基于铜盐的组合物、铜盐及其防治植物病原体的应用

本发明涉及用于防治植物病原体的基于铜盐的组合物。

本发明还涉及水杨酸衍生物的铜盐及其防治植物病原体的应用。

水杨酸是一种天然存在于许多植物中的化合物。明确存在于柳树皮的提取物中，从古代开始就用做消炎药。

如今，可以方便地通过将酚盐与二氧化碳缩合实现工业化规模合成水杨酸。其许多衍生物可通过充分利用酚环、羧基和酚羟基的特殊反应性容易地制备。特别是乙酰水杨酸是普遍已知的药剂。

已证实通过天然存在于植物中、但在感染后被激活的防御体系的早期感应，水杨酸能防治各种病原体。实际上植物病原体的存在引起一系列生物化学信号，其中水杨酸在植物组织中的累积导致例如具有杀真菌活性的特异性蛋白质的合成。

现已证明在真菌感染之前诱导提高水杨酸的水平能带来对植物本身更有效的杀菌反应(THE PLANT CELL，第8卷(1996)，第1809-1819页)。

为了使杀菌剂在农业实践中能够是经济上可接受的，必需确保其具有可靠的和长期的杀菌作用。上述水杨酸的应用已描述为提供的保护水平低于那些其他传统的杀菌剂。例如据说使用上述水杨酸防治葡萄霜霉病大大低于使用传统的二价铜产品获得的效果。

申请人现已发现就本领域现有技术描述中所述的那些物质来说，水杨酸的一些衍生物的铜盐特别便于防治细菌和真菌植物病原体。事实上申请人已发现与足剂量的传统铜盐相比，水杨酸一些衍生物的铜盐在适当地配制后能获得对所处理植物的长期保护作用。

而且，本发明的对象水杨酸衍生物的铜盐比相应的水杨酸未成盐衍生物或用不同的金属成盐的水杨酸盐在防治植物或其部分上的植物病原体方面更有效。此活性可归因于被铜离子的直接作用增强的伴随感应作用。事实上，经确认的活性还高于使用非成盐水杨酸混合传统的二价铜杀菌剂所产生的作用。

本发明对象的一个重要方面盐的使用源于这样的事实即被水杨酸衍生物激活的植物的防御体系具有不同的作用机制并且因此产生不敏感反应，使产生抗性菌株任何可能减低到最小。

并且，申请人还发现这些盐形成了一种防治遗传改性以放大原始的天然防御体系或其中插入了一个或多个基因的植物品种中植物病原体的极好手段，由于组织中水杨酸本身的含量改变，这些植物表达杀菌蛋白质。

此外，申请人已发现水杨酸衍生物的盐与其他活性要素的联合应用(本发明的对象)增加了生物效应的正协同作用，能够极好地防治植物病原体，即使该病原体对所述活性要素有抗性，并且还可以是在被遗传改性的植物上。

因此，本发明涉及使用水杨酸衍生物的铜盐混合其他活性要素防治植物病原体的应用。此外，本发明还涉及一些上述水杨酸衍生物的铜盐及其防治植物病原体的应用和该铜盐本身。

因此，本发明的一个对象涉及含一种或多种式(I)的水杨酸衍生物的盐与至少一种杀菌化合物以任何摩尔比的杀菌组合物，所述杀菌化合物不对应于式(I)的水杨酸衍生物的盐：

其中

-R₁代表H或CO-R’酰基；

-R₂，当n＝2时是相同或不同的，是氢、任选选自氟、氯、溴或碘的卤素；C₁-C₉烷基；C₁-C₉卤代烷基；C₁-C₉烷氧基；C₁-C₉卤代烷氧基；C₁-C₉硫代烷基；C₁-C₉卤代硫代烷基；C₃-C₉环烷基；C₂-C₁₀烷氧羰基；氰基；苯基；羟基；

-R₁’代表氢；C₁-C₉烷基；C₁-C₉卤代烷基；C₁-C₉烷氧基；C₁-C₉卤代烷氧基；C₂-C₁₀烷氧羰基；苯基；

-n是0-2的数；

-X代表氧原子、氮原子或硫原子。

式(I)化合物还可通过任何数目的水分子的配位作用以水合形式存在。

本发明的另一对象涉及式(I)的水杨酸衍生物的盐：

其中

-R₁代表H或CO-R’酰基；

-R₂，当n＝2时是相同或不同的，是任选选自氟、氯、溴或碘的卤素；C₁-C₉烷基；C₁-C₉卤代烷基；C₁-C₉烷氧基；C₁-C₉卤代烷氧基；C₁-C₉硫代烷基；C₁-C₉卤代硫代烷基；C₃-C₉环烷基；C₂-C₁₀烷氧羰基；氰基；苯基；羟基；

-R₁’代表烷基，任选选自甲基、丙基、异丙基；或卤代烷基三氟甲基；或氢；

-n是0-2的数；

-X代表氧原子、氮原子或硫原子；

当X等于氧，不包括其中R₁代表酰基COCH₃并且R₂是氢或氯，和R₁代表酰基COiPr或COEt并且R₂是氢的化合物。

式(I)化合物还可通过任何数目的水分子的配位作用以水合形式存在。

本发明的另一对象涉及式(I)的水杨酸衍生物防治植物或其部分上的植物病原体的应用：

其中

-R₁代表H或CO-R’酰基；

-R₂，当n＝2时是相同或不同的，是任选选自氟、氯、溴或碘的卤素；C₁-C₉烷基；C₁-C₉卤代烷基；C₁-C₉烷氧基；C₁-C₉卤代烷氧基；C₁-C₉硫代烷基；C₁-C₉卤代硫代烷基；C₃-C₉环烷基；C₂-C₁₀烷氧羰基；氰基；苯基；羟基；

-R₁’代表烷基，任选选自甲基、丙基、异丙基；或卤代烷基三氟甲基；或氢；

-n是0-2的数；

-X代表氧原子、氮原子或硫原子。

式(I)化合物还可通过任何数目的水分子的配位作用以水合形式存在。

因此，本发明含一种或多种水杨酸衍生物的盐(I)联合至少一种不对应于式(I)的水杨酸衍生物的盐的其他杀菌化合物的组合物有利的特征为诱导天然防御连同铜离子的直接作用，形成极好的植物病原体防治体系，与许多活性要素一起发挥协同作用，是抗-抗性策略的最佳手段。

具体地说，不对应于式(I)水杨酸衍生物的盐的杀菌化合物可选自麦角固醇生物合成抑制剂、线粒体呼吸作用抑制剂、酰基苯胺类、内吸性抗-霉杀菌剂、具杀菌活性的二肽、向细胞的抗霉杀菌剂、接触杀菌剂、铜杀菌剂、黑色素生物合成抑制剂杀菌剂。

不对应于式(I)水杨酸衍生物的盐的杀菌化合物优选选自氟醚唑、苯醚甲环唑、腈菌唑、氟硅唑、氧唑菌、丁苯吗啉、苯锈啶、腈嘧菌酯、亚胺菌、trifloxystrobin、甲霜灵、苯霜灵外消旋体或光学活性R异构体(称为IR6141)、iprovalicarb、ethaboxam、cyazofamid、霜脲氰、代森锰锌、百菌清(clorotalonil)、灭菌丹、二噻农(ditianon)、氢氧化铜、王铜、氯氧化铜钙。

对于这些优选的组合物，已确定存在特别重要的协同作用，这可在实验实施例中观察到。

在上述通式中，C₁-C₉烷基指直链或支链的C₁-C₉烷基，任选被一个或多个彼此相同或不同的取代基取代。

此基团的实例是：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基。

C₁-C₉卤代烷基指被一个或多个相同或不同的卤素原子取代的直链或支链烷基，卤素原子任选自氟、氯、溴、碘。

此基团的实例是：氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、2，2，2-三氟乙基、2，2，2-三氯乙基、2，2，3，3-四氟丙基、2，2，3，3，3-五氟丙基。

C₁-C₉烷氧基指其中的脂族部分是如上所述的C₁-C₉烷基的C₁-C₉烷氧基。

此基团的实例是：甲氧基、乙氧基。

C₁-C₉卤代烷氧基指其中的脂族部分是如上所述的C₁-C₉卤代烷基的C₁-C₉卤代烷氧基。

此基团的实例是：三氟甲氧基、1，1，2，2-四氟乙氧基、1，1，2，3，3，3-六氟丙氧基。

C₁-C₉硫代烷基指其中的脂族部分是如上所述的C₁-C₉烷基的C₁-C₉硫代烷基。此基团的实例是：硫代甲基、硫代乙基。

C₁-C₉卤代硫代烷基指其中的脂族部分是如上所述的C₁-C₉卤代烷基的C₁-C₉卤代硫代烷基。

此基团的实例是：三氟硫代甲氧基、1，1，2，2-四氟硫代乙氧基。

C₃-C₉环烷基指其环由3-6个碳原子构成的环烷基，任选被一个或多个彼此相同或不同的取代基取代。

此基团的实例是：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。

C₂-C₁₀烷氧羰基指其中的脂族部分是如上所述的C₁-C₉烷基的烷氧羰基。

此基团的实例是：羧甲基、羧乙基、羧丙基。

任选取代指一个或多个相同或不同的取代基，所述取代基选自下列基团：卤素原子、烷基、烷氧基、烷硫基、氰基、羟基、氨基羰基、烷氧羰基。

R₂优选选自氟、氯、甲基、三氟甲基、羟基。

可用于本发明组合物的杀菌剂的一些其他实例列在下面。因此，其中可选择下列杀菌剂中的一种或多种：

1.作为麦角固醇生物合成抑制剂，例如三唑、咪唑、嘧啶和吡啶杀菌剂和/或吗啉或哌啶的衍生物；

2.作为线粒体呼吸作用抑制剂，例如strobilurine的类似合成产物，或fenamidone、噁唑酮菌、ethaboxam、氟啶胺或cyazofamid；

3.酰基苯胺类中，甲霜灵或苯霜灵的外消旋体或光学活性R异构体、噁霜灵和/或呋酰胺；

4.作为内吸性抗霉杀菌剂，iprovalicarb、烯酰吗啉、氟联苯菌、中国产品SYP-L-190、具杀菌活性的二肽、霜霉威和/或zoxamide；

5.作为亲细胞的抗霉杀菌剂，霜脲氰；

6.作为接触杀菌剂，百菌清、灭菌丹、福美双、丙森锌、代森锰、代森锌、抑菌灵、甲苯氟磺胺、克菌丹、灭菌丹和/或二噻农；

7.作为铜杀菌剂，氢氧化铜Cu(OH)₂、王铜(3Cu(OH)₂.Cu(Cl)₂)，氯氧化铜钙(3Cu(OH)₂.Ca(Cl)₂)、和/或碱式硫酸铜(3Cu(OH)₂.Cu(SO₄))；

8.作为黑色素生物合成抑制剂杀菌剂，三环唑和/或氯环丙酰胺。

三唑杀菌剂的实例是：四氟醚唑、氧唑菌、苯醚甲环唑等。

嘧啶杀菌剂的实例是：氟苯嘧啶醇、氯苯嘧啶醇等。

吗啉衍生物的实例是：丁苯吗啉、苯锈啶、螺噁茂胺。

Strobilurine类似产物的实例是：  腈嘧菌酯、亚胺菌、pyraclostrobin等。

不对应于式(I)的水杨酸衍生物的盐的杀菌化合物是商用化合物或将商业化的产品。其说明能在技术资料中容易地找到，例如在“ThePesticide manual”，2000，XII版，British Crop Protection Council Ed.

具杀菌活性的二肽衍生物指在欧洲专利申请EP1028125中要求保护的那些化合物之一。

具式(I)的化合物可通过许多合成方法容易地获得。为了说明而非限制的目的，例如下文提供的制备具有式(I)化合物的方法(方案A)，其中X为氧，R₁是-CO-R’酰基：

                         方案A

在有机溶剂如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷或乙酸乙酯中，在有机碱如吡啶或三乙基胺或无机碱如碳酸氢钠或碳酸氢钾的存在下，式(II)的酸被式(III)的酰氯酰化，或者在类似的条件下用酸酐(IV)将式(II)的酸酰化，或也可使用相同的酸酐(IV)作为溶剂。然后借助有机碱如碳酸氢钠或碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾将式(V)的酸衍生物溶解于水中，向所得溶液中添加溶解于水中的铜盐(VI)，其中的X可以是卤素如氯或溴或硫酸根离子或高氯酸盐，获得式(I)化合物。作为选择，可以使用酸形式(V)的氢氧化铜或碳酸铜，可以使用或不使用额外的碱如有机胺例如三乙基胺作为催化剂。

为制备式(I)化合物，其中X为氮和硫，可采用如上所述的相同方法，使用具式(II)的相应的酸。

其中R₁是氢的式(I)的盐是按照将中间体(V)转化成盐(I)的所述方法处理式(II)化合物类似地获得。

式(I)的水杨酸盐衍生物单独或与至少一种其他活性要素的组合物能防治许多真菌或细菌植物病原体，并且降低了病原体对其他杀菌剂的敏感性。

纯粹为了说明而非任何限制的目的，下文列出了一些被式(I)化合物单独或以混合物形式防治的植物病原体的实例以及可能应用的作物的实例：

葡萄上的葡萄生单轴霉(Plasmopara viticola)；

烟草上的烟草霜霉(Peronospora tabacina)；

苹果树上的苹果黑星菌(Venturia inaequalis)；

生菜、菠菜上的盘梗霉属(Bremia)；

植物上的疫霉属(Phytophthora spp.)；

葫芦科上的古巴假霜霉(Pseudoperonospora cubensis)；

稻上的Pyricularia orizae。

含一种或多种式(I)的水杨酸衍生物盐的组合物和式(I)的水杨酸衍生物盐都能发挥治疗性和预防性的高杀菌作用，并且还具有低或无植物毒性。

因此，本发明的另一对象涉及通过施用式(I)的化合物或联合至少一种不对应于式(I)的水杨酸衍生物盐的其他杀菌化合物的混合物，防治农业作物中的植物病原体真菌的方法。

更明确地说，本发明的对象涉及一种可用于农业作物控制对不对应于式(I)的水杨酸衍生物盐的杀菌剂敏感或耐药的植物病原体的方法。

获得需要效果的化合物的用量可根据各种因素如被保护的作物、病原类型、感染程度、气候条件、采用的剂型而改变。

化合物的剂量在10g-5kg/ha一般能提供充分的控制。

为了实际用于农业，采用含一种或多种式(I)的水杨酸衍生物盐或其与至少一种不对应于式(I)的水杨酸衍生物盐的杀菌化合物的混合物的杀菌组合物往往是方便的。

本发明的对象-该组合物的施用可施用到植物的任何部分，例如叶片、茎、分枝和根或在播种前施用到种子上，或还可施用到植物生长的土壤。

组合物可以干粉、可湿性粉剂、乳油、微乳剂、糊剂、颗粒剂、溶液、悬浮液等形式使用：组合物类型的选择取决于特定的应用。

组合物是按照已知方法制备的，例如通过用溶剂和/或固体稀释介质稀释或溶解活性物质，任选在表面活性剂的存在下进行。

二氧化硅、高岭土、膨润土、滑石、硅藻土、白云石、碳酸钙、氧化镁、白垩、粘土、合成硅酸盐、硅镁土、海泡石可用作固体惰性稀释剂或载体。

除水以外，各种溶剂如芳族溶剂(二甲苯、烷基苯的混合物)；石蜡(石油馏分)；醇类(甲醇、丙醇、丁醇、辛醇、甘油)；胺类；酰胺(N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮)；酮类(环己酮、丙酮、苯乙酮、异佛尔酮、乙基戊基酮)；酯类(乙酸异丁酯、例如通过植物油的转酯作用获得的脂肪酸甲酯)可用作液体稀释剂。

烷基磺酸、烷芳基磺酸或聚乙氧基化烷基酚或与环氧乙烷缩合的脂肪醇或聚氧乙基化脂肪酸或聚氧乙基化山梨醇酯或木质素磺酸的钠、钙、三乙醇胺盐或三乙基铵盐可用作表面活性剂。

该组合物还可含特殊的添加剂用于特殊的目的，如粘合剂如阿拉伯胶、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯。

在上述组合物中，活性物质的浓度在0.1-98％范围内变化，优选0.5-90％。

必要时还可以向组合物中添加其他相容性活性要素，如植物调节剂、抗生素、除草剂、杀虫剂、肥料，这也是本发明的对象。

下列实施例仅仅用以说明的目的，而不是限制本发明的范围。

实施例1

乙酰水杨酸铜盐的制备(化合物1号)

将3g乙酰水杨酸加到1.39g碳酸氢钠溶于15cm³水形成的溶液中。当酸完全溶解后，缓慢滴加2.07g硫酸铜于15cm³水中的溶液。3小时后，将如此获得的沉淀滤出并用己烷洗，在空气中干燥后，获得3.4g1号化合物(产率：48.4％)。1号化合物的分析组成示于表1。

实施例2

下列化合物按照与实施例1所述类似的方法制备，其分析组成示于表1：

·水杨酸的铜盐(2号化合物)

·5-氯水杨酸的铜盐(3号化合物)

·5-氯乙酰水杨酸的铜盐(4号化合物)

·5-羟基水杨酸的铜盐(5号化合物)

·6-羟基水杨酸的铜盐(6号化合物)

·3-甲基水杨酸的铜盐(7号化合物)

·4-甲氧基水杨酸的铜盐(8号化合物)

                                 表1

注：

a)通过元素分析获得的值；

b)通过重量分析获得的值；

c)预期值示于括号内。

实施例3

1号化合物与另一种杀菌化合物混合在预防性叶面施用中(温室试验)防治苹果树上的苹果黑星菌(Venturia inaequalis)的效力-表2

将在调节环境(24±1℃，70％相对湿度)中培养在瓶中的野生型苹果树的叶子用分散于含0.3％吐温20的丙酮水溶液中的混合另一种杀菌剂的1号化合物喷洒叶片两面进行处理，浓度是丙酮体积的20％。

在调节环境中保持48小时后，用苹果黑星菌孢子的水悬浮液(200000孢子/cm³)感染植物的下层和上层面。

将植物保持在21℃湿度饱和的环境中进行真菌的保温培养期，此时期结束时(14天)，按照从100(健康植物)到0(完全感染的植物)的百分数评价尺度评价杀菌活性。

根据表2所示数据，与使用Limpel公式(“The PesticideScience”(1987，第19卷，309-315页))计算出的效力相比，由1号化合物和另一种属于上述各组的另一种杀菌剂组成的混合物存在协同作用：

                         E＝X+Y-(XY/100)

其中：

-E是由混合g.x化合物X与g.y化合物Y所得混合物的预期杀菌活性，无协同作用；

-x是化合物X在g.x剂量下单独使用时的活性；

-y是化合物Y在g.y剂量下单独使用时的活性；

当杀菌活性实验值大于E值，此活性应视为协同作用。

                         表2

1号化合物在125ppm(g.x)下处理苹果黑星菌1天后的预防活性是95(x)。

实施例4

1号化合物与另一种杀菌化合物混合在预防性叶面施用中(温室试验)防治葡萄上的葡萄生单轴霉(Plasmopara viticola)的效力-表3

将在调节环境(20±1℃，70％相对湿度)中培养在瓶中的栽培品种Dolcetto葡萄藤的叶子用分散于含0.3％吐温20的丙酮水溶液中的混合另一种杀菌剂的1号化合物喷洒叶片两面进行处理，浓度是丙酮体积的10％。

在调节环境中保持24小时后，用葡萄生单轴霉孢子的水悬浮液(200000孢子/cm³)感染植物的下层面。

将植物保持在21℃湿度饱和的环境中进行真菌的保温培养期，此时期结束时(7天)，按照从100(健康植物)到0(完全感染的植物)的百分数评价尺度评价杀菌活性。

根据表3所示数据，与使用Limpel公式(“The PesticideScience”(1987，第19卷，309-315页))计算出的效力相比，由1号化合物和另一种属于上述各组的另一种杀菌剂组成的混合物存在协同作用：

                         E＝X+Y-(XY/100)

其中：

-E是由混合g.x化合物X与g.y化合物Y所得混合物的预期杀菌活性，无协同作用；

-x是化合物x在g.x剂量下单独使用时的活性；

-y是化合物Y在g.y剂量下单独使用时的活性；

当杀菌活性实验值大于E值，此活性应视为协同作用。

                         表3

1号化合物在30ppm(g.x)下处理葡萄生单轴霉1天后的预防活性是53(x)。

^*对减低敏感性的植物病原体的分离部分作用的试验。

实施例5

式(I)化合物防治葡萄上的葡萄生单轴霉的杀菌效力(田间试验)-表4、5和6

防治葡萄生单轴霉的田间效力试验使用随即区组试验方案，包括4次重复，每次重复试验6-8棵植物。

用配制成可湿性粉剂WP50的式(I)化合物或含一种或多种式(I)的盐和另一种杀菌剂的混合物(本发明的对象)喷雾处理Barbera品种的葡萄叶片两面。

试验按照对于式(I)化合物与IR6141的混合物以7天的固定周期和对于式(I)化合物与IR5885的混合物以10天的固定周期进行处理。

当观察到在未处理的空白区出现病原体时进行测量，对叶片和葡萄串的测量都进行测量。

叶片测量是通过计数每小区(总计400张叶片)100张葡萄叶并标记被病害侵袭的叶片表面的百分率来进行的。

另一方面，葡萄串测量是通过分析所有的葡萄串并研究表面的损害率来进行的。

涉及2-4号化合物与代森锰锌和王铜的田间试验比较数据提供在表4中。

                              表4

(gap/hl)＝每百升中活性要素的克数

^*＝病害发生率。

涉及1-4号化合物混合IR6141的田间试验数据示于表5，涉及1、2、4和8号化合物混合IR5885的田间试验数据示于表6。

                                   表5

(gap/hl)＝每百升中活性要素的克数

^*＝病害发生率。

                                   表6

(gap/hl)＝每百升中活性要素的克数

^*=病害发生率。