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【24h】

Cell cycle markers for live cell analyses.

机译:用于活细胞分析的细胞周期标记。

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摘要

Many cellular processes are regulated by cell cycle dependent changes in protein dynamics and localization. Studying these changes in vivo requires methods to distinguish the different cell cycle stages. Here we demonstrate the use of DNA Ligase I fused to DsRed1 as an in situ marker to identify S phase and the subsequent transition to G2 in live cells. Using this marker, we observed changes in the nuclear distribution of Dnmt1 during cell cycle progression. Based on the different nuclear distribution of DNA Ligase I and Dnmt1 in G2 and G1, we demonstrate that the combination of both proteins allows the direct discrimination of all cell cycle phases using either immunostainings or fusions with fluorescent proteins. These markers are new tools to directly study cell cycle dependent processes in both, fixed and living cells.
机译:许多细胞过程受蛋白质动力学和定位过程中细胞周期依赖性变化的调节。在体内研究这些变化需要区分不同细胞周期阶段的方法。在这里,我们演示了使用与DsRed1融合的DNA连接酶I作为原位标记来鉴定S期以及随后在活细胞中过渡到G2的方法。使用该标记,我们观察到了Dnmt1在细胞周期进程中的核分布变化。基于DNA连接酶I和Dnmt1在G2和G1中的不同核分布,我们证明了两种蛋白的结合可以使用免疫染色或与荧光蛋白融合的方法直接区分所有细胞周期。这些标记物是直接研究固定细胞和活细胞中细胞周期依赖性过程的新工具。

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