提高人工种植南方红豆杉10-DABⅢ含量的种植和采收方法

技术领域

本发明涉及一种提高人工种植南方红豆杉10-DABIII含量的种植和采收方 法，涉及一种南方红豆杉经过种植、截顶和采收得到人工栽培的红豆杉并提取 其中10-DABIII的方法，属于红豆杉的栽培技术领域。

背景技术

南方红豆杉(学名Taxus chinensis var.mairei Cheng et L.K)，又名美丽红豆 杉，为国家I级保护植物，主要产于我国长江流域以南，常生于海拔1000～1200m 以下山林中，星散分布.贵阳市主要分布在花溪、乌当、开阳、息烽。安徽省主 要分布在黄山市歙县石门乡及黄山区一带。浙江省百山祖国家级保护区内也有 广泛分布，其中庆元风景村三堆村至景宁一带最多。其为常绿乔木，20米左右， 胸径60～100mm。小枝互生，叶螺旋状着生，排成二列，条形，微弯，长1～4.5 厘米，宽2～5毫米。果实球形坚果，假种皮，种子卵圆形。雌雄异株，异花受 粉。花期3～6月，果期9～11月。散生于海拔500～3500米的山地林和山泉倾下 的悬崖中，喜阴湿冷凉气候，一般年均气温11.2℃，年降水487.9毫米左右。

南方红豆杉是中国亚热带至暖温带特有成分之一，在阔叶林中常有分布。 喜生于山脚腹地较为潮湿处。对气候适应力较强，年均温11-16℃，最低极值 可达-11℃，耐阴湿力强，要求肥力较高的黄壤，黄棕壤(酸性，微酸性土壤)， 较能耐水湿，南方红豆杉具有较强的萌芽能力，树干上多见萌芽小枝，但生长 比较缓慢，耐荫树种，喜阴湿环境。自然生长在山谷、溪边、缓坡腐殖质丰富 的酸性土壤中，中性土、钙质土也能生长。耐干旱瘠薄，不耐低洼积水。很少 有病虫害，生长缓慢，寿命长。

南方红豆杉不仅具有很高的观赏价值，还能从中分离出天然有机化合物10- 去乙酰巴卡亭III(10-DABIII)，被用于合成紫杉醇或多烯紫杉醇，其分子结构 如下：

紫杉醇和多烯紫杉醇对乳腺癌、卵巢癌、肺癌和白血病细胞等具有很强的 杀伤作用，副作用小，药效显著，是近年来发现的最为有效的抗癌药物之一， 需求量在现有的抗肿瘤药市场占据第一位。而10-DAB只能通过红豆杉天然提 取，而目前人工种植南方红豆杉10-DABIII含量很低。因此，如何通过人工种植 提高南方红豆杉10-DABIII含量便成为问题的关键。本发明利用有别于常规手段 的截顶和采收方法，有效提高了南方红豆杉中10-DABIII含量。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种能够提高人工种植的南方 红豆杉中10-DABIII含量的种植和采收方法。

按照本发明提供的技术方案，一种提高人工种植南方红豆杉10-DABIII含量 的种植和采收方法，步骤为：

(1)种植：

种子的采集：9月上旬至10月上旬收集成熟的种子，成熟的种子呈深红色； 采集种子后于水中浸泡6～8日，捣碎假种皮肉，洗净阴干，储存于室内的阴凉 干燥处；

选择育苗地：选择透光的阔叶树林或植被地区，选择土层深厚、结构疏松、 汗腐殖质多、排水良好的土壤；

种植：在选择的苗地种植经过催芽处理的红豆杉种子，在第一年2～6月播 种，每亩地种植5000～11000棵南方红豆杉种子；播种时需要平整创面，灌透床 水；种子需经过镇压，与土壤接触，再覆盖河沙，厚度为种粒的2～3倍；播种 后全面劈除林地杂草，清理枯枝落叶，清理带宽为60～80cm，幼苗出齐后，喷 洒浓度为1％～3％的波尔多液，每7～10日喷洒一次，共喷5～7次；两年生的苗 床施以腐、熟、稀人粪尿2～3次，硫酸铵3～4次，硫酸铵每次用量0.02～0.04公 斤/10m²；

(2)截顶：南方红豆杉生长至第三年2～6月截去顶端枝叶，截顶前树高为 50～70cm；至第三年9～12月进行二次截顶；

或南方红豆杉生长至第三年9～12月截去顶端枝叶，截顶前树高为50～70cm； 至第四年2～6月二次截顶；

(3)采收：生长至第四年的9～12月或第五年2～6月开始采收新生枝叶。

步骤(2)两次截顶后，南方红豆杉成长时每年立夏与立秋前后追施含氮、 磷、钾肥料，施肥前进行土壤养分检测，根据检测结果确定追施化肥各类及数 量；含氮、磷、钾元素的肥料包括氮肥、磷肥和钾肥，其中氮肥为硫酸铵，用 量为0.1～0.12公斤/10m²；钾肥为硫酸钾，用量为0.05～0.08公斤/10m²；磷肥为 磷酸钙，用量为0.03～0.08公斤/10m²。

步骤(3)采收时，当年新生枝叶的采收数量占采收量的90％～95％。

选择育苗地的条件如下：

土壤：土壤肥厚，有机质含量多，土质疏松湿润、排水良好；

地形：在非陡坡或非阳光直射的山地；

水源：水源条件充足；

交通：相对集中、便利。

在种植中需起苗时，保证根系完整，并用薄膜包装；种植要求：提苗悬空 在穴中心，一回土、二轻提苗、三踩实、四培土、五不弯根、窝根、种植深度 为原苗木地径位置加深4～5cm。

红豆杉催芽时采用层积催芽来解除南方红豆杉种子的休眠：用体积分数为 0.9～0.95的酒精浸种0.5～1h，再用体积比1∶1的煤渣擦去蜡质；用湿度为 50％～60％的湿沙拌匀，装入草袋或木箱内放入地窖；埋藏至种子20％～30％胚根 萌发时播种。

本发明具有如下优点：与普通种植采收方法比照，按照本发明的方法，南 方红豆杉中10-DABIII有显著增加，特别时新生枝叶中的10-DABIII含量增加较 为明显。采用本发明提供的方法，不仅可以有效解决10-DABIII药源短缺的问题， 而且还可以提高工业化提取10-DABIII的效率，降低紫杉醇等药物的生产成本， 减轻患者的药费负担，产生巨大的经济效益和社会效益。

具体实施方式

实施例1

(1)种植：

种子的采集：9月上旬收集成熟的种子，成熟的种子呈深红色；采集种子后 于水中浸泡6日，捣碎假种皮肉，洗净阴干，储存于室内的阴凉干燥处；

选择育苗地：选择透光的阔叶树林或植被地区，选择土层深厚、结构疏松、 汗腐殖质多、排水良好的土壤；

种植：在选择的苗地种植经过催芽处理的红豆杉种子，在2007年12月播 种，每亩地种植10300棵南方红豆杉种子；播种时需要平整创面，灌透床水； 种子需经过镇压，与土壤接触，再覆盖河沙，厚度为种粒的3倍；播种后全面 劈除林地杂草，清理枯枝落叶，清理带宽为60～80cm，幼苗出齐后，喷洒浓度 为1％的波尔多液，每7日喷洒一次，共喷5次；两年生的苗床施以腐、熟、稀 人粪尿2次，硫酸铵3次，硫酸铵每次用量0.02公斤/10m²；

(2)截顶：南方红豆杉生长至2010年9月28日截去顶端枝叶，截顶前树 高为50～70cm；至2011年2月21日进行二次截顶；

(3)采收：生长至2011年8月26日开始采收新生枝叶。

测量10-DABIII含量的方法：

将采收后的枝叶粉碎至长度为0.8cm，混匀。取500g粉碎后的枝叶，加入 体积含量为4kg80％甲醇，水浴加热搅拌提取，温度为40度，提取时间是3小 时，提取完毕后倒出提取液，过滤。第二次提取，再次加入3kg 80％甲醇，水浴 加热搅拌提取，温度为40度，提取时间1小时，倒出提取液，过滤。重复第二 次提取3次。

合并滤液，浓缩至没有甲醇，加入氯仿6.9L，分三次萃取。浓缩氯仿萃取 液获得浸膏2.65g，用HPLC方法测定浸膏中10-DAB含量为2.13％，枝叶中 10-DAB含量为1.13g/kg。

实施例2

南方红豆杉种植与采收方法、10-DABIII测量方法与实施例1相同。

2007年11月播种，每亩地播种9800棵南方红豆杉树苗，2010年2月18 日，3年生南方红豆杉10亩地第一次截顶，2011年9月19日第二次截顶，2011 年3月21日截顶采收，采收量为2.58吨枝叶，枝叶中10-DAB含量为1.08g/kg。

实施例3

南方红豆杉种植与采收方法、10-DABIII测量方法与实施例1相同。

2007年12月播种，每亩地播种8900棵红豆杉树苗，2010年9月15日，3 年生南方红豆杉10亩地第一次截顶，2011年3月16日第二次截顶，2011年9 月16日截顶采收，采收量为2.50吨枝叶，枝叶中10-DAB含量为1.05g/kg。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制 本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术 人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其 中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修 改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。