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鼠抗沙眼衣原体Tarp蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

         

摘要

目的 制备抗衣原体Tarp蛋白的单克隆抗体,为探讨Tarp蛋白的生物学特性及功能提供实验工具.方法 克隆表达沙眼衣原体血清型D重组Tarp融合蛋白,并以其为免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,应用间接免疫荧光法筛选阳性克隆和有限稀释克隆化,获得鼠抗沙眼衣原体血清型Dtarp蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA法鉴定单克隆抗体的抗Tarp特异性.并应用问接免疫荧光法鉴定单克隆抗体的亚类和衣原体种属特异性.结果 成功克隆表达了重组GST-Tarp融合蛋白,其相对分子质量约为136 000;成功地建立了7株稳定分泌抗Tarp蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株;7株单克隆抗体均特异性的识别Tarp蛋白而不识别其他衣原体性蛋白;2株单克隆抗体(R586.2和R8G7.2)的免疫球蛋白亚类为IgG2a,其余5株单克隆抗体(R4D5,R2HI.2,R12812,R2H7和RSG8.1)的免疫球蛋白亚类均为IgG1;7株单克隆抗体全部特异性识别衣原体血清型A、D、L2,而不识别MoPn、6BC和AR39.结论 获得了特异性识别沙眼衣原体血清型Dtarp蛋白的单克隆抗体,为Tarp蛋白的结构及生物学功能研究莫定了基础.

著录项

  • 来源
    《南方医科大学学报》 |2010年第10期|2219-2223|共5页
  • 作者单位

    中南大学基础医学院免疫学系,湖南,长沙,410078;

    美国德克萨斯大学圣安东尼奥健康科学中心微生物学免疫学系,圣安东尼奥,78229,USA;

    美国德克萨斯大学圣安东尼奥健康科学中心微生物学免疫学系,圣安东尼奥,78229,USA;

    中南大学基础医学院免疫学系,湖南,长沙,410078;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 衣原体属;
  • 关键词

    沙眼衣原体; Tarp; 单克隆抗体;

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