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巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

         

摘要

提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA.采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA.将ds cDNA和经Sma Ⅰ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库.结果表明,转化单菌落个数为2.8 ×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500 ~2 000 bp间;重组率为96%.实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选.

著录项

  • 来源
    《热带生物学报》 |2013年第4期|303-307|共5页
  • 作者单位

    海南大学农学院;

    海南海口570228;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;

    海南海口571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;

    海南海口571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;

    海南海口571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;

    海南海口571101;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因载体;
  • 关键词

    橡胶树; 酵母双杂交; cDNA文库;

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