作为蛋白激酶IKKε和/或TBK-1抑制剂的嘧啶化合物、其制备方法、以及含有其的药物组合物

本发明涉及新的嘧啶化合物和含有其的组合物，以及制备所述嘧啶化合物的方法。所述化合物可用于治疗与蛋白激酶IKKε和/或TBK-1的异常活性有关的疾病。

酶的一个重要大家族是蛋白激酶家族。有大约500种不同的已知蛋白激酶。蛋白激酶用于催化多种底物蛋白质中氨基酸侧链的磷酸化。I-κ-B-激酶ε——IKKε(还称为I-κ-B-激酶-3(IKK3)或诱导型I-κ-B-激酶(IKKi))和TANK结合激酶-1——TBK-1(还称为T2K或NF-κB活化激酶)是丝氨酸-苏氨酸激酶。研究已经表明蛋白激酶在很多细胞功能——包括信号转导、转录调节、细胞运动和细胞分裂——中起着关键作用。异常或不恰当的蛋白激酶活性可有助于某些疾病状况的发展和维持。几种癌基因还被证实可编码蛋白激酶，暗示激酶在肿瘤发生中起作用。

认为IKKε不是用于激活转录因子(例如所述NF-κB家族)的“常规”IKK途径的组分，已知IKKε的同系物IKKα和IKKβ在所述IKK途径中起着关键作用。但是已经证实IKKε参与调节转录因子(例如所述NF-κB家族)和干扰素调节因子3(IRF3)的替代机制，已知所述转录因子和干扰素调节因子3均参与控制许多调节蛋白(包括促炎性细胞因子)的表达。IKKε直接使所述NF-κB家族成员cRel的C-末端域磷酸化，导致IkBα-cRel复合物的解离，从而允许cRel的核积累。

异常的IKKε活性与许多的疾病区域(包括癌症和肥胖)有联系。研究已经证实，编码IKKε的基因(IKBE)在某些乳癌细胞系和源自患者的肿瘤中被扩增和过度表达。此外，这些细胞系中的IKBE基因表达的抑制诱导了细胞死亡(Boehm et al.，Cell，2007，129，1065-1079)。IKKε还被证实可使雌激素受体磷酸化，并且其活性与乳癌肿瘤中的它莫西芬(tamoxifen)抗性有联系(Guo et al.，The Journal of Biological Chemistry，2010，285，3676-3684)。在人卵巢癌细胞系和原发肿瘤中IKKε还频繁地过度表达。而且IKKε过度表达使细胞对顺铂产生抗性，然而击倒IKKε可重建顺铂敏感性(Guo et al.，The American Journal of Pathology，2009，175，324-333)。这些观察暗示IKKε抑制剂可显示出治疗某些癌症的功效。

IKKε敲除的小鼠可以免受高脂肪饮食诱导的肥胖、肝和脂肪的慢性炎症、肝性脂肪变性以及全身胰岛素抗性。这种鼠还显示出经由解偶联蛋白UCP1表达增强的能量消耗的增加(Chiang et al.，Cell，2009，138，961-975)。这些观察暗示IKKε抑制剂可具有治疗肥胖和相关病症例如糖尿病的功效。

在固有免疫系统中，TBK1响应于脂多糖(来自细菌细胞壁)与Toll-样受体4(TLR4)的接合或双链RNA(来自双链RNA病毒)与TLR3的接合而被活化。其还响应于促炎性细胞因子例如TNF和白细胞介素-1(IL-1)而被活化。一旦被活化，TBK1就将IRF3磷酸化并活化，所述IRF3是一种转录因子，可触发β-干扰素和化学激活素(chemokine)例如白细胞介素-8(IL-8)和RANTES的产生。这些物质在介导宿主防御细菌和病毒感染中起关键作用。不表达IRF3的小鼠对LPS诱导的脓毒性休克具有抗性。这些观察暗示，TBK1抑制剂可具有治疗/预防脓毒性休克和/或治疗炎症疾病的功效。

TBK-1还响应于缺氧而被活化并刺激促血管生成因子例如血管内皮生长因子(VEGF)和IL-1的产生。缺氧24小时后TBK-1的表达上升2.5-3倍，与VEGF的表达增加相似。缺氧诱导的VEGF表达可以通过TBK1的siRNA击倒而消除。在恶性结肠癌和乳癌细胞中TBK1 mRNA和蛋白质的水平升高。TBK1还通过RalB/Sec5效应子复合物被募集并被活化；在癌细胞中，该途径经由慢性RalB活化的组成型接合，限制了细胞凋亡程序的起始。原癌基因KRAS在广泛的人肿瘤中产生变异，所述肿瘤大多数是侵略性的并且对标准治疗响应很差。已经证实在KRAS依赖性肿瘤细胞系中击倒TBK1导致细胞死亡。这些观察暗示，TBK1抑制剂可具有治疗癌症的功效(Barbie et al.，Nature，2009，462，5，108-114)。IKKε和TBK-1两者都已被证实可在许多癌细胞系中将Akt磷酸化并活化(Ou et al.，Molecular Cell，2011，41，458-70；Xie et al.，PNAS，2011，108，16，6474-6479)。Akt是一种主要的信号激酶，在许多途径中其作为枢纽在细胞增殖和存活中起着中枢作用。此外，已经证实在许多NSCLC细胞系中TBK-1的shRNA击倒抑制细胞存活。这些结果被进一步地通过使用TBK-1和IKKε激酶的小分子双重抑制剂而验证，所述抑制剂能够抑制Akt磷酸化以及对TBK-1击倒敏感的NSCLC癌细胞系的增殖。这进一步指示了TBK-1/IKKε抑制剂在治疗癌症中的潜力(Ou et al.，Molecular Cell，2011，41，458-70)。

总之，因为这些以及相关的理由，异常的IKKε和/或TBK1活性可以导致多种疾病状况。由IKKε和/或TBK1机制介导的疾病状况包括炎症和组织修复障碍，尤其是类风湿性关节炎、炎症性肠病、哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)；骨关节炎、骨质疏松和纤维化疾病；皮肤病，包括银屑病、特应性皮炎和紫外辐射(UV)诱导的皮肤损伤；自身免疫性疾病，包括系统性红斑狼疮、多发性硬化、银屑病关节炎和强直性(ankylosing)脊椎炎；组织和器官排异、阿尔茨海默症、中风、动脉粥样硬化、再狭窄、肥胖、糖尿病、肾小球肾炎、癌症，包括霍奇金病(Hodgkin’s disease)、恶病质、感染有关的炎症，包括某些病毒感染，包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、成人呼吸窘迫综合征、共济失调毛细血管扩张症、原发性开角型青光眼和脓毒性休克。

已知某些嘧啶-胺(pyrimidinyl-amine)作为蛋白激酶抑制剂起作用。例如，WO2005/012262和WO2009/032861公开某些此类化合物。在前一文件中，所述化合物被陈述为一个或多个CDK1、CDK2、CDK4、CDK7、CDK9、GSK3、极光激酶和PLK1的抑制剂。在后一文件中，所述化合物被陈述为蛋白激酶的抑制剂，例如c-Jun N末端激酶(JNK)的抑制剂。现在发明人惊奇地发现某些有特定取代形式的嘧啶-胺是IKKε和/或TBK1的选择性抑制剂，按照WO2005/012262和WO2009/032861的教导这是出人意料的。因此预望其可以用于由异常IKKε和/或TBK1活性导致疾病的患者群体。

因此本发明提供了通式I的化合物或其盐：

其中：

R¹代表有4、5、6或7个环原子的脂肪族杂环基团，其通过环氮原子键合到式I示出的苯基，并且其任选地被一个或多个选自卤素；OH；＝O；C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-4烯基和C_2-4炔基基团的取代基取代，其各自任选地被独立选自卤素原子和NR^aR^b基团；NO₂；CN；NR^aR^b；COR^c；O.CO.R^c；CO₂R^a；NR^a.COR^c；NR^aCO₂R^b；C(＝NH)NH₂；SO₂R^c；NR^aSO₂R^c；和CH(CF₃)NH₂的一个或多个取代基取代；

R²代表苯基或杂芳基，所述苯基或杂芳基任选地被独立选自以下基团的一个或多个取代基取代：

卤素原子；

NR^aR^b；

C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-4烯基和C_2-4炔基基团，其各自任选地被独立选自卤素原子和NR^aR^b基团的一个或多个取代基取代；以及

-(CH₂)_p-R′，其中p为0、1、2、3或4，R′代表如下取代基中的一个：OH；NO₂；CN；COR^c；O.CO.R^c；CO₂R^b；NR^a.COR^c；NR^aCO₂R^b；C(＝NH)NH₂；SO₂R^c；NR^aSO₂R^c；和CH(CF₃)NH₂；

和/或所述苯基或杂芳基任选地在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环；

R^a代表氢原子或C_1-4烷基；

R^b代表氢原子、任选地被基团NR^aR^a取代的C_1-4烷基、或其中CH₂部分可以被氧原子或NR^a基团替代的环烷基；

R^c代表氢原子、基团-NR^aR^b或任选地被基团NR^aR^b取代的C_1-4烷基；

或者当连接到相同氮原子时，R^a和R^b一起可以代表-(CH₂)_m-基团，其中CH₂部分可以被氧原子或-NR^a-基团替代；

m代表4或5；

n代表1或2；以及

R³和R⁴各自独立地代表氢原子或C_1-4烷基。

在本发明的一个实施方案中，R²代表任选地被如上具体指定的一个或多个取代基取代的苯基。在另一个实施方案中，R²代表任选地被如上具体指定的一个或多个取代基取代的杂芳基。除上下文另有说明的地方，应该理解本说明书中提到的任何优选或具体实施方案可以应用于其中R²为任选取代的苯基的化合物；相似地，本说明书中提到的任何优选可以应用于其中R²为任选取代的杂芳基的化合物。

本发明的化合物为所述IKKε和/或TBK-1受体的抑制剂，因此可用于治疗与异常的IKKε和/或TBK-1活性有关或由其导致的疾病。

烷基可以是直链或支链的。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基和仲丁基。在无支链的烷基中，优选甲基、乙基、正丙基和正丁基。在支链烷基中，可以提及异丙基、叔丁基、异丁基、1-乙基丙基、1-乙基丁基和1-乙基戊基。

烷氧基是基团O-烷基，其中“烷基”如上所述使用。烷氧基的实例包括甲氧基和乙氧基。其他的实例包括丙氧基和丁氧基。

烯基可以是直链或支链的，并且含有至少一个碳-碳双键。烯基的实例包括乙烯基、丙烯基和丁烯基。优选的烯基包括乙烯基、1-丙烯基和2-丙烯基。

炔基可以是直链或支链的，并且含有至少一个碳-碳三键。炔基的实例包括乙炔基、丙炔基和丁炔基。优选的炔基包括乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。

环烷基可以是单环或双环的。双环基团可以是，例如，稠合的或桥接的。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基和环戊基。单环环烷基的其他实例为环己基、环庚基和环辛基。双环环烷基的实例包括双环[2.2.1]庚-2-基。优选地，环烷基为单环的，并且优选地其具有最高达7个碳原子。

卤素是指氟、氯、溴或碘。氟、氯和溴为特别优选的。

杂环基是碳原子的环状基团，其中1至3个碳原子被一个或多个独立地选自氮、氧或硫的杂原子取代。其可以是芳香族或脂肪族的。杂芳基可以是，例如，单环或双环的。在双环杂环基基团中，在每个环或只在一个环中可以有一个或多个杂原子。杂原子优选为O或N。含有合适的氮原子的杂环基基团包括相应的N-氧化物和相应的S-单氧化物或S-双氧化物。

R¹在环中优选有4、5或6，尤其5或6个原子，其中除所述基团键合到式I示出的苯基所用的氮原子之外的一个或多个原子可以是氮、氧和/或硫原子。例如，R¹可以代表吡咯烷、吗啉、哌嗪、哌啶、氮杂环丁烷、硫代吗啉或高哌嗪(homopiperazine)环。当R¹在环中有4个原子时，其可以是例如氮杂环丁烷环。优选地R¹代表吡咯烷环。除所述环键合到式I的苯基所用的氮原子之外的所述环中任何的氮原子可以携带R^b基团，同时所述环中任何硫原子可以是任何需要的氧化程度，即，其可以是-S-、-SO-或-SO₂-。

R¹可以携带一个或多个，例如最高达3个，尤其是一个任选取代基。如果存在C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-4烯基或C_2-4炔基取代基，其可以例如被一个或多个，例如1至3个卤素原子，例如氯和/或氟原子，和/或NR^aR^b基团取代。这种取代基可以是例如甲基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲基或二氟甲氧基。R¹的优选取代基包括卤素原子，例如一个或两个氟原子；OH；＝O；甲基；甲氧基；三氟甲基；三氟甲氧基；CN；NR^aR^b；COR^c；O.CO.R^c；CO₂R^a；NR^a.COR^c；和NR^aCO₂R^b；其中R^a、R^b和R^c各自优选独立地代表烷基，尤其是甲基，或氢原子，或者R^c还可以代表NR^aR^b基团，例如NH₂基团。一个或多个极性取代基例如羟基、＝O或CO.NR^aR^b的存在可能是需要的。例如，R¹可以是未取代的或者被一个或两个氟原子、羟基(例如3-羟基基团)、＝O基团、甲基或CO.NH₂基团取代。羟基是优选的取代基。一个或两个氟原子也是优选的取代基。

杂芳基R²可以是例如有最高达10个环原子、包括最高达3个例如1或2个杂原子的杂芳族基团。优选地其具有5或6个环原子；例如其可以是吡啶、吡唑、异噁唑、噁唑、咪唑、噻唑(thioazole)、1，3，4-噁二唑、1，3，4-噁噻唑、嘧啶或噻吩环。R²可以是例如吡啶、吡唑(例如2-甲基-2H-吡唑-3-基，下文称为2-Me-吡唑)、噁唑、异噁唑、噻唑或苯环。优选地R²代表吡唑(例如2-甲基-吡唑或1-甲基-1H-吡唑-4-基(下文称为1-Me-吡唑))或者尤其是苯环或吡啶环。

所述基团R²可以是未取代的或被例如最高达3个，例如1个任选取代基取代。如果存在C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-4烯基或C_2-4炔基取代基，其可以例如被一个或多个，例如1至3个卤素原子，例如氯和/或氟原子，和/或NR^aR^b基团取代。这种取代基可以是例如甲基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲基或二氟甲氧基，或式(CH₂)_xNR^aR^b或O(CH₂)_xNR^aR^b的基团，其中x为1、2、3或4，例如1或2或3。在式(CH₂)_xNR^aR^b的基团中，x优选为1或2；在式O(CH₂)_xNR^aR^b的基团中，x优选为2或3。R^a和R^b可具有以下给定的优选含义之一。

R²的优选取代基包括卤素原子；NR^aR^b；任选被NR^aR^b取代的C_1-4烷基；任选被NR^aR^b取代的C_1-4烷氧基；-CONR^aR^b；NR^aCOR^c；或SO₂R^c。这种取代基的实例包括如下，其中R″代表氢原子或C_1-4烷基基团，例如甲基：R″；OR″；CO.NR″R″；NR″.CO.R″；NR″.CO.CH₂NR″R″；SO₂R″；4-吗啉；NR″.CO.1-吡咯烷；1-(4-R″哌嗪)；NR″(CH₂)₂N R″R″；CO.NR″；CO-1-(4-R″哌嗪)；CO.NR″.4-(1-R″哌啶)；以及CO.NR″.(CH₂)₂.NR″R″。具体实例包括：Me；OMe；CONH₂；NH.CO.Me；NH.CO.CH₂NMe₂；CO.NH₂；SO₂Me；4-吗啉；NH.CO.1-吡咯烷；1-(4-Me-哌嗪)；NMe₂；NMe.CO.Me；NH.(CH₂)₂.NMe₂；NMe.(CH₂)₂.NMe₂；CO.1-(4-Me-哌嗪)；CO.NH.4-(1-Me-哌啶)；以及CO.NH.(CH₂)₂.NMe₂。

当R²代表吡啶基或苯基时，其优选被选自卤素、-NR^aR^b、C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基(尤其是以上列出的这些基团的具体提到的实例)的至少一个取代基取代，并且还任选被一个或多个C_1-4烷基例如甲基取代。优选地这种基团为吡啶基或苯基，其被一个或多个，优选一个选自卤素、-NR^aR^b、-C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基，尤其是NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基的取代基取代；或者其被一个或多个，优选一个选自C_1-4烷氧基的取代基取代，所述C_1-4烷氧基可被NR^aR^b(例如NMe₂)取代，其中R^a和R^b一起代表N-Me-哌啶-4-基。

当R²是除吡啶基或苯基外的基团，例如是吡唑或异噁唑环时，其优选是未取代的或被一个或多个，优选一个上文提到的取代基例如C_1-4烷基(例如甲基)取代。例如，R²可以是2-甲基-2H-吡唑-3-基或3-甲基-异噁唑-5-基。

在另一个优选实施方案中，R²是例如基团吡啶基或尤其地苯基，其在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环。例如，R²可以代表：

值得特别提及以下化合物，其中R²含有至少一个包括杂原子(具体地为O或N)的取代基。这种取代基包括SO₂C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4烷氧基C_1-4烷基，但是优选为包括胺或酰胺部分的基团，例如，NR^aR^b；C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-4烯基和C_2-4炔基，其各自被一个或多个，优选一个NR^aR^b基团；和-(CH₂)_p-R′取代，其中p为0、1、2、3或4，R′代表NR^a.COR^c或NR^aCO₂R^b，或者R′代表COR^c或O.CO.R^c，其中R^c代表NR^aR^b或被基团NR^aR^b取代的C_1-4烷基，或者R′代表CO₂R^b，其中R^b代表被NR^aR^a取代的C_1-4烷基。例如可以存在如下式的基团，其中R″具有以上给定的含义：CO.NR″R″；NR″.CO.R″；4-吗啉；NR″.CO.1-吡咯烷；1-(4-R″哌嗪)；NR″(CH₂)₂NR″R″；CO.NR″；CO-1-(4-R″哌嗪)；CO.NR″.4-(1-R″哌啶)；以及CO.NR″.(CH₂)₂.NR″R″。其中R²是在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环的基团的化合物，也可被视为含有这种类型的取代基。

如上提到的，即含有杂原子的取代基还可以有利地存在于R¹。

优选地R³和R⁴各自独立代表甲基，或优选代表氢原子。优选地R³和R⁴都是氢原子。

如果本发明的化合物含有多于一个由R^a代表的部分，则其可以相同或不同。除非另外说明，优选地R^a是甲基或，尤其是氢原子。如果本发明的化合物含有多于一个由R^b代表的部分，其可以相同或不同。当R^b是被基团NR^aR^a取代的C_1-4烷基时，其可以是例如基团(CH₂)_xNR^aR^a，其中x为1、2、3或4，例如2、3或4，尤其地2或3。当R^b是其中的CH₂部分可以被氧原子或NR^a基团替换的环烷基时，其可以例如具有4至7个，例如5或6个环原子；其可以是例如哌啶，例如4-哌啶基团。R^b可以是例如甲基或，尤其是氢原子。如果R^a和R^b一起代表其中CH₂部分可以被氧原子或-NR^a-基团替换的-(CH₂)_m-基团，则其可以是例如-(CH₂)₄-、-(CH₂)₅-、-(CH₂)₂.O.(CH₂)₂-或-(CH₂)₂.NR^b.(CH₂)₂-，其中R^b优选为氢原子或甲基。

除非另有说明，优选地R^c是基团NR^aR^b。例如，R^c可以是基团NR^aR^b，其中R^a和R^b各自代表氢原子或甲基。

除非另有说明，p优选为0、1或2。例如p可以是1；或者p可以是0。

一个优选的实施方案包括这样的本发明化合物，其中R¹代表吡咯烷环，其可以例如被羟基或CO.NH₂基团取代，或被一个或多个卤素(尤其是氟)原子取代，或者其是未取代的；R²代表吡啶、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑或苯环，优选为吡唑或，尤其为苯基或吡啶基，其任选被一个或多个选自-NR^aR^b、C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基的取代基取代，优选为单取代；或者其中R²代表吡啶、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑或苯环，优选为吡唑(尤其是2-Me-吡唑)或，尤其为苯基或吡啶基，其在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环；并且R³和R⁴各自代表氢原子。

因此，尤其优选的本发明化合物包括这样的化合物：其中R¹代表未取代的吡咯烷环；R²代表2-Me-吡唑、苯环或吡啶环，其被选自-NR^aR^b、C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基的取代基单取代；或者其中R²代表苯环或吡啶环，其在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a取代形成稠环；并且R³和R⁴各自代表氢原子。R^a、R^b和R^c适合地具有以上给定的优选含义之一。

另一个优选的实施方案包括这样的本发明化合物：其中R¹代表吗啉、哌嗪、哌啶、氮杂环丁烷、硫代吗啉或高哌嗪环，优选为吗啉或哌嗪环，其可以例如被羟基或CO.NH₂基团或NH₂或NMe₂基团取代，或者其是未取代的；R²代表吡啶、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑或苯环，优选为吡唑(尤其是1-或2-Me-吡唑)或，尤其为苯基或吡啶基，其任选被一个或多个选自-NR^aR^b、C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基的取代基取代，优选为单取代；或者其中R²代表吡啶、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑或苯环，优选为吡唑或，尤其为苯基或吡啶基，其在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环；并且R³和R⁴各自代表氢原子。

因此，例如，本发明的化合物可以包括这样的化合物，其中R¹代表吗啉、哌嗪、哌啶、氮杂环丁烷、硫代吗啉或高哌嗪环，优选为吗啉或哌嗪环，其可以例如被羟基或CO.NH₂基团或NH₂或NMe₂基团取代，或者其是未取代的；R²代表2-Me-吡唑、苯环、或吡啶环，其被选自-NR^aR^b、C_1-4烷氧基、-NR^a.CO.R^c、-CO.NR^aR^b和SO₂C_1-4烷基的取代基单取代；或者其中R²代表苯环或吡啶环，其在相邻环原子上被基团-NR^a.CO.(CH₂)_n-或-(CH₂)_n.CO.NR^a-取代形成稠环；并且R³和R⁴各自代表氢原子。R^a、R^b和R^c适合地具有以上给定的优选含义之一。

优选的本发明化合物包括如下的化合物及其盐，尤其是其可药用的盐：

5-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(吡啶-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(吡啶-2-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

2-吡咯烷-1-基-5-[2-(3-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲腈

2-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-噁唑-5-羧酸酰胺

5-[2-(5-甲基-异噁唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

2-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-噁唑-4-羧酸酰胺

5-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸酰胺

5-[2-(5-甲基-噻唑-2-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(噁唑-2-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(4-甲基-噻唑-2-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

4-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-3-甲基-苯甲酰胺。

(R)-1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-吡咯烷-2-羧酸甲基酰胺

其他优选的本发明化合物包括如下的化合物及其盐，尤其是其可药用的盐：

5-[2-(3-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(3-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(3-甲基-异噁唑-5-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(2-甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

N-{5-[4-(3-氰基-4-吗啉-4-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-乙酰胺

N-(5-{4-[3-氰基-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

5-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-1-甲基-1H-吡唑-3-羧酸酰胺

1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-哌啶-4-羧酸酰胺

(R)-1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-吡咯烷-2-羧酸酰胺

2-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-5-[2-(2-甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲腈

(R)-1-{2-氰基-4-[2-(2-甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-吡咯烷-2-羧酸酰胺。

5-[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-(4-羟基-哌啶-1-基)-苯甲腈

1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-哌啶-4-羧酸甲基酰胺

(S)-1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-吡咯烷-2-羧酸酰胺

(R)-1-(2-氰基-4-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯基)-吡咯烷-2-羧酸酰胺

2-{3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡唑-1-基}-乙酰胺

5-[2-(3-甲基-3H-咪唑-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

尤其优选的本发明化合物包括如下的化合物及其盐，尤其是其可药用的盐：

5-[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酰胺

N-{3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-乙酰胺

4-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酰胺

N-{4-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-乙酰胺

5-[2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

N-{5-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-乙酰胺

5-[2-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢-喹啉-7-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

吡咯烷-1-羧酸{3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-酰胺

5-{2-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

N-{4-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺

N-(5-{4-[3-氰基-4-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-(2-{6-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基]-吡啶-3-基氨基}-嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-4-基}-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-N-(1-甲基-哌啶-4-基)-苯甲酰胺

3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-N-(2-二甲基氨基-乙基)-苯甲酰胺

N-{5-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-2-二甲基氨基-乙酰胺

2-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-5-{2-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯甲腈

(R)-1-(2-氰基-4-{2-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯基)-吡咯烷-2-羧酸酰胺

3-[4-(3-氰基-4-比咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酸

5-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-[2-(6-甲氧基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯甲腈

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-((S)-2-甲基-吡咯烷-1-基)-苯甲腈

1-(2-氰基-4-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯基)-哌啶-4-羧酸酰胺

N-(5-{4-[3-氰基-4-(3-羟基-氮杂环丁-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

5-{2-[6-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-2-((S)-3-氟-吡咯烷-1-基)-苯甲腈

N-(5-{4-[3-氰基-4-((R)-2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

N-(5-{4-[3-氰基-4-((R)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

2-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-5-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲腈

1-{2-氰基-4-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-哌啶-4-羧酸酰胺

N-(5-{4-[3-氰基-4-((S)-3-甲氧基-吡咯烷-1-基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-吡啶-2-基)-乙酰胺

2-((R)-3-氟-吡咯烷-1-基)-5-{2-[6-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯甲腈

2-((S)-3-氟-吡咯烷-1-基)-5-{2-[6-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯甲腈

2-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-5-{2-[6-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯甲腈

2-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-5-{2-[6-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-吡啶-3-基氨基]-嘧啶-4-基}-苯甲腈

本发明包括通式I的化合物的盐。通常，所述化合物与酸形成加成盐，所述酸是例如无机酸、强有机羧酸例如烷基羧酸，例如具有1至4个碳原子的未取代的或例如被卤素取代的烷基羧酸，例如饱和或不饱和的二羧酸，例如羟基羧酸，例如氨基酸，或者所述酸是有机磺酸，例如未取代的或例如被卤素取代的(C₁-C₄)-烷基-或芳基-磺酸。可药用的酸加成盐通常包括从以下酸形成的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸、乙酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、三氟乙酸、琥珀酸、高氯酸、富马酸、马来酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羟乙磺酸、抗坏血酸、苹果酸、邻苯二甲酸、天冬氨酸和谷氨酸、赖氨酸和精氨酸。本身不是可药用的盐，例如衍生自例如草酸的酸的那些盐可以作为中间体用于获得本发明的化合物及其可药用的酸加成盐。

根据所述存在的取代基，所述式I的化合物还可以与碱形成盐。可药用碱盐包括铵盐；碱金属盐，例如钾盐和钠盐；碱土金属盐，例如钙盐和镁盐，以及与有机碱的盐，所述有机碱例如二环己基胺、N-甲基-D-葡糖胺(N-methyl-D-glucomine)、吗啉、硫代吗啉、哌啶、吡咯烷、单-、双-或三-低级烷基胺，例如乙基-、叔丁基-、二乙基-、二异丙基-、三乙基-、三丁基-或二甲基-丙胺、或单-、双-或三羟基低级烷基胺，例如单-、双-或三乙醇胺。可进一步地形成对应的内盐。

本发明的化合物还可以形成溶剂合物，例如水合物，这些也包括在本发明的范围内。

根据通式I的化合物中存在的取代基，所述化合物可以作为立体异构体和/或几何异构体存在。所有单独的立体异构体和几何异构体以及其混合物都包括在本发明的范围内。此外，同位素形式(例如其中氢原子被氘替换)也包括在本发明内。某些同位素形式可具有有益的生物学性质，例如超过其他同位素形式的提高的代谢稳定性或增强的治疗活性；或者特定的同位素形式可以用于生物学成像目的，例如碳-11、氮-13、氧-15或氟-18同位素变体可以用于正电子发射断层扫描。

本发明还提供了制备本发明的化合物的方法，其包括：

(a)通式II的化合物：

与通式R²NH₂和R¹H的胺反应；或者

(b)式III的化合物：

与通式R²NH₂的化合物反应；或者

(c)式IV的化合物：

与通式R¹H的化合物反应；

其中X代表离去基团，X′代表离去基团，R¹和R²具有通式I给定的含义。

根据R¹和R²的含义，所述中间体III/IV的某些是新的，本发明还提供了这些中间体本身。

通式II、III和IV的化合物中的离去基团X和X′可以是例如卤素原子或烷基(优选甲基)砜或亚砜基团。亲核SnAr取代化学过程可以用于插入所述R¹或NR²基团，这种情况中X或X′优选为氟、氯或烷基(优选甲基)砜或亚砜基团。或者钯催化的Buchwald-Hartwig类型化学过程可以用于X或X′优选为氯、溴或碘的情况。与SnAr或钯催化的化学过程结合的不同X和X′基团的使用可被用于控制两者任一中心处的差别反应性。例如如果X为氟，X′为氯，那么钯催化的偶联可被用于式II的化合物和式R²NH₂的胺之间以得到式IV的化合物。

SnAr反应通常在胺存在下进行，如果需要可加热，例如100-180℃。所述反应可以例如在环境压力在回流条件下或在密封管中使用常规加热进行，或者可以采用微波反应器。如果需要，可以使用适合的溶剂，例如NMP、nBuOH或DMF。

加入适合的碱例如DIPEA或K₂CO₃可以帮助催化所述反应。或者当芳基或杂芳基胺被用作所述反应配偶体(reaction partner)时，加入例如0.5-2当量的HCl也可以用于催化所述反应。

Buchwald-Hartwig类型反应通常包括将所述2-氯、2-溴或2-碘-化合物与所述必需的胺在钯催化剂存在下进行反应。可被用于进行这种转化的条件的实例描述于WO2008/62044。

通式III的化合物可以通过与已知方法类似的方法来制备。一种这样的方法是通过通式V的硼酸或硼酸酯：

其中每个R^x可以是H或烷基，或所述两个R^x基团可以是连接的以便形成环硼酸酯；

与通式VI的嘧啶：

进行Suzuki-Miyaura交叉偶联，

其中X′具有式II和III给定的含义，X″是氯、溴或碘，优选地X′和X″是相同的，或者如果不同，X′是氟、氯或烷基(优选甲基)砜或亚砜基团。所使用的常用硼酸酯包括例如二甲基硼酸酯和频哪醇酯。式VI的化合物可以是例如2，4-二碘代嘧啶或2，4-二氯代嘧啶。2，4-二碘代-嘧啶可以由2，4-二氯代嘧啶通过与含水氢碘酸反应来制备。

通式V的化合物可以例如通过用式R¹H的化合物取代通式VII的对应卤化物来制备，

其中X优选为氟或氯。如果需要，可以进行加热，例如100-180℃。式VII的化合物可以从供应商购买，其合成方法是本领域已知的。

式II的化合物可以使用与上述合成式III的化合物类似的方法由式VII的化合物和式VI的化合物来制备。

异常激酶活性牵涉在很多疾病中。例如，JNK牵涉在涉及海马神经元兴奋性中毒的疾病中，例如中风、脊髓损伤、多发性硬化和头部创伤；还牵涉在缺血/再灌注损伤和病症中，其可导致或原本与其有关，例如中风、心肌梗死、充血性心力衰竭、心脏肥厚和动脉粥样硬化有关。JNK还与以下疾病有关：神经变性疾病例如帕金森氏症和阿尔茨海默症；神经管出生缺陷；慢性炎症疾病例如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化；肥胖和胰岛素抵抗性糖尿病；以及癌症。已知对于很多其中单独的患者展示相同症候的疾病，例如乳癌，所述疾病可由许多不同的生物化学机制导致并维持，所述生物化学机制在患者与患者之间不同。对于很多这类疾病，任何治疗的有效性将因此高度依赖于促成并维持所述疾病状态的生物化学机制。

本发明的化合物是IKKε和/或TBK-1的抑制剂，因此可用于治疗与异常的IKKε和/或TBK-1活性有关的或由其导致的疾病。这样的疾病包括炎症和组织修复障碍，尤其是类风湿性关节炎、炎症性肠病、哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)；骨关节炎、骨质疏松和纤维化疾病；皮肤病，包括银屑病、特应性皮炎和紫外辐射(UV)诱导的皮肤损伤；自身免疫性疾病，包括系统性红斑狼疮、多发性硬化、银屑病关节炎和强直性(ankylosing)脊椎炎；组织和器官排异、阿尔茨海默症、中风、动脉粥样硬化、再狭窄、肥胖、糖尿病、肾小球肾炎、癌症，包括霍奇金病(Hodgkin’s disease)、恶病质、感染有关的炎症，包括某些病毒感染，包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、成人呼吸窘迫综合征、共济失调毛细血管扩张症、原发性开角型青光眼和脓毒性休克。

由于本发明的化合物对IKKε和TBK-1的选择性，而对其他激酶例如JNK没有选择性，所以预期它们可以用于治疗疾病，伴随有比更低选择性的化合物更少的副作用。还预期它们可以特别用于在特定的患者人群中靶向疾病，即，当所述疾病特异性地由异常的IKKε和/或TBK-1活性导致时。

特别地，本发明的化合物被预期可用于治疗癌症，具体地治疗其中与异常的IKKε和/或TBK-1活性有关的疾病的患者人群。IKKε已经牵涉于乳癌，包括它莫西芬抗性乳癌、卵巢癌，包括顺铂抵抗性卵巢癌、其中肿瘤生长和/或存活依赖于IKKε激酶活性的癌症、隐匿Ras突变的癌症和Ras依赖性肿瘤以及涉及1q32基因位点扩增的癌症。TBK-1已经牵涉于隐匿K-ras突变的癌症和K-ras依赖性肿瘤、隐匿Ras突变的癌症和Ras依赖性的癌症、乳癌、肺癌，尤其是非小细胞肺癌(NSCLC)、卵巢癌、前列腺癌、骨髓瘤和白血病。

除癌症(特异性地与IKKε和/或TBK-1有关的癌症)之外，本发明的化合物被预期特别地可用于治疗和预防肥胖(其中牵涉有IKKε)；以及其中缺氧-诱导的血管生成是重要的疾病(包括某些癌症)、治疗和预防脓毒性休克以及原发性开角型青光眼(所有这些中均牵涉有TBK-1)。

本发明因此提供一种药物组合物，其包括本发明的化合物，以及一种药学上适合的载体。这样的组合物可以含有本发明的化合物作为唯一的活性成分，或者其可以含有一种额外的活性成分。

本发明还提供一种治疗或预防受试者中由IKKε和/或TBK-1机制介导的疾病的方法，其包括对所述受试者给予本发明的化合物或组合物；用于治疗，特别用于治疗或预防上述任何疾病的本发明的化合物或组合物；以及用于制造药剂的本发明的化合物，所述药剂用于治疗上述任何疾病。优选地所述化合物或组合物被给予哺乳动物，尤其是人。

虽然本发明的化合物可以用作唯一的活性药剂，但是所述化合物还可能与一种或多种其他活性药剂结合使用。这种其他活性药剂可以是本发明的其他化合物，或者其可以是不同的治疗药剂，例如靶向上述疾病之一，尤其是与本发明的化合物靶向的相同疾病的药剂。本发明的化合物可以与所述额外药剂共同配方，或者其可以单独配方，并与所述额外药剂连续、同时或序贯地给予。

当然，需要达到治疗效果的活性成分的量，根据具体化合物、给药途径、治疗的受试者，包括受试者的类型、物种、年龄、体重、性别、和身体条件及受试者的肾脏和肝脏功能，和待治疗的具体的病症或疾病以及其严重性而改变。普通技术的医生或兽医可容易地确定并开出预防、抵抗或阻止病症发展所需的药物有效量。

当用于所指出的效果时，对于成人而言，本发明的口服剂量在约0.01mg每千克体重每天(mg/kg/天)至约100mg/kg/天之间变化，优选0.01mg每千克体重每天(mg/kg/天)至10mg/kg/天，并且最优选0.1至5.0mg/kg/天。对于口服给药，所述组合物优选以片剂形式提供或以离散单元提供的其他呈现形式提供给待治疗的患者，所述离散单元含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100和500mg的活性成分以用于剂量的症候调整。药剂通常含有约0.01mg至约500mg的活性成分，优选地约1mg至约100mg的活性成分。静脉注射时，最优选的剂量范围在恒速输注期间为约0.1至约10mg/kg/min。有利地，本发明的化合物可以每日单次剂量给予，或总日剂量可每日分两次、三次或四次分剂量给予。此外，优选的本发明化合物可以以鼻内形式，通过局部使用合适的鼻内载体给予，或通过经皮途径，使用本领域普通技术人员熟知的经皮皮肤贴布的形式给予。当然，对于以经皮递送体系的形式给药，剂量给予在整个给药方案中是连续的而不是间歇的。

本发明的药物制剂包括适于口服给药、肠胃外给药(包括皮下、皮内、肌肉、静脉内(推注或输注)，和关节内)、吸入给药(包括可通过各种类型的计量加压气雾剂产生的细颗粒粉或雾)、喷雾器或吹入器给药、直肠给药、腹膜内给药和局部(包括皮肤、颊内、舌下和眼内)给药的那些，但最合适的途径可取决于例如接受者的病症和疾病。

制剂可以方便地以单位剂量形式存在，并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。所有方法均包括使所述活性成分与构成一种或多种附加成分的载体结合的步骤。一般而言，所述制剂通过使活性成分与液体载体或细分散的固体载体或两者均匀紧密地结合，然后，如果必要，使产品成型为所需制剂而制备。

适于口服给药的本发明制剂可以如下形式存在：离散单元，例如胶囊剂、扁囊剂、丸剂或片剂，其各自含有预定量的活性成分；粉剂或颗粒剂；在含水液体或无水液体中的溶液或悬浮液；或水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。所述活性成分还可以大丸剂、药糖剂或糊剂的形式存在。

本发明化合物可以，例如，以适于速释或缓释的形式给予。速释或缓释可以通过使用合适的包含本发明化合物的药物组合物来实现，或者，特别是在缓释情况下，通过使用例如皮下植入物或渗透泵的装置来实现。

口服给药的示例性组合物包括悬浮液，其可含有，例如，用于给予团块(bulk)的微晶纤维素、作为悬浮剂的藻酸或藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素，和甜味剂或增香剂例如本领域已知的那些；和速释片剂，其可含有，例如，微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁、硫酸钙、山梨糖醇、葡萄糖和/或乳糖和/或其他赋形剂、粘合剂、增充剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂，例如本领域已知的那些。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成的树胶例如阿拉伯树胶、黄耆树胶或藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。本发明的化合物也可以通过舌下给药和/或颊内给药通过口腔递送。模塑片剂、压缩片剂或冷冻干燥片剂为可以使用的示例形式。示例性组合物包括用本发明化合物与快速溶解稀释剂例如甘露糖醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精配制成的组合物。这种制剂还可含有高分子量赋形剂，例如纤维素(微晶纤维素)或聚乙二醇(PEG)。这种制剂还可包括赋形剂以辅助粘膜粘附，例如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(SCMC)、马来酸酐共聚物(例如Gantrez)，和控释剂，例如聚丙烯酸共聚物(例如Carbopol934)。润滑剂、助流剂、香料、着色剂和稳定剂也可加入以便于制造和使用。在这些剂量形式中所使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。对于以液体形式口服给药，口服药物组分可以与任何口服无毒的可药用惰性载体例如乙醇、甘油、水等结合。

肠胃外给药的制剂包括含水和无水无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、以及使所述制剂与预定接受者血液等渗的溶质；以及含水和无水无菌悬浮液，其可包括悬浮剂和增稠剂。所述制剂可存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封安瓿和小瓶，并且可以在冷冻干燥(冻干)的条件下储存，在使用之前仅需要即时添加无菌液体载体，例如盐水或注射用水。临时的注射溶液和悬浮液可以由之前所述种类的无菌粉剂、颗粒剂和片剂而制备。肠胃外给药的示例性组合物包括可注射溶液或悬浮液，其可含有，例如，合适的无毒的、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，例如甘露糖醇、1，3-丁二醇、水、林格氏溶液、氯化钠等渗溶液，或其他合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂，包括合成的甘油单酯或甘油二酯，和脂肪酸，包括油酸，或Cremaphor。

鼻内给药、气溶胶给药或吸入给药的示例性组合物包括盐水溶液，其可含有，例如苯甲醇或其他合适的防腐剂、提高生物利用度的吸收促进剂，和/或其他增溶剂或分散剂，如本领域已知的那些。

直肠给药的制剂可作为与常用载体一起的栓剂存在，所述载体例如可可油、合成甘油酯或聚乙二醇。这种载体在常温下通常为固体，但是在直肠腔中液化和/或溶解以释放药物。

口中局部给药，例如通过颊内给药或舌下给药的制剂包括锭剂，其含有在调味基础(例如蔗糖和阿拉伯树胶或黄耆胶)中的活性成分，以及软锭剂，其包括在诸如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶基础中的活性成分。局部给药的示例性组合物包括局部载体，例如Plastibase(经聚乙烯胶凝的矿物油)。

应理解，除上述特别提及的成分以外，本发明制剂可包括本领域常规的涉及所述制剂的类型的其他试剂，例如适于口服给药的制剂可以包括调味剂。

以下的实施例举例说明本发明。

所使用的缩写

Boc        叔丁氧羰基

(Boc)₂O    二碳酸二叔丁酯

Dave-Phos  2-双环己基膦-2’-(N，N-二甲基氨基)联苯

DCM        二氯甲烷

DMF        N，N-二甲基甲酰胺

DMSO       二甲基亚砜

EtOH       乙醇

EtOAc      乙酸乙酯

Eqv.       当量

HCl        盐酸

HPLC       高效液相色谱

LC-MS      液相色谱-质谱

MeCN       乙腈

MeOH       甲醇

Min.       分钟

MgSO₄      硫酸镁

NaO^tBu     叔丁醇钠

Na₂SO₄     硫酸钠

NMM        N-甲基吗啉

NMP        N-甲基吡咯烷酮

Pd₂(dba)₃  三(二亚苄基丙酮)二钯(0)

Pet ether  石油醚

rt         室温

S.M.       原料

THF        四氢呋喃

w/w        重量相对于重量的比例

Xantphos   4，5-双(二苯基膦)-9，9-二甲基呫吨

所使用的分析方法

MeOH-FA：Phenomenex Luna C18(2)3μm，50x4.6mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH；45℃；％B：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.5min5％；2.25mL/min。

ANALpH2_MeOH_QC：Phenomenex Luna C18(2)5μm，150x4.6mm；35℃；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH；35℃；％B：0min5％，0.5min5％，7.5min95％，10min95％，10.1min5％，13min5％；1.5mL/min。

方法X：Xterra MS C18 2.5μm，4.6x50mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeCN+0.1％甲酸；25℃；％B：0min10％，4min90％，7.5min90％，7.6min10％；1.0mL/min。

方法Y：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x50mm；A＝水+0.025％TFA；B＝MeCN+0.025％TFA；25℃；％B：0min15％，3min95％，4min95％，4.1min15％；0.4mL/min。

方法Z：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x100mm；A＝水+0.025％TFA；B＝MeCN+0.025％TFA；25℃；％B：0min30％，4min80％，6min80％，6.1min30％；0.3mL/min。

方法B：Zodiacsil C18 5μm，4.6x50mm；A＝水+0.01M甲酸铵；B＝MeOH；25℃；％B：0min60％，3min90％，8min90％，8.1min60％；1.0mL/min。

方法C：Xterra MS C18 2.5μm，4.6x50mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeCN+0.1％甲酸；25℃；％B：0min20％，4min50％，6min90％，8.5min90％，8.6min20％；1.0mL/min。

方法D：Xterra MS C18 2.5μm，4.6x50mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeCN+0.1％甲酸；25℃；％B：0min10％，4min90％，7.5min90％，7.6min10％，8；1.0mL/min。

方法E：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x100mm；A＝水+0.025％TFA；B＝MeCN+0.025％TFA；25℃；％B：0min10％，4min80％，5min80％，5.1min10％；0.3mL/min。

方法F：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x100mm；A＝水+0.025％TFA；B＝MeCN+0.025％TFA；25℃；％B：0min20％，3min80％，4min80％，4.1min20％；0.4mL/min。

方法G：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x50mm；A＝水+0.025％TFA；B＝MeCN+0.025％TFA；25℃；％B：0min20％，2min80％，4min80％，4.1min20％；0.4mL/min。

方法H：Zodiacsil C18 5μm，4.6x50mm；A＝水+0.01M甲酸铵；B＝MeOH；25℃；％B：0min5％，4min90％，10min90％，10.1min5％；1.0mL/min。

方法I：Xterra MS C18 1.8μm，4.6x50mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeCN+0.1％甲酸；25℃；％B：0min20％，4min90％，6min90％，6.1min20％；1.0mL/min。

生物学测试

按如下测试了本发明的化合物(按如下描述合成)针对所述IKKε和TBK-1酶的活性：

使用时间分辨的基于荧光的Lanthascreen^TM试验来进行抑制研究。荧光素标记的底物肽的磷酸化是使用铽标记的磷酸特异性抗体测量的。铽在340nm受激发，转移到荧光素的FRET能量在495和520nm处测量。520和495之间的发射比例是所述底物被所述激酶磷酸化水平的量度。

激酶抑制测定(10μL)在20℃以384孔板形式进行。在ATP(20μM)的表观Km处基于辐射度试验(Invitrogen)使用8或10个点的曲线重复测定了化合物IC50值。最终反应条件含有400nM荧光素-IkBα底物(DRHDSGLDSMKDE)、20μM ATP、分别为2nM或8nM的IKKε或TBK1激酶，以及激酶试验缓冲液中的3％DMSO，所述激酶试验缓冲液由50mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl、1mM EGTA、0.01％Brij-35组成。

化合物稀释剂是由10mM DMSO原液通过稀释到DMSO中而制备的。化合物稀释系列被进一步在激酶试验缓冲液中稀释以得到12％的DMSO原液，试验中的最终浓度为3％DMSO。

所述激酶磷酸化试验通过加入所述激酶起始，IKKε和TBK-1激酶的反应分别进行1小时或2.5小时。两种条件都在所述磷酸化的线性内。加入10mM EDTA终止反应，在与1.5nM铽标记的针对IkBα肽上的丝氨酸32磷酸化的抗体孵育1小时后检测磷酸化，这都在TR-FRET稀释缓冲液(Invitrogen)中。

所述测试的结果在以下的化学合成中示出。在IKKε呈现的数据中，＜9μM意指具有范围为300nM至≤9μM的活性；＜300nM意指具有范围为30nM至≤300nM的活性；对于TBK-1呈现的数据，＜3μM意指具有范围为300nM至≤3μM的活性，＜300nM意指具有范围为30nM至≤300nM的活性。

测试了实施例DMX-1、8、9、14和16的化合物针对除IKK-ε和TBK-1外的TBK1、IKKβ、Jnk1和Jnk3的活性。使用Reaction BiologyCorp公司的激酶热点技术(Kinase Hotspot Technology)使用放射标记的P³³ATP筛选了TBK-1、IKKβ、Jnk1和Jnk3。针对Jnk-1和Jnk-3的筛选在ATP的Km处进行。IKK-ε和TBK-1筛选也是在上述的ATP对于这些酶的Km处进行的。当使用放射标记的P³³ATP试验针对TBK-1筛选化合物时，所述表中全部化合物在300nM显示了＞95％的抑制。使用1μM的ATP在单一的点进行针对IKK-β的筛选，抑制百分数显示在括号中。另外，测试了实施例DMX-56、66和69的化合物针对除TBK-1和IKKε外的TBK-1、IKKβ和Jnk1的活性。使用ReactionBiology Corp公司的激酶热点技术用放射标记的P³³ATP筛选了TBK-1、IKKβ和Jnk1。IKK-ε和TBK-1筛选也是在上述的ATP对于这些酶的Km处进行的。当使用放射标记的P³³ATP试验针对TBK-1筛选化合物时，全部化合物在300nM显示了＞95％的抑制。使用10μM的ATP在单一的点进行针对IKK-β和JNk-1的筛选，抑制百分数显示在括号中。

化学合成实施例

实施例DMX-1：3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酰胺的合成

2-吡咯烷-1-基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲腈

3-氰基-4-氟苯基-硼酸频哪醇酯(250mg，1.01mmol)溶解在NMP(4mL)中。加入吡咯烷(415μL，5.05mmol)，将所述混合物在140℃在微波(300W，搅拌)中加热5分钟。将该反应再重复14次。合并所述15次反应的混合物，并在真空(Genevac^TM)中蒸发溶剂。将所述残余物溶解在EtOAc(200mL)中，用饱和盐水溶液(2x75mL)洗涤所述溶液。将所述有机相干燥(MgSO₄)、过滤，在真空中蒸发溶剂。将所述粗产品通过快速柱色谱(flash column chromatography)(40-63目硅胶，90％异己烷-EtOAc)纯化以提供灰白色固体的题述化合物(2.84g，63％)；LC-MS，R_t＝3.33min(MeOH-FA方法)，m/z298(MH⁺)。

除该方法外，相似反应可替代地通过在密封管中在DMF中在120℃加热来完成，或者可替代地通过在MeCN中在80℃加热来完成。

5-(2-氯-嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈

吡咯烷-1-基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲腈(200mg，0.67mmol)、2，4-二氯嘧啶(120mg，0.81mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(78mg，0.07mmol，10mol％)和碳酸钠(213mg，2.01mmol)用1∶11，4-二氧杂环己烷-H₂O(4.0mL)稀释。然后将所述混合物在100℃在微波(300W，搅拌)中加热10分钟。将该反应再重复4次。将所述反应混合物合并，并在真空(Genevac^TM)中蒸发溶剂。将残余物在DCM(150mL)和H₂O(50mL)之间分配。将所述有机相用水(50mL)和饱和盐水溶液(75mL)洗涤。然后将所述有机相干燥(MgSO₄)、过滤，在真空中蒸发溶剂。将所述粗产品通过柱色谱(40-63目硅胶，70％异己烷-EtOAc)纯化以提供黄色固体的题述化合物(727mg，76％)；LC-MS，R_t＝2.80min(MeOH-FA方法)，m/z285，287(MH⁺)。

除该方法外，相似反应可替代地通过在密封管中在1∶11，4-二氧杂环己烷-H₂O中在100-110℃加热来完成。

3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酰胺(DMX-1)

5-(2-氯-嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈(50mg，0.18mmol)溶解在NMP(1mL)中。加入3-氨基苯甲酰胺(100mg，0.734mmol)，将所述混合物在140℃在微波(300W，搅拌)中加热45分钟。在真空(Genevac^TM)中蒸发溶剂。所述残余物溶解在DMSO(1.5mL)中，通过反相制备LC-MS纯化所述粗产品。合并含有所需产品的级分，并在真空(Genevac^TM)中蒸发溶剂。得到了灰白色固体的题述化合物(15.3mg，23％)；LC-MS，R_t＝8.00min(ANALpH2_MeOH_QC)，m/z400(MH⁺)。

除该方法外，相似反应可替代地通过在微波中在120-160℃加热15-360分钟来完成，通过反相制备LC-MS或硅胶(silica)快速色谱来纯化产品。替代地，相似反应还可以在密封管中使用叔丁醇钾在THF中回流16小时来完成，或者在密封管中使用碳酸钾在DMF中在125℃持续16小时来完成。

化合物DMX-1的抑制IKKε的IC₅₀为＜30nM；其抑制TBK-1的IC₅₀为＜30nM。

如下化合物使用与所述实施例DMX-1相似的化学过程来制造：

通过将母体游离碱溶解在2M HCl-二乙醚中，并通过在减压下过滤来收集所述沉淀的盐酸盐(所述化合物作为盐酸盐而筛选)而从母体游离碱制备盐酸盐。

实施例DMX-22：吡咯烷-1-羧酸{3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-酰胺的合成

吡咯烷-1-羧酸(3-硝基-苯基)-酰胺的合成

将吡咯烷(1.5mL，18.3mmol)加入到搅拌的无水THF(60mL)中的3-硝基苯基异氰酸酯(1.5g，9.14mmol)溶液中，将所述混合物回流搅拌1小时。在真空中蒸发溶剂。然后将所述粗产品通过柱色谱(Flashmaster，40-63目硅胶，50％异己烷-EtOAc)纯化以提供灰白色固体的题述化合物(1.85g，86％)；LC-MS，R_t＝2.80min(MeOH-FA)，m/z236(MH⁺)。

吡咯烷-1-羧酸(3-氨基-苯基)-酰胺的合成

吡咯烷-1-羧酸(3-硝基-苯基)-酰胺(850mg，3.40mmol)溶解在1∶1MeOH-EtOAc(100mL)中。加入-镍(3满勺)，然后在5分钟内加入一水合肼(1.70g，34.0mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌16小时，然后通过硅藻土过滤，用EtOAc(10x10mL)洗涤沉淀。在真空中蒸发滤液，将残余物溶解在EtOAc(50mL)中。将所述溶液用饱和盐水溶液(2x50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在真空中蒸发溶剂。然后将所述粗产品通过柱色谱(Flashmaster，40-63目硅胶，EtOAc→10％MeOH-EtOAc)纯化以提供浅黄色固体的题述化合物(1.29g，92％)；LC-MS，R_t＝0.99min(MeOH-FA)，m/z206(MH⁺)。

吡咯烷-1-羧酸{3-[4-(3-氰基-4-吡咯烷-1-基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-酰胺(DMX-22)

5-(2-氯-嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲腈(40mg，0.141mmol)、吡咯烷-1-羧酸(3-氨基-苯基)-酰胺(29mg，0.141mmol)、Pd₂(dba)₃(6.4mg，0.007mmol，5mol％)、2-二环己基膦基-2’-(N，N-二甲基氨基联苯)(55.5mg，0.141mmol)以及NaO^tBu(20.3mg，0.211mmol)溶解在1，4-二氧杂环己烷(1mL)中，并将所述混合物在微波(300W，搅拌)中在100℃加热10分钟。将所述混合物用H₂O(10mL)和EtOAc(30mL)稀释，并分层。将所述水相用EtOAc(20mL)萃取，将合并的有机相干燥(MgSO₄)、过滤，并在真空中蒸发溶剂。所述混合物溶解在DMSO(1.5mL)中，通过反相制备LC-MS纯化所述粗产品。合并含有所需产品的级分，并在真空中蒸发溶剂。得到了黄色固体的题述化合物(13.1mg，21％)；LC-MS，R_t＝6.50min(ANALpH2_MeOH_QC)，m/z453(MH⁺)。

除该方法外，相似反应还可以通过将所述反应物与叔丁醇钠、Dave-Phos、Pd₂(dba)₃和1，4-二氧杂环己烷在密封管中在70-100℃搅拌1小时来完成。

DMX-22的抑制IKKε的IC50为＜30nM，抑制TBK-1的IC50为＜30nM。

如下化合物使用与所述实施例DMX-22相似的化学过程来制造：

＊用于与中间体5偶联的胺是合成的，因为它们不能容易地从商业供应商获得。

实施例DMX-33和DMX-34所必需的胺的制造是经两个步骤，在室温使用乙腈中的三乙胺用对应的乙二胺取代2-氯-5-硝基-吡啶中的2-氯基团。然后用-镍和肼或在10％钯碳上氢化来还原所述硝基。

实施例DMX-36所必需的胺是经5个步骤从3，5-二甲基-1H-吡唑根据由Lee et al.，J.Org.Chem，1989，428-431描述的方法而制造的。

＊＊这些化合物是使用类似条件从化合物5的2-碘代类似物合成的。反过来可使用类似途径从2，4-二碘代嘧啶起始制造化合物5。

另外上表中的一些化合物被用于合成其他的类似物。

实施例DMX-38、39和41是通过在甲醇中与氨加热使各自的乙酯或甲酯酰胺化而合成的。DMX-40是从羧酸DMX-28通过初始转变为酰基氯然后使用本领域常见条件进行酰胺化而合成的。DMX-42是通过甲酯DMX-35的水解制备的，实施例DMX43-45是从DMX-42使用本领域常见的酰胺偶联条件而制备的。

下表中示出的额外化合物是通过与以上方法类似的方法合成的：

＊用于与中间体5偶联的胺是合成的，因为它们不能容易地从商业供应商获得。

实施例DMX-49所必需的胺是经3个步骤从5-硝基-吡啶-2-基胺制造的。这首先使用三乙胺作为碱在回流THF中与氯乙酰氯偶联，然后使用碳酸钾作为碱用乙腈中的二甲胺取代所述氯。随后使用10％钯/碳作为催化剂在大气压下在氢化条件下将所述硝基还原以得到所需要的胺。

接着进行通过中间体6的替代途径用于一些化合物的合成。中间体6是根据专利申请WO2009/032861合成的。

实施例DMX-50：1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-哌啶-4-羧酸酰胺的合成

N-{5-[4-(3-氰基-4-氟-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-乙酰胺

化合物6(500mg，2.14mmol)、N-(5-氨基-吡啶-2-基)-乙酰胺(390mg，2.57mmol)、NaOt-Bu(309mg，3.21mmol)以及Dave-phos(253mg，0.64mmol)在1，4-二氧杂环己烷(20mL)中的混合物用氩除气30分钟，加入Pd₂(dba)₃(98mg，0.10mmol)并再次除气10分钟，所产生的悬浮液在微波中加热到90℃持续20分钟。通过硅藻土床过滤所述反应混合物，将所述滤液在真空中浓缩以提供粗化合物，将其通过柱色谱(硅胶100-200目，0-2％MeOH/CHCl₃)纯化以得到棕色固体的N-{5-[4-(3-氰基-4-氟-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-乙酰胺(260mg，34％)。(TLC体系：10％CH₃OH/CHCl₃，R_f＝0.3)。

除该方法外，相似反应还可以通过在110℃在密封管中在1，4-二氧杂环己烷中搅拌1-5小时来完成；替代地，相似反应可以使用Xantphos、Pd₂(dba)₃和Cs₂CO₃在1，4-二氧杂环己烷中在密封管中回流1小时来进行。

1-{4-[2-(6-乙酰氨基-吡啶-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氰基-苯基}-哌啶-4-羧酸酰胺-DMX-50

将N-{5-[4-(3-氰基-4-氟-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-基}-乙酰胺(100mg，0.28mmol)和哌啶-4-羧酸酰胺在正丁醇(5mL)中的搅拌溶液在密封管中加热到115℃持续48小时。蒸发溶剂以获得粗化合物。将所述粗化合物通过制备-HPLC纯化以获得所需要的浅黄色粉末产品(38mg，29％)；LC-MS，Rt，＝2.96min(方法C)，m/z457(MH⁺)。除该方法外，相似反应还可以在110℃持续16-120小时来完成。纯化可以通过制备-HPLC或快速柱色谱进行。

另外，如果所述胺试剂为盐形式，那么这些反应可以在密封管中用DMF中的CsCO₃在120℃持续24小时来完成，或在密封管中用1，4-二氧杂环己烷中的CsCO₃在100℃持续16-24小时来完成，或在密封管中用DMF中的K₂CO₃在120℃持续24小时来完成，或在密封管中用1，4-二氧杂环己烷中的叔丁醇钾在100℃持续24小时来完成。纯化可以通过制备-HPLC或快速柱色谱进行。

DMX50的抑制IKKε的IC₅₀为＜30nM；其抑制TBK-1的IC₅₀为＜300nM。

如下化合物使用与所述实施例DMX-50类似的化学过程来制造：

＊对于实施例DMX-67，R1所必需的中间体胺使用标准文献方法从D-脯氨酸来制备。该物质是使用(Boc)₂O进行Boc保护的，随后转变为甲基酰胺是使用氯甲酸异丁酯和NMM实现的。最后用4N HCl-二氧杂环己烷的Boc脱保护步骤提供所需要的胺。这描述在以下方案中。

＊＊对于以下实施例，所必需的用于Buchwald-Hartwig偶联的胺(R²NH₂)不容易地从商业供应商获得，因此其是合成的。

实施例DMX77-80所必需的胺是经两个步骤制造，在回流下使用乙腈中的碳酸钾用1-甲基哌啶-4基-胺取代2-氯-5-硝基-吡啶中的2-氯基团。然后用-镍和一水合肼还原所述硝基，实施例DMX-69所必需的胺是按照实施例DMX-33的描述制造的。