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基因组靶标目的基因的定向敲除的方法及试剂盒

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摘要

本发明涉及基因工程领域，具体而言，涉及一种基因组靶标目的基因的定向敲除的方法及试剂盒。该方法包括构建pPTD-NLS-Cas9；体外表达、纯化并获得PTD-NLS-Cas9融合蛋白；将其与向导RNA共孵育，得到PTD-NLS-Cas9/RNA复合物；将PTD-NLS-Cas9/RNA复合物与靶细胞共孵育，使其进入靶细胞进行目的基因的定向敲除。该复合物利用蛋白转导结构域和细胞核定位结构域的穿膜定位机制，实现Cas9核酸内切酶和向导RNA快速、高效的导入靶细胞中的效果；克服了现有技术中Cas9核酸内切酶难以导入靶细胞的技术问题。

著录项

  • 公开/公告号CN104328138A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2015-02-04

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海缔达生物科技有限公司;

    申请/专利号CN201410520023.5

  • 发明设计人 陈静;

    申请日2014-09-30

  • 分类号C12N15/85;C12N15/66;

  • 代理机构北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人吴开磊

  • 地址 200000 上海市杨浦区邯郸路8号1519号席位

  • 入库时间 2023-12-17 02:55:12

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2018-06-22

    发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):C12N15/85 申请公布日:20150204 申请日:20140930

    发明专利申请公布后的驳回

  • 2015-03-11

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/85 申请日:20140930

    实质审查的生效

  • 2015-02-04

    公开

    公开

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