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以Br-DMEQ作柱前衍生化试剂测定大鼠脑组织中脂肪酸的荧光-HPLC方法研究

         

摘要

目的 建立大鼠脑组织中长链饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸高效液相色谱分离及测定,对衍生化反应条件及色谱分离条件进行优化.方法 3-溴甲基-6,7-二甲氧基-1-甲基-2(1H)喹喔啉酮(Br-DMEQ)作荧光标记试剂,72%乙腈-水溶液作流动相,色谱柱为岛津shim-pack CLC-C8(150mm×6.0mmφ),HPLC柱前衍生化分离测定脂肪酸.结果 获得了该衍生化试剂与脂肪酸的最佳衍生化反应条件及衍生物荧光强度衰减情况,最佳色谱分离条件及C12:0-C22:6的12种脂肪酸的分离图谱.0.2ng/ml~8.0ng/ml浓度范围内线性关系良好,回收率为83.2%-100.6%.本方法最低检测限0.2 pg/ml.结论 方法重现性好,灵敏度高,快速、简便、准确可靠,是一种崭新的测定生物材料中脂肪酸的定量方法.

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