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首页> 中文期刊> 《中山大学学报：医学科学版》 >CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

         
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【目的】研究环形RNA circRNA_100395调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs表达谱芯片分析结合实时荧光定量PCR验证circRNA_100395在长期持续性房颤(AF)病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导人心房肌成纤维细胞(HAFs)中circRNA_100395的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D实验检测circRNA_100395的RNA稳定性。制备重组circRNA_100395腺病毒(rAd-circRNA_100395)并感染HAFs,检测HAFs中纤维化相关基因Col1a1、Col3a1和Acta2的mRNA和蛋白表达。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA pull-down实验分别鉴定circRNA_100395与微小RNA miR-144-3p的结合作用。【结果】Masson染色结果显示AF病人心耳组织的纤维化明显加重(P<0.01)。CircRNA_100395在AF患者心耳组织中表达降低(P<0.05),但在Ang-Ⅱ诱导的HAFs中表达明显升高(P<0.05),且主要分布于HAFs细胞质内。放线菌素D实验证明circRNA_100395的RNA稳定性明显高于其宿主基因KLHL20 mRNA。过表达circRNA_100395抑制HAFs中纤维化相关基因表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull-down实验均证实circRNA_100395与miR-144-3p存在特异性的结合作用。CircRNA_100395可抑制miR-144-3p促HAFs中纤维化相关基因表达的作用。【结论】CircRNA_100395通过特异结合miR-144-3p来发挥抑制纤维化相关基因表达的作用。

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