鹦鹉热嗜衣原体CPSIT_0018融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其在Hela细胞中的定位

贺庆芝; 曾怀才; 陆春雪; 胡艳群; 陈芝喜; 王川; 吴移谋

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目的构建鹦鹉热嗜衣原体（Cps）CPSIT_0018原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,观察其在感染的Hela细胞中的定位。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT_0018基因,并构建pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT_0018融合蛋白表达,进一步用该融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接免疫荧光法分析His-CPSIT_0018蛋白在Hela细胞中的分布特征。结果成功构建了pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;在Cps感染的Hela细胞中CPSIT_0018的分布与主要外膜蛋白MOMP相似,而与包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同。结论成功克隆表达了His-CPSIT_0018,该蛋白定位在Cps包涵体内。

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来源
《中南医学科学杂志》 |2014年第3期|P.229-232|共4页
作者
贺庆芝; 曾怀才; 陆春雪; 胡艳群; 陈芝喜; 王川; 吴移谋;
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作者单位

南华大学病原生物研究所,湖南衡阳421001;

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正文语种 CHI
中图分类 R374.2;
关键词
鹦鹉热嗜衣原体; CPSIT_0018; 克隆表达; 细胞定位;

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