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马法兰和阿霉素耐药人骨髓瘤细胞系的建立

         

摘要

目的:建立对马法兰和阿霉素耐药的人骨髓瘤细胞系.方法:在人骨髓瘤细胞系RPMI8226培养体系中分别加入1.0×10-8 M的阿霉素(DOX)和1.0×10-6 M的马法兰(LP),每周3次换液,DOX于10月后增加至1.0×10-7 M,LP于47周后增加至5×10-6 M.MTT法测定敏感细胞系和耐药系8226/DOX的IC50值,在耐LP细胞系8226/LP中加入丁硫氨酸亚砜胺(BSO)阻断谷胱甘肽的合成,MTT法测定细胞系8226/S、8226/LP细胞及8226/LP+BSO细胞的IC50值.HE染色普通光学显微镜下观察各组细胞形态,流式细胞仪检测各组细胞表面P-糖蛋白、CD38、CD45、CD19.台盼蓝拒染法测出8226/S、8226/DOX、8226/LP细胞的生长曲线.结果:所培养耐药细胞系8226/DOX、R8226/LP具有亲母细胞系的生物学特点,形态相似,均为CD38+CD45-CD19-表达细胞,倍增时间与亲母细胞系相近.比较IC50,8226/DOX对DOX的耐药约15倍于亲母细胞系.8226/LP对LP的耐药约7倍于亲母细胞系,而经过BSO阻断,其敏感性明显增加.结论:建立的骨髓瘤细胞系RPMI8226/LP、RPMI8226/DOX可作为骨髓瘤耐药研究的有效模型.

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