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反相高效液相色谱法制备HMC毒素纯品

         

摘要

本文采用反相高效液相色谱纯化制备了从玉米小斑病病菌C小种(HelminthospriummaydisRaceC)分离出来的毒素ToxinI,经NMR的结构分析证实此制备物纯度较高,达到结构分析要求。用氯仿提取含有HMC的毒素培养滤液,经过多次TLC展层层析(CHCl_3:MeOH=9:1),刮取具有侵染活性的部分(R_f=0.4)溶解在小体积甲醇中备用。色谱柱为Waters(制备型250mm×10mm)填料为YWG-C18反相柱,粒度10um,流动相选用甲醇:水55:45,流速为0.8ml/min,检测波长272nm,进样量每次100ul,当主要峰出现时,收集合并冻干保存(保留时间9.5min)。

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