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食品中副溶血弧菌实时荧光PCR快速检测方法的建立

         
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摘要

实时荧光PCR(Real-time PCR)是近几年兴起的分子生物学检测技术。其检测灵敏性高,特异性好且操作简便,出结果快。在众多现代检测技术中脱颖而出,成为检测领域中越来越重要的一种快速检测手段。我们针对副溶血弧菌的属特异性基因gyrB基因设计引物和探针。优化该菌的Real-timePCR反应条件,建立了食品中副溶血弧菌实时荧光PCR检测方法。材料与方法1仪器设备与试剂7300型荧光定量PCR仪(美国ABI公司),No:11175674型高速冷冻离心机、220/224型台式高速离心机为Thermo公司产品。Real-timePCR反应试剂盒为大连宝生物工程有限公司生产的TaKaRa Ex Taq产品,细菌培养用显色培养基均为法国科玛嘉(郑州博赛生物技术研究所),增菌培养基为杭州天和微生物试剂有限公司生产。2引物与TaqMan探针设计合成从GenBank中获取各种不同来源地副溶血弧菌的gyrB基因序列,应用Primer Express软件分析基因序列,根据文献提供的TaqMan引物和探针设计原则,在这些序列的保守区域筛选一对引物,并在该引物的扩增区域内设计1条荧光探针[4],见表1。探针5′,端标记的荧光报告...

著录项

  • 来源
    《浙江预防医学》 |2009年第1期|93-94|共2页
  • 作者

    徐德顺; 吴晓芳; 查云峰;

  • 作者单位

    湖州市疾病预防控制中心,浙江,湖州,313000;

    湖州市疾病预防控制中心,浙江,湖州,313000;

    湖州市疾病预防控制中心,浙江,湖州,313000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 免疫学检验方法;
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