德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

翟立公; 黄菊; 李港回; 王俊颖

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德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

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【背景】德尔卑沙门氏菌(Salmonella enterica subsp.enterica Derby)是危害人类生命安全的主要致病性血清型。【目的】建立一种准确、快速检测德尔卑沙门氏菌的方法。【方法】通过建立叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)的方法准确有效地检测样品中的活德尔卑沙门氏菌。【结果】使用基因RU61_00441作为检测靶点,设计引物SD1正确地鉴定了所有被测菌株。实验结果表明,PMA处理能有效区分活细胞和死细胞。基因组DNA检测限为761.2 fg/μL,活菌检测限为45 CFU/mL。此方法检测德尔卑沙门氏菌的血清型不受自然背景(猪肉、鸡肉和牛肉)菌群基因组DNA的影响。此外,该方法还可以检测出动物性食品中富集6 h后浓度低至3.9 CFU/mL的德尔卑沙门氏菌。【结论】这种PMA-RPA检测方法耗时短并具有更好的灵敏度和特异性,能为沙门氏菌的检测提供更有效的指导。

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来源
《微生物学通报》 |2022年第3期|1214-1223|共10页
作者
翟立公; 黄菊; 李港回; 王俊颖;
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作者单位

安徽科技学院;

安徽滁州233100;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学检验;
关键词
德尔卑沙门氏菌; 重组酶聚合酶扩增; 叠氮溴化丙锭; 特异性基因;

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