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长链非编码RNA DLX6-AS1通过靶基因miR-103a-3p调控宫颈癌SiHa细胞的分子机制

         
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目的 探讨长链非编码RNA DLX6-AS1通过靶基因miR-103a-3p调控宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制.方法 培养正常宫颈细胞Ectl/E6E7和宫颈癌细胞株HeLa、SiHa、C33a、Caski.将SiHa 随机分为对照(NC)组、si-con 组、si-DLX6-ASl 组、PCDNA 组、PCDNA-DLX6-AS1 组、miR-con 组、miR-103a-3p组、si-DLX6-ASl+anti-miR-con 组、si-DLX6-ASl+anti-miR-103a-3p 组.RT-qPCR 检测各组细胞中miR-103a-3p和DLX6-AS1表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测DLX6-AS1和miR-103a-3p的靶向关系.结果 与正常宫颈细胞Ectl/E6E7相比,宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C33a、Caski中DLX6-AS1表达水平升高,miR-103a-3p表达水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).干扰DLX6-AS1表达或miR-103a-3p过表达后,细胞活性降低,细胞凋亡率升高,迁移、侵袭数量减少,CyclinDl、Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达水平降低,Bax、Cleaved caspase-3表达水平升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).同时抑制miR-103a-3p和DLX6-AS1表达后,宫颈癌SiHa中MMP-2、MMP-9、CyclinDl、Bcl-2表达水平升高,Bax、Cleaved caspase-3表达水平降低,细胞活性升高,细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).DLX6-AS1靶向调控miR103a-3p的表达.结论 干扰DLX6-ASl表达可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-103a-3p表达有关,可能为宫颈癌的治疗提供新思路和新靶点.

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