细菌bla_(NDM-1)基因PCR检测方法的建立及应用

温肖会; 翟少伦; 丘婷; 吕殿红; 贾春玲; 袁洁; 黄忠; 周秀蓉; 魏文康

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为了调查养殖场和农贸市场中的耐药细菌是否携带blaNDM-1基因,根据GenBank已公布的blaNDM-1基因序列设计PCR引物,优化PCR反应体系和反应条件,建立了blaNDM-1基因的PCR检测方法,以人工合成的blaNDM-1基因作为阳性质控品,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌等4株标准菌株为阴性对照,验证耐药细菌blaNDM-1基因PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性,并对229株大肠埃希菌分离株和31株链球菌分离株进行检测。结果表明,blaNDM-1基因PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验均成立,该方法扩增的目的基因片段为241bp,能检出的最小基因组DNA浓度为9.18×10-7μg/μL;229株大肠埃希菌分离株和31株链球菌分离株blaNDM-1基因PCR检测结果均没有出现目的条带,表明从广东省部分地区分离到的细菌分离株中没有携带blaNDM-1基因。该方法可作为耐药细菌blaNDM-1基因的早期检测、快速筛查手段在兽医临床耐药细菌检测中应用。

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来源
《动物医学进展》 |2013年第12期|145-149|共5页
作者
温肖会; 翟少伦; 丘婷; 吕殿红; 贾春玲; 袁洁; 黄忠; 周秀蓉; 魏文康;
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作者单位

广东省农业科学院动物卫生研究所;

华南农业大学兽医学院;

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正文语种 chi
中图分类家畜微生物学（兽医病原微生物学）;药物生物学;
关键词
blaNDM-1基因; 耐药细菌; 聚合酶链反应;

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