细胞定位

摘要： 旨在制备鸡Toll样受体15(ChTLR15)的特异性单克隆抗体(mAb),并初步应用。利用PCR技术扩增ChTLR15第162—386位氨基酸,克隆于载体pET-30a中进行诱导表达,获得高纯度的重组ChTLR15(162—386 aa)蛋白。然后采用皮下多点注射方式将ChTLR15免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,常规获得针对ChTLR15蛋白的单克隆抗体。运用原核表达系统对ChTLR15基因进行截短表达,对单克隆抗体针对的ChTLR15抗原表位进行鉴定。利用6C7株单克隆抗体以激光共聚焦显微技术对鸡HD11细胞进行定位,同时,利用免疫组化技术确定ChTLR15在鸡部分组织中的分布情况。结果表明:成功构建重组质粒pET-30a-ChTLR15(162—386 aa),经IPTG诱导表达后,获得以包涵体形式存在的约26 ku的重组蛋白ChTLR15(162—386 aa)。方阵试验表明,最适血清稀释度为1∶6400,最适抗原包被浓度为0.35μg·mL^(-1)。采用有限稀释法进行4轮筛选,最终获得4株针对ChTLR15蛋白的单克隆抗体,将其以2G4、6C7、6D10、7C4进行命名。2G4与6C7的亚类为IgG2a,6D10与7C4的亚类为IgG1。Western blot结果显示,4株单抗均能与ChTLR15发生特异性反应,而不与其他受检蛋白反应。运用原核表达系统对ChTLR15(162—386 aa)进行截短表达,对ChTLR15单克隆抗体的抗原表位进行鉴定。结果显示,单抗2G4与7C4识别的抗原表位为^(230)QLGTVLEF^(237),6C7与6D10识别的抗原表位为^(245)EMDLLS^(250)。细胞定位结果显示,ChTLR15蛋白位于细胞表面。免疫组化结果显示,健康对照鸡肝、脾、肺、肾均有微弱阳性染色,禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)感染鸡肝、脾、肺、肾阳性染色有所增强。本研究通过淋巴细胞杂交瘤技术成功获得4株抗ChTLR15蛋白的单克隆抗体,通过截短免疫原蛋白法对其识别的线性表位进行鉴定,可用于进一步研究ChTLR15的结构与功能,为后续信号通路、免疫机理、疫苗研发等相关领域的研究提供了有力工具。

摘要： 【目的】性腺型芳香化酶基因cyp19a1a在硬骨鱼类性腺发育和性别决定过程中具有重要作用,克隆分析该基因在生长和体型性状具有性别二态性兰州鲇(Silurus lanzhouensis)不同组织的表达与定位,并对已获得YY超雄个体的雌雄同体亲本进行不同组织表达验证分析,为加快培育全雄兰州鲇良种新品种提供理论依据和技术支撑。【方法】采用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)法获得兰州鲇cyp19a1a全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测该基因在3月龄、1龄和3龄兰州鲇正常雌雄鱼和3龄雌雄同体鱼的不同组织表达,并采用免疫组织化学法(IHC)分别检测该基因在3月龄、1龄和3龄正常雌性鱼性腺组织的表达与定位。【结果】cyp19a1a c DNA序列全长为2168 bp,其中5′非编码区(Untranslated region,UTR)53 bp,开放阅读框(OFR)1707 bp,3′UTR408 bp,编码568个氨基酸残基,具有芳香化酶氨基酸序列的保守功能区。兰州鲇cyp19a1a mRNA主要在性腺表达,3龄雌雄同体表达特征与3龄正常繁育个体相同,且卵巢表达量显著高于精巢(P<0.05);正常繁育养殖个体表达量随性腺发育而显著增加。IHC结果显示,不同时期卵巢组织中,卵原细胞仅在3月龄和1龄分布且没有发现阳性信号,卵母细胞在不同时期均有分布且信号随着卵母细胞发育而逐渐增强,其中3月龄至1龄主要分布于胞质,3龄时主要分布于胞质、滤泡膜以及放射膜和鞘膜细胞;不同时期精巢组织中仅在间质细胞有微弱表达。【结论】cyp19a1a基因在兰州鲇卵巢发育和卵细胞生长发育过程中都具有重要作用,对精巢发育和维持以及精子发生具有一定的促进作用,在雌雄同体兰州鲇性腺中的作用和兰州鲇正常繁育个体一致。本研究为鱼类性别决定与分化以及性腺发育调控机制提供了重要的理论依据。

摘要： 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)为猪流行性腹泻的病原体,感染上该病毒的仔猪出现脱水、腹泻和呕吐,给世界养猪业造成了经济损失。PEDV囊膜蛋白E在病毒包膜形成、病毒离子形成、病毒出芽和释放过程中发挥至关重要的作用。根据软件预测可知,PEDV E蛋白是一种有一个跨膜域的跨膜蛋白。研究将PEDV E蛋白设计好的截短基因(E-T1、E-T2和E-T3)连接至pCMV-myc真核表达载体中,经PCR和双酶切鉴定结果表明已构建成功。最后,将重组质粒pCMV-myc-E、E蛋白截短基因质粒Myc-E-T1、Myc-E-T2和Myc-E-T3转染HEK-293T细胞和IPEC-J2细胞,通过间接免疫荧光技术观察其E蛋白以及截短基因的细胞分布情况,并探究是否与内质网发生共定位。研究结果发现,E蛋白以及E-T1、ET2分布在细胞质并定位在内质网,而E-T3则分布在整个细胞且没有与内质网共定位。说明了E-T1、E-T2可能行使着与E蛋白类似的功能,而E-T3则没有。研究为进一步探讨PEDV的E蛋白功能和分子生物学特性奠定了基础。

摘要： 新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,FcRn)能够特异性识别并跨越黏膜屏障转运IgG.为了确定猪(Sus scrofa)FcRn与IgG抗体Fc段CH2结构域的互作关系,本研究通过逆转录PCR技术克隆获得猪IgG抗体Fc段CH2基因片段,并将其亚克隆至原核表达载体pEGX-4T-1,经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导融合蛋白表达并通过谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)亲和柱纯化.同时将IgG CH2基因片段亚克隆至真核表达载体pEGFP-C1,通过共转染确定IgG CH2与FcRn在非洲绿猴(Chlorocebus sabaeus)肾细胞(COS-7)中的细胞共定位,免疫共沉淀验证IgG CH2与FcRn的相互作用;进一步通过ELISA方法检测CH2与FcRn在不同pH值下的结合力.结果表明,克隆获得猪IgG CH2基因全长330 bp,编码110个氨基酸.诱导表达的融合蛋白GST-CH2相对分子量为38.4 kD,该蛋白在诱导菌体中以可溶性和包涵体两种形式存在.激光共聚焦观察显示,IgG CH2与FcRn共定位于细胞质中,具有共聚集现象.免疫共沉淀显示,通过标签蛋白GFP和Flag,在所有的共沉淀条带中,均能检测到对应的目的条带,说明IgG CH2能够结合FcRn.ELISA结果表明,IgG CH2与FcRn的结合呈现pH值依赖性.综上所述,本研究确定了FcRn与IgG抗体Fc段CH2结构域存在细胞共定位与互作关系,二者的结合具有pH依赖性,这为构建新的基于Fc的小型抗体融合蛋白提供了材料.

摘要： 目的 用组织芯片技术检测间皮素在胆囊癌和癌旁正常胆囊组织中的细胞定位情况,探讨其临床意义.方法 将20例份胆囊癌及其癌旁正常胆囊组织各1位点、单独60例份胆囊癌组织各1位点,制备成共100位点的胆囊癌组织芯片,采用免疫组化法检测间皮素在细胞膜、细胞质、细胞核中的表达情况.结果 胆囊癌组织中细胞膜间皮素表达高于癌旁正常胆囊组织(P<0.05),而在细胞质、细胞核中间皮素表达差异无统计学意义.结论 间皮素在胆囊癌组织细胞膜中高表达,而在细胞质和细胞核中无差异性表达;间皮素在胆囊癌发生发展中起重要作用,有可能成为胆囊癌潜在的诊断标志物和治疗靶点.

摘要： 为研究组蛋白H2A对龟鳖动物生殖细胞发育分化作用和机制,克隆了中华鳖(Pelodiscus sinensis)组蛋白H2A变体的同源物(命名为PsH2A),分析其转录本的表达模式及在卵巢发育成熟过程中的细胞定位.PsH2A cDNA序列全长575 bp,5′端非编码区68 bp,3′端非编码区108 bp,开放阅读框399 bp,编码133个氨基酸.氨基酸序列比对结果显示其与龟类的H2A变体同源性更高,与哺乳类同源性较低.RT-qPCR和RT-PCR结果显示,PsH2A转录本在1冬龄、2冬龄和3冬龄的中华鳖卵巢中高表达(P<0.01),而在精巢和其他成体组织中几乎检测不到.化学原位杂交结果显示,PsH2A mRNA在卵母细胞中特异性表达,其中初级卵母细胞中表达信号最强,且均匀的分布在细胞质中.随着卵母细胞发育成熟进入到生长期和成熟期后,目的信号逐渐减弱,并且主要在核周区域表达.此外,PsH2A mRNA的相对表达量也表现出中华鳖卵巢发育的季节性变化.综上,研究结果表明PsH2A在中华鳖卵母细胞发育过程中可能发挥着重要作用.

摘要： 为了探究微生物还原Cr(Ⅵ)的细胞定位以及还原过程中相关蛋白的功能,以嗜碱性Cr(Ⅵ)高效还原细菌克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)Z3为研究对象,结合扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、X射线光电子能谱分析(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)、能量色散X射线谱(energy dispersive spectroscopy,EDS)以及双向电泳联合质谱,考察了铬(Cr)在菌株Z3内的分布特征、细胞各组分对Cr(Ⅵ)的还原能力以及Cr胁迫条件下菌株Z3的全细胞蛋白表达差异.结果表明,100 mg·L-1 Cr(Ⅵ)处理组,菌体胞外多聚物、细胞膜、细胞壁和细胞质的总Cr质量浓度分别为8.00、1.49、1.84和3.05 mg·L-1.细胞各组分的还原能力由高到低依次为胞外多聚物>细胞质>细胞膜>细胞壁.SEM结果表明,菌体还原Cr(Ⅵ)的主要位置为胞外多聚物.还原过程及还原结束菌体细胞的EDS检测结果进一步证明,Cr(Ⅵ)的还原过程发生在胞外.XPS分析表明,Cr(Ⅵ)被还原为Cr(Ⅲ),产生的蓝灰色沉淀为Cr(OH)3.双向电泳联合质谱对相关功能蛋白的鉴定结果表明,Cr(Ⅵ)胁迫条件下,菌株Z3有23个蛋白的表达量上调1.5倍以上,功能上分别聚类于蛋白质合成、能量代谢、氨基酸代谢、胁迫应答、免疫应答、信号传导和脂肪酸代谢共7大类.

摘要： 旨在获得猪CCA R1基因的完整CDS序列,研究其亚细胞定位和表达特性,探究其对细胞增殖的影响和作用机制.本研究以1日龄马身猪肾组织cDNA为模板,采用RT-PCR技术分段扩增猪CCA R1基因的CDS区,通过测序和序列拼接获得完整CDS区;采用细胞免疫荧光技术检测CCAR1在PK15细胞中的定位;采用qRT-PCR技术检测猪CCA R1基因的时空表达规律;采用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除PK15细胞的CCA R1基因,通过qRT-PCR、Western blot以及CCK8(cell counting kit 8)技术检测CCA R1基因敲除对细胞增殖能力及细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响.结果表明,猪CCAR1基因的完整CDS区长3459 bp(MH301308.1),在PK15细胞的细胞质和细胞核中均有表达.大白猪和马身猪不同组织CCA R1的表达谱基本相似,在所检测的组织中均有表达,均表现为在肾和小肠中表达量最高,在脾、肝、小脑和肌肉中呈中度表达,在心和皮下脂肪中低表达;CCA R1基因在大白猪和马身猪初生、3月龄和6月龄3个年龄阶段的两种骨骼肌中也均有表达.CRISPR/Cas9基因编辑系统能有效降低CCA R1的表达,在转染48 h后,相比于对照组,试验组都对细胞增殖产生极显著抑制(P<0.01);CCAR1基因敲除后,细胞增殖标记基因Mki67表达水平显著下降(P<0.05),Wnt通路下游靶基因C-myc表达量显著下降(P<0.05),Wnt通路核心蛋白β-catenin和凋亡标记基因Caspase3的表达量无显著差异.CCAR1基因在猪不同组织和不同发育阶段均有表达,可能通过调控细胞增殖基因Mki67和Wnt通路下游靶基因C-myc的表达而影响细胞增殖,在猪的生长发育过程中起重要作用.

摘要： 大蒜X病毒(Garlic virus X,GarVX)隶属线状病毒科,葱X病毒属.该属病毒粒子呈弯曲线状,无包膜,长约800nm,直径约12 nm;基因组为正单链RNA,3'端具Poly(A).序列分析表明,葱X病毒属病毒成员与同属线状病毒科的马铃薯X病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和凹陷病毒属病毒具有相似的基因组结构,第一个阅读框都编码复制酶蛋白,随后是4～5个小的阅读框.在马铃薯X病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和凹陷病毒属病毒中,ORFs2～4依次重叠构成三基因盒(triple gene block,TGB),分别命名为TGB1,TGB2和TGB3,相应编码TGBp1,TGBp2和TGBp3蛋白.以GarVX为材料开展了TGB2的细胞定位及寄主体内互作蛋白的研究。研究表明，TGB2-GFP定位于内质网，并在内质网上形成颗粒结构，当内质网受到破坏时，TGB2-GFP蛋白的定位随之变化;融合RFP的TGB2蛋白能够沿内质网来源的丝状结构在细胞内进行多种方式的运动;GFP荧光扩散实验表明，TGB2-GFP能够进行细胞间的运动;通过酵母双杂交系统从大蒜中筛选获得一个分子量17。的蛋白(p17);该蛋白定位于核仁;TGB2与p17的互作改变了p17的核仁定位，但没有影响TGB2蛋白的细胞间运动。

摘要： 细胞蛋白GLTSCR2作为一种重要的肿瘤抑制因子,通过调控MDM2-p53和PTEN-Akt细胞通路而影响肿瘤的发生与发展,而GLTSCR2蛋白在病毒学中的功能尚不清楚.材料与方法GLTSCR2过表达或基因沉默的条件下,使用实时荧光定量PCR、免疫印迹、蚀斑计数等方法检测马立克病毒(MDV)、新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)及单纯疱疹病毒(HSV-1)的复制情况.使用激光共聚焦与核质分离的方法,研究GLTSCR2蛋白在病毒感染过程中的细胞定位变化.rn 通过实时荧光定量PCR的方法检测MDV meq蛋白及IBV N蛋白mRNA水平，发现过表达GLTSCR2可显著上调两种病毒蛋白的mRNA水平。使用免疫印迹法检测NDV NP蛋白表达水平，发现GLTSCR2过表达细胞中的表达量较对照组有明显上调。另外，使用TCIDso法测定上述几种病毒滴度，发现GLTSCR2过表达组较对照组提升2个lg数量级。这些结果表明，细胞蛋白GLTSCR2可优化MDV、NDV以及IBV的复制。rn 其次，本研究使用HSV作为模式病毒，发现过表达GLTSCR2细胞中，HSV-F（野毒）病毒滴度较非过表达对照组提升了2个1g数量级；而基因沉默GLTSCR2的细胞中HSV-F病毒滴度明显下降。激光共聚焦实验显示核仁蛋白GLTSCR2在HSV-F感染的细胞中有明显的出核现象，而在复制缺陷病毒株d120感染的细胞中，GLTSCR2的细胞定位没有变化。使用病毒复制抑制剂PMEG处理HSV-F感染的细胞，GLTSCR2的出核现象有所减少；而使用出核抑制剂LMB处理GLTSCR2过表达的细胞，HSV-F的复制受到明显抑制；过表达GLTSCR2出核序列缺失突变体不能明显促进HSV-F复制，上述研究表明GLTSCR2蛋白的出核促进病毒复制。最后，通过核质分离法，发现NDV等病毒感染时细胞蛋白GLTSCR2也存在出核现象，可见GLTSCR2的定位变化与病毒复制密切相关。rn 本研究发现细胞蛋白GLTSCR2可促进多种病毒复制，为抗病毒制剂的研究提供了新靶点。

摘要： 目的：研究不易感动脉粥样硬化动物-树鼩载脂蛋白AV基因不同结构域对细胞内定位的影响.方法：前期实验室利用快速扩增cDNA末端技术成功获得了该基因的cDNA全长,该基因有两个转录本,分别为1948bp和1937bp,在GenBank中的注册号分别为HQ913636.1和HQ913637.1.结果：成功构建了树韵载脂蛋白AV系列表达载体，pDsRed-WT(野生型)，pDsRed-FN(N端)，pDsRed-CR(C端)，并突变了187位氨基酸(Gly→Cys)229位氨基酸(Cys→Gly)，318位氨基酸(Leu→Arg)和318位和319位氨基酸同时突变(LeuAla→ArgVal)。活细胞细胞定位显示，转染空载体后，荧光蛋白均匀分布，转染pDsRed-WT(野生型)等，红色荧光蛋白主要分布于细胞质，单点突变、双点突变并不影响该蛋白的细胞质定位，只有N端和C端的该蛋白也可以引导载脂蛋白AV正确定位。细胞爬片固定实验也支持上述的实验结果。结论：成功构建了载脂蛋白AV系列突变体，该蛋白主要在细胞质内定位，基于现有结果可以初步说明载脂蛋白AV在细胞质内发挥重要作用，系列突变体的成功构建为进一步研究不同结构域的功能奠定了良好的基础。

摘要： NMBGs通过MC3T3-E1细胞细胞核周围的细胞膜粘附并吞噬，而不会从细胞核上方细胞膜吞噬，吞噬颗粒的尺寸受细胞大小和细胞内空间限制，特别是细胞核周围的细胞厚度的限制。MC3T3-E1细胞通过吞噬的形式实现NMBGs的内在化，通过运输泡运输颗粒。小颗粒(Group-61nm和Group-174nm)被溶酶体吞噬并倾向于滞留在溶酶体内，将被逐步降解，大颗粒(粒径大于327nm)将从溶酶体逃逸进细胞质，引起溶酶体破裂而导致凋亡。

摘要： NMBGs通过MC3T3-E1细胞细胞核周围的细胞膜粘附并吞噬，而不会从细胞核上方细胞膜吞噬，吞噬颗粒的尺寸受细胞大小和细胞内空间限制，特别是细胞核周围的细胞厚度的限制。MC3T3-E1细胞通过吞噬的形式实现NMBGs的内在化，通过运输泡运输颗粒。小颗粒(Group-61nm和Group-174nm)被溶酶体吞噬并倾向于滞留在溶酶体内，将被逐步降解，大颗粒(粒径大于327nm)将从溶酶体逃逸进细胞质，引起溶酶体破裂而导致凋亡。

摘要： NMBGs通过MC3T3-E1细胞细胞核周围的细胞膜粘附并吞噬，而不会从细胞核上方细胞膜吞噬，吞噬颗粒的尺寸受细胞大小和细胞内空间限制，特别是细胞核周围的细胞厚度的限制。MC3T3-E1细胞通过吞噬的形式实现NMBGs的内在化，通过运输泡运输颗粒。小颗粒(Group-61nm和Group-174nm)被溶酶体吞噬并倾向于滞留在溶酶体内，将被逐步降解，大颗粒(粒径大于327nm)将从溶酶体逃逸进细胞质，引起溶酶体破裂而导致凋亡。

摘要： NMBGs通过MC3T3-E1细胞细胞核周围的细胞膜粘附并吞噬，而不会从细胞核上方细胞膜吞噬，吞噬颗粒的尺寸受细胞大小和细胞内空间限制，特别是细胞核周围的细胞厚度的限制。MC3T3-E1细胞通过吞噬的形式实现NMBGs的内在化，通过运输泡运输颗粒。小颗粒(Group-61nm和Group-174nm)被溶酶体吞噬并倾向于滞留在溶酶体内，将被逐步降解，大颗粒(粒径大于327nm)将从溶酶体逃逸进细胞质，引起溶酶体破裂而导致凋亡。

摘要： NMBGs通过MC3T3-E1细胞细胞核周围的细胞膜粘附并吞噬，而不会从细胞核上方细胞膜吞噬，吞噬颗粒的尺寸受细胞大小和细胞内空间限制，特别是细胞核周围的细胞厚度的限制。MC3T3-E1细胞通过吞噬的形式实现NMBGs的内在化，通过运输泡运输颗粒。小颗粒(Group-61nm和Group-174nm)被溶酶体吞噬并倾向于滞留在溶酶体内，将被逐步降解，大颗粒(粒径大于327nm)将从溶酶体逃逸进细胞质，引起溶酶体破裂而导致凋亡。

摘要： 介孔生物玻璃(MBG)纳米球因具有良好的载药性能,而在纳米医药领域吸引了广泛的关注.然而,决定MBG纳米球能否应用于临床的关键一纳米颗粒的体内代谢过程和生物安全性却仍不清楚.本研究首次通过45Ca定量示踪技术结合临床生化表现和组织病理学分析,研究可载药MBG纳米球30天内的全身分布、血液存留时间、对机体代谢功能和主要脏器的影响以及最终排泄路径,并重点分析MBG纳米球在肝细胞内的定位和对细胞的损伤效应.

摘要： 介孔生物玻璃(MBG)纳米球因具有良好的载药性能,而在纳米医药领域吸引了广泛的关注.然而,决定MBG纳米球能否应用于临床的关键一纳米颗粒的体内代谢过程和生物安全性却仍不清楚.本研究首次通过45Ca定量示踪技术结合临床生化表现和组织病理学分析,研究可载药MBG纳米球30天内的全身分布、血液存留时间、对机体代谢功能和主要脏器的影响以及最终排泄路径,并重点分析MBG纳米球在肝细胞内的定位和对细胞的损伤效应.

摘要： 本发明单细胞分选仪的样品菌落定位装置与定位方法，包括：样品芯片、运动控制模块、样品芯片固定机构、成像模块、计算机以及显示模块；所述样品芯片固定机构连接在所述运动控制模块上，可由所述运动控制模块带动其一起进行水平与垂直方向上的运动；保证样品芯片上的生物样品清晰成像，并将成像传送到所述计算机与显示模块中，本发明样品菌群的自动定位大大节省了用户的操作时间，智能化的定位过程优化了操作流程，减少了人工位置对准带来的时间消耗；定位精度高，大大降低了人为操作误差产生的观测不准，数据有误的情况。

摘要： 本发明属于生物医用高分子材料技术领域，公开了一类具有穿膜活性和细胞核定位功能的抗血清、低细胞毒性的聚氨基酸类基因递送载体材料及其制备方法与应用。本发明的聚氨基酸类基因递送载体材料具有如附图1所示结构，其侧链具有不同取代度的胍基阳离子和低聚乙二醇，能有效地与基因形成纳米复合物颗粒，还能有效地降低载体的细胞毒性并提升纳米颗粒的血清稳定性，可向靶细胞内传递外源基因，转染效率好；当本发明载体递送基因时，载体的穿膜活性可将基因直接穿透细胞膜而进入细胞质，核定位功能又能使其携带的基因从细胞质直接进入细胞核，有效避免纳米颗粒的溶酶体陷阱，特别适合外源基因的细胞质和细胞核的靶向递送。

摘要： 本发明单细胞分选仪的样品菌落定位装置与定位方法，包括：样品芯片、运动控制模块、样品芯片固定机构、成像模块、计算机以及显示模块；所述样品芯片固定机构连接在所述运动控制模块上，可由所述运动控制模块带动其一起进行水平与垂直方向上的运动；保证样品芯片上的生物样品清晰成像，并将成像传送到所述计算机与显示模块中，本发明样品菌群的自动定位大大节省了用户的操作时间，智能化的定位过程优化了操作流程，减少了人工位置对准带来的时间消耗；定位精度高，大大降低了人为操作误差产生的观测不准，数据有误的情况。

摘要： 本发明提供了一种重定位涂片上的细胞的方法及其装置、存储介质，方法包括：获取涂片的身份信息、涂片的参考点的第一位置信息，以及涂片中的各个待拍摄细胞相对于参考点的第一位置信息的第二位置信息；在第一拍摄条件下拍摄各个待拍摄细胞的第一细胞图像，并将其和第二位置信息与身份信息相关联地存储；当接收到再次拍摄指令时，根据身份信息、第二位置信息和参考点当前的第三位置信息，控制图像获取装置与涂片相对运动，使至少一个已拍摄细胞位于图像获取装置的拍摄视野中。该方法及其装置、存储介质，减少了重新分析涂片的时间，节约了大量的医疗资源，极大提高了定位指定细胞的准确性。

摘要： 本发明属于生物医用高分子材料技术领域，公开了一类具有穿膜活性和细胞核定位功能的抗血清、低细胞毒性的聚氨基酸类基因递送载体材料及其制备方法与应用。本发明的聚氨基酸类基因递送载体材料具有如附图1所示结构，其侧链具有不同取代度的胍基阳离子和低聚乙二醇，能有效地与基因形成纳米复合物颗粒，还能有效地降低载体的细胞毒性并提升纳米颗粒的血清稳定性，可向靶细胞内传递外源基因，转染效率好；当本发明载体递送基因时，载体的穿膜活性可将基因直接穿透细胞膜而进入细胞质，核定位功能又能使其携带的基因从细胞质直接进入细胞核，有效避免纳米颗粒的溶酶体陷阱，特别适合外源基因的细胞质和细胞核的靶向递送。

摘要： 本发明属于生物技术领域，提供水稻E3泛素连接酶在检测植物细胞核亚细胞定位中的应用，本发明主要基于水稻泛素融合蛋白与荧光蛋白分子融合，结合荧光显微镜报告蛋白在细胞器中的定位。所述蛋白细胞核定位检测方法主要由指示蛋白UF和GFP组成的融合蛋白，所述融合蛋白与待测蛋白的荧光颜色不同，检测待测蛋白是否定位在细胞核。该方法可以通过农杆菌介导的瞬时表达系统，在植物细胞内瞬时表达融合蛋白，对融合蛋白进行荧光观察，能具体指示细胞核细胞器，结果判定简单、快捷，同时可消除在使用DAPI指示细胞核定位的过程中接触高毒致癌物质，提高操作的安全性等优势。

摘要： 本发明公开一种具有细胞定位功能的细胞培养板及其制备方法和细胞定位的方法。该具有细胞定位功能的细胞培养板的板孔内设有定位区，该定位区能够将板孔内的细胞由定位区的外围区域导向至并定位于该定位区。该定位区对细胞的亲和力大于定位区的外围区域对细胞的亲和力。该细胞培养板是通过物理或化学方式对细胞培养板的板孔内预定区域的材料表面进行改性而得到。使用该细胞培养板接收由流式细胞仪分选出的细胞，基于定位区与定位区的外围区域对细胞的亲和力的差异促使细胞定位于定位区。本发明提供的细胞培养板及定位方法能够将板孔内的细胞引导至预定区域，实现对细胞的定位。

摘要： 本发明提供了一种mRNA亚细胞定位模型的训练方法包括以下步骤：获取mRNA亚细胞位置序列样本集；根据多种特征提取算法对mRNA亚细胞位置序列样本集进行特征提取，利用基分类器分别对特征识别，并对基分类器一层以上集成，再根据特征提取算法和集成分类器，得到目标mRNA亚细胞定位模型。本发明通过对多个分类器集成学习训练，不但可以提高训练的效率，使得模型在训练过程更容易得到全局最优解，从而得到训练完成后的目标模型会有更优秀的预测能力和泛化能力。

摘要： 本发明公开一种实现单细胞定位和贴壁生长的单细胞生长控制平台，包括：硬质衬底或功能芯片、沉积在硬质衬底或功能芯片上的柔性支撑层、沉积在柔性支撑层上的抑制细胞生长层以及沉积在所述抑制细胞生长层上的细胞生长层；细胞生长层根据所要生长的单细胞的尺寸以及位置对所述细胞生长层进行图案化，从而得到若干个在特定位置的单个细胞的生长空间；抑制细胞生长层选用与所生长细胞生物不相容的材料，细胞生长层选用与所生长细胞生物具有生物相容性的材料。本发明的平台能够在未加入附着剂的情况下实现单细胞限域生长，实现高通量的单细胞培养，不需要对基底表面特殊进行修饰。同时本发明的平台可以基于微纳结构平台实现单细胞精度的细胞定位集成。

摘要： 本实用新型公开一种具有细胞定位功能的细胞培养板。该具有细胞定位功能的细胞培养板的板孔内设有定位区，该定位区能够将板孔内的细胞由定位区的外围区域导向至并定位于该定位区。该定位区对细胞的亲和力大于定位区的外围区域对细胞的亲和力。本实用新型提供的细胞培养板及定位方法能够将板孔内的细胞引导至预定区域，实现对细胞的定位。