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一株感染铜绿假单胞菌的双链RNA噬菌体PaP6的分离和鉴定

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[目的]鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP6的生物学特性.[方法]利用铜绿假单胞菌临床分离株PA038为宿主,从西南医院污水中分离得到一株裂解性噬菌体PaP6,观察其噬斑特点;氯化铯密度梯度离心纯化噬菌体颗粒后,用透射电子显微镜观察噬菌体形态;提取PaP6基因组,通过DNA酶和RNA酶酶切,做基因组酶切图谱分析;按照感染复数(MOI)分别为10、1、0.1、0.01、0.001和0.000 1加入噬菌体和宿主菌,裂解细菌后,测定噬菌体滴度;以MOI=10的比例加入噬菌体和宿主菌,绘制一步生长曲线;用112株铜绿假单胞菌临床分离株检测PaP6宿主谱.[结果]PaP6的噬斑直径约2 mm-4 mm,圆形透明,边缘清晰;PaP6噬菌体呈多面体立体对称的头部,直径约45 nm;酶切图谱表明PaP6基因组对DNase不敏感,对RNase敏感,未酶切基因组具有3节段双链RNA(dsRNA),长度分别约为9.0、4.5、3.5kb,共约17 kb;当MOI为0.1时PaP6感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高,达到3.4×109 PFU/mL;用一步生长曲线描绘了其生长特性;PaP6可以感染40.1％的临床分离株,是一株比较广谱的噬菌体.[结论]首次报道了一株铜绿假单胞菌的dsRNA分节段噬菌体,分类学上属于囊病毒科,该噬菌体具有较广的宿主谱,在噬菌体治疗领域具有应用前景.

著录项

来源
《微生物学通报》 |2016年第5期|948-954|共7页
作者
郭棵棵; 杨雨卉; 沈伟; 费文斌; 乐率; 胡福泉;
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作者单位

第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038;

第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038;

第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038;

菲吉乐科生物科技有限公司江苏南京210000;

第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038;

第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
铜绿假单胞菌噬菌体; 双链RNA噬菌体; 囊病毒科噬菌体;

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