淀粉酶产生菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

王屈祎; 钟倩; 闫如玉; 马醒佳; 王会; 刘思瑜; 吴凌天

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淀粉酶产生菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

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背景】淀粉酶可以水解淀粉,在淀粉制糖、白酒、黄酒、啤酒和食醋等食品发酵行业有着广泛的应用。【目的】从高温酒曲中筛选获得产淀粉酶的芽孢杆菌属菌株,并对其进行分类鉴定和产淀粉酶发酵条件优化,为发酵过程提供优良的淀粉酶资源。【方法】取高温酒曲,经过富集培养和可溶性淀粉平板筛选培养基初筛,摇瓶复筛得到高产淀粉酶的菌株;通过菌落形态、革兰氏染色观察和16S r RNA基因序列比对进行菌株鉴定;通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken design试验考察培养基成分(碳源、氮源和金属离子)和发酵条件(温度、p H和接种量)对淀粉酶产量的影响,确定最佳产淀粉酶培养基和发酵条件,并将淀粉酶应用于淀粉水解。【结果】筛选获得一株高产淀粉酶的菌株LT-2,经鉴定为Bacillus velezensis LT-2;B.velezensis LT-2产淀粉酶的最佳发酵参数为:麦芽糖8.00 g/L,大豆分离蛋白8.69 g/L,氯化铵3.00 g/L,氯化钙13.94 mmol/L,发酵初始p H 7.5,温度34.08℃,接种量6%。在最佳发酵参数下,B.velezensis LT-2经33 h发酵淀粉酶产量为972.88 U/m L,是优化前的5.01倍;5 L发酵罐中发酵,B.velezensis LT-2发酵51 h淀粉酶产量可达(1198.40±4.56)U/m L,是摇瓶发酵的1.23倍,是发酵参数优化前摇瓶发酵的6.17倍;B.velezensis LT-2所产淀粉酶具有较好的淀粉水解能力,水解速率为6.17×10^(-5)g/(U·h)。【结论】B.velezensis LT-2在淀粉酶分泌和淀粉水解方面具有良好的应用前景,研究结果为酒曲糖化能力和液化力的改善提供了理论支持。

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来源
《微生物学通报》 |2022年第1期|173-188|共16页
作者
王屈祎; 钟倩; 闫如玉; 马醒佳; 王会; 刘思瑜; 吴凌天;
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作者单位

常熟理工学院生物与食品工程学院;

江苏常熟215500;

南京中医药大学药学院;

江苏南京210023;

南京工业大学生物与制药工程学院;

江苏南京211816;

江苏久吾高科技股份有限公司;

江苏南京211808;

张家港市滨江有机农庄有限责任公司;

江苏苏州215618;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 TQ925.1;
关键词
淀粉酶; 筛选鉴定; 发酵条件优化; 贝莱斯芽孢杆菌; 酶活;

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