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【24h】

Einsatz von 2D-Gelelektrophorese zum besseren Verstandnis der Vorgange wahrend einer rekombinanten Hochzelldichte-Kultivierung

机译:使用2D凝胶电泳可更好地了解重组高细胞密度培养过程

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摘要

Viele rekombinante Proteine werden in Hochzelldichte-Kultivierung(HCDC)von E.coli gewonnen.Die Expression erfolgt uber Plasmide,die chemisch oder thermisch induziert werden.Zwei Effekte beeinflussen den Erfolg der Kultivierung nachhaltig:der sog.Glucose-Overflow-Metabo-lism und die Mixed-Acid-Fermentation.Beide hangen eng mit Substratangebot und Sauerstoffversorgung zusammen.Der Substrat-und Sauerstoffbedarf einer Kultur und die spezifische Wachstumsrate andern sich wahrend der verschiedenen Kultivierungsabschnitte,so dass eine genaue Kultivierungsstrategie unentbehrlich ist.Ohne eine solche kommt es zu Acetatuberproduktion,limitiertem Wachstum,Akkumulation von toxischen Stoffwechselprodukten und verringerter Produktbildung.
机译:高细胞密度培养(HCDC)是从大肠杆菌中获得的许多重组蛋白,其表达是通过化学或热诱导的质粒进行的,两种作用对培养的成功具有持久的影响:所谓的葡萄糖溢流代谢和混合酸发酵。两者都与底物的有效性和氧气供应密切相关。在不同的培养阶段,培养基的底物和氧气需求以及特定的生长速率会发生变化,因此精确的培养策略是必不可少的。没有这种情况,乙酸盐就会过量生产,限制生长,有毒代谢产物的积累和减少的产物形成。

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