百日咳丝状血凝素酶联免疫检测法的建立

潘殊男; 肖詹蓉; 史雨舟; 张霖阳; 王宇星; 李世慧; 韩凝; 张萍

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目的建立百日咳组分疫苗丝状血凝素(FHA)抗原含量监控的ELISA检测法。方法制备的多克隆抗血清,经辛酸硫酸铵法纯化抗体,用过碘酸钠氧化法辣根过氧化物酶标记,以棋盘滴定法确定最佳包被抗体及酶标抗体的浓度配伍,建立了双抗体夹心ELISA检测法。结果对双抗体夹心ELISA法的特异性、最佳线性范围、检测限度、精密度、准确度、测定限量、适用性的一系列验证试验表明,该方法与百日咳组分疫苗中PT和Prn无明显交叉反应,特异性较好。在0至20 ng/mL测量区间有最佳线性,相关系数大于0.99;经实验内12次及不同试验间3次测定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,变异系数在0.2%～11.4%间,回收率在96.9%～114.5%间,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,因此测定限量为4 ng/mL。结论该方法能有效检测出百日咳杆菌培养上清中的FHA含量,可用于百日咳组分疫苗生产过程的中间品质量控制。

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来源
《微生物学免疫学进展》 |2012年第4期|25-28|共4页
作者
潘殊男; 肖詹蓉; 史雨舟; 张霖阳; 王宇星; 李世慧; 韩凝; 张萍;
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作者单位

北京天坛生物制品股份有限公司;

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正文语种 chi
中图分类 R378.42;
关键词
百日咳; 丝状血凝素; 酶联免疫吸附试验;

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