一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

王旭初; 范鹏祥; 李银心

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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

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在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法.改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性:(3)在预酶解时不加CaCl2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析.系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果.

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来源
《植物生理与分子生物学学报》 |2007年第5期|449-455|共7页
作者
王旭初; 范鹏祥; 李银心;
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作者单位

中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093;

中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093;

中国科学院研究生院,北京,100049;

中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类植物生理学;
关键词
蛋白质组; 胶内酶解方法; 双向电泳; 肽质量指纹图谱; 质谱分析;

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