• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文期刊> 《眼科新进展》 >上调microRNA-27b对血小板衍生因子诱导下的人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

上调microRNA-27b对血小板衍生因子诱导下的人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

         
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

目的 观察过表达的microRNA-27b(miR-27b)对血小板衍生因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导下的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)增殖的抑制作用,探讨miR-27b在ARPE细胞生物学行为中的作用及其调控机制.方法 将miR-27b过表达质粒或空载体转入ARPE-19细胞36 h后,用终浓度为20μg·L-1的PDGF预处理ARPE-19细胞5h.根据转染物不同,将实验分为空白对照组(control组)、miR-27b阴性对照组(miR-27b NC组)、miR-27b模拟物转染组(PDGF+ mimics组)和空载体转染组(PDGF+ NC组).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染后各组ARPE-19细胞中miR-27b的表达水平;MTT法测定各组细胞活性;通过流式细胞术评估各组细胞周期的分布变化;Western blot检测各组细胞周期的正向调控因子cyclinD1、CDK4和负向调控因子p21 CIP1和p27KIP1的表达水平.结果 qRT-PCR检测结果显示:经PDGF处理5h,与miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组miR-27b的表达显著降低(P＜0.01);与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的表达增加(P＜0.01).MTT检测结果显示:与miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组ARPE-19细胞的光密度(D)值增加(P＜0.01);而与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组可明显抑制ARPE-19细胞的D值(P＜0.01).流式细胞术检测结果显示:与空白对照组和miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组G0/G1期细胞的百分比显著降低,S期细胞的百分比增加(P＜0.05);而与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的过表达显著增加了G0/G1期细胞的百分比,并抑制了细胞增殖(均为P＜0.05).Western blot检测结果显示:与PDGF-NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的过表达可显著降低cyclinD1蛋白和CDK4蛋白的表达,同时增强了p21 CIP1蛋白和p27 KIP1蛋白的表达(均为P＜0.05).结论 上调miR-27b表达可抑制PDGF诱导的ARPE细胞增殖.

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号