UCH-L3通过影响RAD51调控牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化

胡蕾; 王轶敏; 张林林; 李新; 郭益文; 丁向彬

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本研究旨在探究泛素蛋白酶体系统中羧基末端水解酶L3(Ubiquitin C-Terminal Hydrolase L3,UCH-L3)通过影响RAD51调控牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的机制。使用已经建立的牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,体外模拟骨骼肌的发育过程,采用免疫沉淀技术检测UCH-L3与RAD51是否相互作用,检测UCH-L3是否调控RAD51的泛素化水平,设计并合成RAD51的si-RNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,筛选出有显著干扰效果的si-RNA,研究干扰RAD51后增殖和分化标志基因PAX7和MyHC表达水平变化,综合分析UCH-L3通过影响RAD51调控牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的机制。结果表明:过表达UCH-L3后RAD51的蛋白水平显著升高,UCH-L3可以调控RAD51的表达水平。UCH-L3与RAD51存在体内相互作用,UCH-L3可以影响RAD51的蛋白稳定性,干扰UCH-L3表达可以缩短RAD51的半衰期,UCH-L3能够调控RAD51泛素化水平,干扰RAD51后,牛骨骼肌卫星细胞增殖标志因子PAX7的蛋白水平与对照组无差异,分化标志因子MyHC的蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),干扰RAD51表达对细胞增殖没有明显影响,但可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化。本研究结果表明,UCH-L3可以通过影响RAD51调控牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化进程。

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来源
《天津农学院学报》 |2023年第2期|1-6|共6页
作者
胡蕾; 王轶敏; 张林林; 李新; 郭益文; 丁向彬;
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作者单位

天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂;
关键词
RAD51; UCH-L3; 牛骨骼肌卫星细胞; 增殖; 成肌分化;

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