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核转录因子TR3小干扰RNA载体的构建及其效果鉴定

         

摘要

目的:构建核孤儿受体TR3的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,并进行沉默效果测定.方法:根据TR3 mRNA序列和载体psiSTRIKE的粘性末端,设计合成TR3的干扰RNA序列,退火后克隆至psiSTRIKE,经测序鉴定后用阳离子脂质体将重组子和TR3高表达载体TR3-pcDNA共转染至HEK293细胞中.以Western blotting检测干扰后HEK293细胞内TR3表达的变化.结果:Western blotting检测结果证实构建的TR3 siRNA表达重组载体可显著抑制HEK293细胞内TR3的高表达.结论:构建了核孤儿受体TR3 siRNA真核表达载体.

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