一种H7N9禽流感病毒检测质粒DNA标准物质的研制

许丽; 李妍; 王雪亮; 肖艳群; 刘刚

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为保证H7N9禽流感病毒核酸检测方法的可比性、有效性和可靠性,研制了一种质粒DNA标准物质,包含H7N9禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的靶标基因(H7、N9基因序列)和内参基因(M基因、RnaseP基因序列),具有良好的序列准确度和量值溯源性.采用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子对该标准物质的均匀性、稳定性进行了评估,并对定值不确定度进行了评定.结果显示,质粒DNA标准物质量值可靠,均匀性和稳定性良好,可以在-20℃下保存1 a以上,且无生物危害.对质粒DNA标准物质在实时荧光RT-PCR检测中的应用性考察结果证明,其适用于多种实时荧光RT-PCR检测方法,可保证H7N9禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测结果的可比性,为其提供生物计量技术支持.

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来源
《实验室研究与探索》 |2018年第5期|17-21|共5页
作者
许丽; 李妍; 王雪亮; 肖艳群; 刘刚;
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作者单位

上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所,上海201203;

上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所,上海201203;

上海市临床检验中心分子生物学室,上海200126;

上海市临床检验中心分子生物学室,上海200126;

上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所,上海201203;

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正文语种 chi
中图分类生物工程应用;
关键词
质粒DNA; 标准物质; 实时荧光PCR; 禽流感病毒;

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