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流式细胞术在测定竹类植物基因组大小中的应用

         

摘要

[目的]分析竹类植物不同组织部位及不同处理方法对其基因组大小的影响,可提高植物基因组大小测定精度.[方法]以竹类植物叶片和笋为材料,以水稻Oryzasativa为参照,设置细胞核染色时间为1、3、5、7、9、12、18、24和30min共9个梯度,利用流式细胞仪对不同组织部位及处理的基因组大小进行分析.[结果]①对同一竹种而言,其叶片和笋流式峰形图相似,基因组大小仅存在微小差异,差值为0.04~0.20 pg.②不同竹种对染色时间要求不同,其中,唐竹 Sinobambusa tootsik、花叶唐竹 Sinobambusa tootisik f.albo-striata、平安竹 Pseudosasa japonica var.tsutsumiana、曙筋矢竹Pseudosasa japonica f.akebono、美丽箬竹Indocalamus decorus、花叶赤竹Sasaella glabra f.albo-striata 及红秆寒竹Chimonobambusa mamorea f.variegata染色1 min即达到最大荧光峰值,孝顺竹Bambusa multiplex和黄皮绿筋竹Phyllostachys sulphurea 染色3 min 达到最大峰值,茶竿竹Pseudosasa amabilis var.amabilis 和柳叶细竹Thyrsostachy ssiamensis染色5 min达到最大峰值,仅黄皮刚竹Phyllostachys sulphurea(叶片)7 min达到最大峰值.③12个竹种的荧光强度在1~30 min内存在较大变化,除茶竿竹、柳叶细竹、孝顺竹叶片及唐竹笋外,其他竹种的荧光强度变化值均在5%以上,特别是平安竹和花叶赤竹变化更大,分别为12.93%和12.88%.④热带木本竹种孝顺竹和柳叶细竹基因组大小为(1.64±0.54)~(2.69±1.01)pg,其他10个温带竹种基因组大小为(3.76±1.51)~(5.73±1.85)pg.10个温带竹种中,刚竹属Phyllostachys竹种基因组较小,大小为(3.76±1.51)~(3.91±0.95)pg,其他竹属的一些竹种基因组较大,大小为(4.82±0.54)~(5.73±1.85)pg.[结论]①竹类植物叶片和笋均可作为基因组大小分析材料,细胞核染色时间对基因组大小测定结果存在一定影响,染色时间以3~5 min最佳.②热带木本竹种基因组大小明显小于温带木本竹种,温带木本竹种中,刚竹属竹种的基因组大小明显小于其他竹种.

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