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【2h】

Two-photon imaging of multiple fluorescent proteins by phase-shaping and linear unmixing with a single broadband laser

机译：通过单个宽带激光器的相位整形和线性解混对多种荧光蛋白进行双光子成像

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Imaging multiple fluorescent proteins (FPs) by two-photon microscopy has numerous applications for studying biological processes in thick and live samples. Here we demonstrate a setup utilizing a single broadband laser and a phase-only pulse-shaper to achieve imaging of three FPs (mAmetrine, TagRFPt, and mKate2) in live mammalian cells. Phase-shaping to achieve selective excitation of the FPs in combination with post-imaging linear unmixing enables clean separation of the fluorescence signal of each FP. This setup also benefits from low overall cost and simple optical alignment, enabling easy adaptation in a regular biomedical research laboratory.
机译：通过双光子显微镜对多种荧光蛋白（FPs）进行成像，对于研究厚实样品和活样品中的生物过程具有许多应用。在这里，我们演示了使用单个宽带激光器和仅相位脉冲整形器的设置，以实现活哺乳动物细胞中三个FP（mAmetrine，TagRFPt和mKate2）的成像。相变以实现FP的选择性激发，结合成像后线性解混，可以清晰地分离每个FP的荧光信号。该设置还受益于较低的总体成本和简单的光学对准，可轻松地在常规生物医学研究实验室中使用。

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