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用宿主范围扩大的重组AcNPV在家蚕中表达TNF

         

摘要

用宿主范围扩大的核型多角体病毒双穿梭载体 Bonpvid与重组转座质粒 p Fast- TNF转座 ,使含有TNF基因的表达盒插入 Bonpvid的 Tn7att的接受位点筛选阳性重组 E.coli菌落 .将提取的阳性重组子 DNA分别转染家蚕 Bm N细胞和 Sf- 9细胞 ,获得了能表达 TNF的重组病毒 .SDS- PAGE和 Western blot分析表明 ,TNF在上述两种细胞中得到表达 .以家蚕作为生物反应器 ,将含有重组病毒的细胞上清注射感染家蚕 4龄幼虫 ,使TNF在蚕体表达 .用 Bm N细胞中表达的 TNF感染肿瘤细胞 ,诱导细胞发生了凋亡 .

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