一种埃索美拉唑钠和注射用埃索美拉唑钠中杂质含量检测方法

技术领域

本发明属于药物分析领域，特别涉及一种质子泵抑制剂埃索美拉唑钠及注射用埃索美拉唑钠中杂质含量检测方法。

背景技术

埃索美拉唑钠（Esomeprazole Sodium，S-5-甲氧基-2{[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亚磺酰基}-1H-苯并咪唑钠）是一种强效自由基清除剂及抗氧化剂，其分子式为C₁₇H₁₂N₃NaO₃S，分子量367.4，结构式为：

埃索美拉唑钠是治疗消化性溃疡、胃食管反流病等酸相关疾病的首选药物。其作为奥美拉唑的单一异构体，即（S）-异构体，具有更高的生物利用度和更一致的药代动力学，使到达质子泵的药物增加，抑酸效果优于其他质子泵抑制剂（PPI）。

注射用埃索美拉唑钠作为埃索美拉唑钠目前唯一剂型为注射剂，直接进入人体静脉血液。然而，由于埃索美拉唑钠在生产过程中易引入一些工艺杂质，而在冻干及贮存的过程易产生一些降解产物，杂质含量的多少一方面影响药效活性，另一方面可能增加药物的不良反应，因此埃索美拉唑钠及其注射剂中的含量检测及杂质检查方法，对控制埃索美拉唑钠的质量及保证埃索美拉唑钠制剂的临床疗效具有重要的意义。

然而，现有技术中对埃索美拉唑钠以及注射用埃索美拉唑钠的质量控制通常采用对埃索美拉唑钠的含量进行检测的方法，难以对其重要杂质进行一一监控，难以很好的评价埃索美拉唑特别是注射用埃索美拉唑的质量。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种能够对埃索美拉唑钠和注射用埃索美拉唑钠中重要的杂质检测的含量检测方法。

技术方案：本发明提供的一种埃索美拉唑钠和注射用埃索美拉唑钠的含量检测方法，以十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以有机相与水相的混合溶剂作为流动相梯度洗脱，测定埃索美拉唑钠及其八个杂质的含量；

其中，梯度洗脱条件为：

其中，八个杂质分别为：

杂质1：2-巯基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑；

杂质2：5-甲氧基-2-{[(3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亚磺酰基}-1H-苯并咪唑；

杂质3：5-甲氧基-2-[(4-甲氧基-3,5-二甲基2-吡啶基)甲硫基]-1H-苯并咪唑；

杂质4：5-甲氧基-2-{[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]磺酰基}-1H-苯并咪唑；

杂质5：4-甲氧基-2-{[(5-甲氧基-1H-苯并咪唑)-2-亚磺酰基]甲基}-3,5-二甲基吡啶-N-氧化物；

杂质6：2-((5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基亚磺酰基)甲基)-3,5-二甲基吡啶-4-酮；

杂质7：1-(5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基-4-氧-1,4-二氢吡啶-2-羧酸；

杂质8：2-[(5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基亚磺酰基)甲基]-3,5-二甲基吡啶-4-酮。

优选地，埃索美拉唑钠杂质1的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质2的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质3的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质4的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质5的含量应在0.20%以下；埃索美拉唑钠杂质6的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质7的含量应在0.10%以下；埃索美拉唑钠杂质8的含量应在0.10%以下。

其中，所述有机相为甲醇或乙腈，所述水相为pH为5.0-9.0的醋酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液，优选pH为5.0-9.0的磷酸盐缓冲液，更优选pH为7.0-9.0的磷酸盐缓冲液。

有益效果：本发明提供的埃索美拉唑钠和注射用埃索美拉唑钠的含量检测方法工艺简单、成本低廉，采用梯度洗脱的方法，能够测定埃索美拉唑钠及其八个重要杂质的含量，检测方法科学、合理、客观，从而能够更好的控制埃索美拉唑钠的质量。

具体而言，本发明通过大量实验，采用高效液相色谱法梯度洗脱，在该洗脱条件下，使埃索美拉唑钠中八种重要的工艺杂质或降解杂质能够完全分离并定量测定，不但适用于原料埃索美拉唑钠，也适用于注射用埃索美拉唑钠，为埃索美拉唑钠及注射用埃索美拉唑钠提供了一种更可靠、更准确的质量控制方法。

附图说明

图1为本发明实施例1的HPLC图谱。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细描述：

实施例1 高效液相色谱法测定埃索美拉唑钠中杂质

照高效液相法（中国药典2010年版二部附录V D）测定

色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。流动相：流动相A为每1L中含十二水合磷酸氢二钠1.4g，磷酸调节pH至7.4的水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱。分别取埃索美拉唑钠、杂质4用初始流动相稀释制成浓度均为0.02mg/ml的混合溶液，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，出峰顺序为杂质4、埃索美拉唑，杂质4与埃索美拉唑的分离度应符合要求。

洗脱条件：

流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：302nm。

测定法取埃索美拉唑钠适量，精密称定，加初始流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含埃索美拉唑0.5mg的溶液（临用新制），作为供试品溶液；精密移取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加初始流动相稀释至刻度，即得对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按面积归一化法计算，即得，结果见表2。

表1 实施例1的杂质之间分离度

实施例2 高效液相色谱法测定埃索美拉唑钠中杂质

照高效液相法（中国药典2010年版二部附录V D）测定

色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。流动相：流动相A为每1L中含十二水合磷酸氢二钠1.4g，磷酸调节pH至7.6的水溶液，流动相B为甲醇，进行梯度洗脱。分别取埃索美拉唑钠、杂质4用初始流动相稀释制成浓度均为0.02mg/ml的混合溶液，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，出峰顺序为杂质4、埃索美拉唑，杂质4与埃索美拉唑的分离度应符合要求。

洗脱条件：

流速：1.0ml/min；柱温：25℃；检测波长：280nm。

测定法取埃索美拉唑钠适量，精密称定，加初始流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含埃索美拉唑0.5mg的溶液（临用新制），作为供试品溶液；精密移取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加初始流动相稀释至刻度，即得对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按面积归一化法计算，即得，结果见表2。

表2 实施例2的杂质之间分离度

实施例3 高效液相色谱法测定埃索美拉唑钠中杂质

照高效液相法（中国药典2010年版二部附录V D）测定

色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。流动相：流动相A为每1L中含十二水合磷酸氢二钠1.4g，磷酸调节pH至7.8的水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱。分别取埃索美拉唑钠、杂质4用初始流动相稀释制成浓度均为0.02mg/ml的混合溶液，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，出峰顺序为杂质4、埃索美拉唑，杂质4与埃索美拉唑的分离度应符合要求。

洗脱条件：

流速：1.0ml/min；柱温：35℃；检测波长：280nm。

测定法取埃索美拉唑钠适量，精密称定，加初始流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含埃索美拉唑0.5mg的溶液（临用新制），作为供试品溶液；精密移取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加初始流动相稀释至刻度，即得对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按面积归一化法计算，即得。

表3 实施例3的杂质之间分离度

实施例4 高效液相色谱法测定埃索美拉唑钠中杂质

照高效液相法（中国药典2010年版二部附录V D）测定

色谱条件与系统适用性试验八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。流动相：流动相A为每1L中含乙酸铵0.78g，三乙胺调节pH至8.0的水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱。分别取埃索美拉唑钠、杂质4用初始流动相稀释制成浓度均为0.02mg/ml的混合溶液，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，出峰顺序为杂质4、埃索美拉唑，杂质4与埃索美拉唑的分离度应符合要求。

洗脱条件：

流速：1.0ml/min；柱温：35℃；检测波长：280nm。

测定法取埃索美拉唑钠适量，精密称定，加初始流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含埃索美拉唑0.5mg的溶液（临用新制），作为供试品溶液；精密移取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加初始流动相稀释至刻度，即得对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按面积归一化法计算，即得。

表4 实施例4的杂质之间分离度

实施例5 高效液相色谱法测定埃索美拉唑钠中杂质

照高效液相法（中国药典2010年版二部附录V D）测定

色谱条件与系统适用性试验八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。流动相：流动相A为每1L中含十二水合磷酸氢二钠1.4g，磷酸调节pH至9.0的水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱。分别取埃索美拉唑钠、杂质4用初始流动相稀释制成浓度均为0.02mg/ml的混合溶液，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，出峰顺序为杂质4、埃索美拉唑，杂质4与埃索美拉唑的分离度应符合要求。

洗脱条件：

流速：1.0ml/min；柱温：35℃；检测波长：280nm。

测定法取埃索美拉唑钠适量，精密称定，加初始流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含埃索美拉唑0.5mg的溶液（临用新制），作为供试品溶液；精密移取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加初始流动相稀释至刻度，即得对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按面积归一化法计算，即得。

表5 实施例5的杂质含量