抗人釉原蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

程岚; 束蓉; 夏一如; 宁航

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抗人釉原蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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目的:制备针对人釉原蛋白的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.方法:用原核表达系统表达纯化的重组人全长釉原蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术融合免疫后小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,采用有限稀释法和间接酶联免疫吸附测定法筛选出能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株.小鼠体内诱导制备腹水,通过饱和硫酸铵沉淀法和蛋白G亲和层析柱纯化抗体.结果:筛选到3株能稳定分泌抗人釉原蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为H10G1、H3G1、G5H3.腹水单克隆抗体效价分别为1:243000、1:729000、1:729000,纯化后单克隆抗体效价为1:81000、1:243000、1:729000.3株单克隆抗体抗原表位分析显示均识别人釉原蛋白45～149位的氨基酸序列.结论:成功制备出针对人釉原蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究探讨釉原蛋白在牙根发育及牙周再生中的功能奠定了基础.

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来源
《口腔生物医学》 |2019年第1期|17-21|共5页
作者
程岚; 束蓉; 夏一如; 宁航;
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作者单位

上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙周病科,国家口腔疾病临床研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所,上海 200011;

上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙周病科,国家口腔疾病临床研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所,上海 200011;

上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙周病科,国家口腔疾病临床研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所,上海 200011;

上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙周病科,国家口腔疾病临床研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所,上海 200011;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类口腔病理学;
关键词
釉原蛋白; 融合蛋白; 单克隆抗体; 细胞融合;

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