A Simple HPV 18 Detection Method Based on Ultra Specific Primer Immobilized on Glass Slides

FidelisA.C.; DutraR.F.; SouzaP.R.E.; deMeloC.P.; MaiaM.M.D.

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A Simple HPV 18 Detection Method Based on Ultra Specific Primer Immobilized on Glass Slides

机译：一种基于超特异引物固定在载玻片上的简单HPV 18检测方法

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This study was carried out to develop a simple and inexpensive method for detection of Human papillomavirus (HPV 18) based on irreversible immobilization of ultra specific primer on silanized glass slides. This method is revealed by Blue Green Loading Dye I (LGC) and compared with conventional polymerase chain reaction (PCR) for endocervical samples. The new method was tested in 40 DNA samples with precancer uterine lesions of women treated in Hospital of Recife PE, Brazil. DNA samples were extracted using Wizard Genomic DNA Purification Kit according to manufacturer's instructions. The samples were tested for HPV 18 by conventional PCR (PCRc) and the products visualized on 1.2% agarose gel, with LGC under UV 260 nm. After that the positive and negative samples to HPV 18 were tested by immobilization method and the results visualized with LGC under UV 260 nm. Both PCRc and immobilization method showed high degree of correlation (95%), whereas comparison between PCRc and immobilization method showed good correlation (100%). PCRc is widely known for detection of HPV because of its high sensitivity and efficiency, but due to high cost it is not yet standardized for use in public health laboratories. In our study, the single-stranded DNA immobilized method on a glass slide was effective in screening for HPVrevealed by Blue Green and may be an alternative method for diagnosis of HPVonce it offers a fast, and easy handling. ? 2013 Wiley Periodicals, Inc.

机译：进行这项研究是为了开发一种简单而廉价的方法，用于将不可特异性固定在硅烷化玻璃载玻片上的人乳头瘤病毒（HPV 18）检测方法。蓝绿色加载染料I（LGC）揭示了这种方法，并将其与常规的宫颈癌样本聚合酶链反应（PCR）进行了比较。该新方法在巴西累西腓PE医院接受治疗的40例具有癌前子宫病变妇女的DNA样品中进行了测试。根据制造商的说明，使用Wizard Genomic DNA Purification Kit提取DNA样品。通过常规PCR（PCRc）测试样品的HPV 18，并将产物在1.2％琼脂糖凝胶上用LGC在UV 260 nm下可视化。之后，通过固定方法测试HPV 18的阳性和阴性样品，并在260 nm的UV下用LGC观察结果。 PCRc和固定化方法均显示出较高的相关性（95％），而PCRc和固定化方法之间的比较显示出良好的相关性（100％）。 PCRc因其高灵敏度和高效率而广为人知，可用于检测HPV，但由于成本高昂，因此尚未标准化用于公共卫生实验室。在我们的研究中，将单链DNA固定在载玻片上的方法可有效筛选蓝绿色显示的HPV，并且可能是诊断HPVonce的另一种方法，它提供了快速，简便的操作。？ 2013 Wiley期刊公司

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来源
《Journal of clinical laboratory analysis.》 |2013年第2期|共5页
作者
FidelisA.C.; DutraR.F.; SouzaP.R.E.; deMeloC.P.; MaiaM.M.D.;
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原文格式 PDF
正文语种 eng
中图分类诊断学;
关键词
APTS; Glass slide; Human papillomavirus; Immobilization;

机译：APTS;载玻片;人乳头瘤病毒;固定化;

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