中华管鞭虾(Solenocera crassicornis)蛋白酶的纯化及其生化特性研究

杨文鸽; 薛长湖; 徐大伦; 何雄; 潘云娣; 陈士国

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采用Tris-HCl缓冲液(50mmol/L, pH7.5)抽提、Q-sepharose F.F.阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶过滤层析、SDS-PAGE等方法,进行中华管鞭虾虾头蛋白酶的分离纯化、酶学性质及其动力学特性的研究.结果表明,中华管鞭虾虾头蛋白酶粗提物经层析后,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的一酶组分.该蛋白酶的比活力从359.39U/mg增加到8277.83U/mg,提高了23.03倍,回收率达37.69%,SDS-PAGE显示该蛋白酶只含一条谱带,相对分子量为24.50kDa.以偶氮酪蛋白作为底物,该酶的米氏常数Km值为0.28mg/ml,最适温度为55℃,最适pH为7.5;蛋白酶在60℃以下比较稳定,放置1h后活性仍保持在60%以上,而在60℃以上时蛋白酶活性急剧下降,80℃放置1h后,酶活性只残留21.32%.10mmol/L Cu2 +、Zn2 +和EDTA对该蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率分别约为97%、96%和55%,10mmol/L Mg2 +能显著促进蛋白酶活性,而10mmol/L Fe2 +、Ba2 +、Ca2 +对蛋白酶活性的影响不大.推测中华管鞭虾蛋白酶可能为一种金属蛋白酶.

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来源
《海洋与湖沼》 |2006年第1期|47-52|共6页
作者
杨文鸽; 薛长湖; 徐大伦; 何雄; 潘云娣; 陈士国;
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作者单位

宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;

中国海洋大学生命科学与技术学部,青岛,266003;

中国海洋大学生命科学与技术学部,青岛,266003;

宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;

浙江医药高等专科学校,宁波,315100;

宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;

中国海洋大学生命科学与技术学部,青岛,266003;

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正文语种 chi
中图分类酶;
关键词
中华管鞭虾; 蛋白酶; 纯化; 生化特性;

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