

[目的]建立芥菜型油菜(Brassica juncea)高效遗传转化体系.[方法]以芥菜型油菜带柄子叶为材料,采用农杆菌介导的转化方法,将外源基因导入芥菜型油菜愈伤组织,并获得再生植株.[结果]外植体在侵染前,预先在含2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+6 mg/L AgNO3的MS培养基上进行预培养2~3 d.侵染6~8 min后转入共培养培养基中2~3 d,之后转到含10 mg/L卡那霉素的MS筛选培养基上进行筛选培养2~3周.对成活植株进行GUS染色和PCR验证,证明外源基因已经成功转入芥菜型油菜的基因组中.[结论]通过优化愈伤组织诱导条件和农杆菌侵染时间,可显著提高芥菜型油菜的遗传转化效率.

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