5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁在制备治疗帕金森氏病药物中的用途

技术领域

本发明涉及5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁在制备治疗帕金 森氏病药物中的用途。

背景技术

5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁 (5-(4-Hydroxy-3-methoxybenzylidene)rhodanine)是一种公知的化合 物，分子量：267.32。根据美国专利5523314和欧洲专利申请93306959.3 的披露，该类化合物及其衍生物曾被用于治疗糖尿病或者老年痴呆 (Alzheimer’s disease)。

5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁具有如下化学结构：

帕金森氏病(Parkinson’s disease，PD)又称″震颤麻痹″，巴金森氏 症或柏金逊症。是常见于老年人的慢性进行性运动障碍性疾病，最早 系统描述该病的是英国的内科医生詹母·帕金森，当时还不知道该病 应该归入哪一类疾病，称该病为“震颤麻痹”。临床表现为静止性震颤、 肌肉强直、运动迟缓和姿势反射障碍。据报道，PD在60岁以上的人 群中，发病率约为1.5％，目前美国患病人数有100万，我国的患病人 数已超过200万，仅次于糖尿病、冠心病、脑血管病的患病率。帕金 森氏病不仅发病率高，而且在发病2～8年后多出现不同程度的致残现 象，严重影响患者的生活质量，加上医疗费用，给社会和家庭带来了 精神负担和经济负担。

帕金森综合症分为以下四类：

1、帕金森病

2、继发性帕金森综合症：指外伤、中毒、药物、脑血管病、肿瘤、 脑炎等原因造成的帕金森综合症

3、遗传变性型帕金森综合症

4、帕金森叠加综合症

多年临床观察结果表明，采取不同的治疗行为，帕金森病患者病 情的变化差异十分显著：

1.在发病早期就开始接受合理治疗的患者，绝大多数能够延缓病情 的发展，病情相对稳定，生活基本能够自理。

2.虽然治疗，但时常中断的患者，大多不能很好地控制病情，病情 会出现反复及不同程度加重。

3.发展到晚期才开始治疗的患者，病情往往已很严重，现有的治疗 手段对改善病症也很有限，患者通常会出现明显的残障。

补充脑内多巴胺(DA)是目前最常用且最有效的治疗帕金森氏 病的方法。在PD早期，多巴胺(DA)单一治疗能推迟运动并发症 和运动障碍的发生，尤适用于60岁以下的患者。外源性D A不能透 过血脑屏障(BBB)，用其前体物左旋多巴通过BBB进入脑内，经 多巴脱羧酶脱羧转变成DA，从而起到补充脑内DA的作用。由于多 巴脱羧酶广泛存在于外周各脏器和血管壁，故在药物吸收和传输过程 中，大部分左旋多巴已转变成DA，刺激外周DA受体，引起多方面的 不良反应，如恶心、呕吐、厌食等消化道症状和血压降低、心律失常 等心血管症状。用于治疗帕金森氏病的其它药物还包括多巴脱羧酶抑 制剂、多巴胺受体激动剂、B型单胺氧化酶抑制剂、儿茶酚-氧位-甲基 转移酶抑制剂等，但是这些药物在临床使用过程会引起恶心、呕吐甚 至肝损伤等多种不良反应。近年来的研究显示，保护DA能神经元， 减慢或防止纹状体区DA能神经元的进行性变性的神经保护药物的开 发将在未来很长时间内成为药物治疗PD的研究热点。

左旋多巴是多巴胺的代谢前体，可以通过血脑屏障，进入基底节后 经脱羧而成多巴胺，起着补充多巴胺神经递质缺乏的作用.虽然震颤也 常有减轻，但动作过缓与僵直的改善最为显著.症状较轻的病人可以恢 复接近正常的活动，而卧床不起的病人可以下地行动.与周围脱羧酶抑 制剂卡比多巴合用，可降低左旋多巴需用的剂量，因为后者的降解代谢 被阻滞，减少不良反应(恶心，心悸，面部潮红)，使更多的左旋多巴能有效 地进入脑部.息宁有不同的卡比多巴/左旋多巴固定比例的剂型： 10/100，25/100，25/250，还有一种缓释片50/200mg剂型。治疗开始时先 用息宁，根据病人的耐受情况，每隔4～7天逐步增加剂量，直至产生最 大的效果。缓慢而小心地增加剂量，令病人在进餐时或饭后服药，可使 不良反应减轻。大多数病人需要每天总量400～1000mg的左旋多巴，每 2～5小时分次服药，每天至少需要100mg的卡比多巴来减轻周围的不 良反应。应用左旋多巴治疗时，常使剂量受到限制的是不良反应是不 自主动作(动作困难)，表现为口-面或肢体的舞蹈动作或肌张力障碍。 随着治疗时间的延长，这些动作困难出现的阈值也相应降低，即在应 用较低剂量时也会出现。息宁缓释片或司立吉林可作为有用的辅助治 疗。左旋多巴其他的不良反应包括直立性低血压、幻觉、恶梦以及偶 见的中毒性谵妄。幻觉和谵妄最常见于年老且有痴呆的病例。

金刚烷胺100～300mg/天口服，在50％早期轻度帕金森综合征病例 的治疗中有用，在疾病的后期能加强左旋多巴的作用。隐亭与培高利 特均为麦角生物碱，能直接激活基底节内的多巴胺受体。溴隐亭 5～60mg/d或培高利特0.1～5.0mg/天口服对疾病各阶段的病例都有用。 不过，很少能成功地应用溴隐亭或培高利特作为单独的治疗药物。一 些新的多巴胺受体激动剂对D2受体具有更高的特异性，例如 pramipexole与ropini-role。司立吉林是一种单胺氧化酶B抑制剂，能 抑制与脑内多巴胺降解有关的两个主要酶中之一，从而使各次左旋多 巴剂量的作用有所延长。非选择性单胺氧化酶抑制剂使A型与B型同 功酶都受到阻滞，若与奶酪同用，常可产生高血压危象(奶酪作用)；司 立吉林5～10mg/d口服不会引起高血压危象。虽然司立吉林几乎是没有 不良反应，但它可以加强左旋多巴的不良反应如动作困难，精神症状 与恶心，可能须将左旋多巴剂量降低。司立吉林作为首用治疗药物可 延迟左旋多巴的起用约1年左右。司立吉林可能对早期帕金森病病例 脑内残余的多巴胺起增强作用，或降低脑内多巴胺氧化代谢，使神经 变性过程有所减慢。

抗胆碱能药物可用于疾病早期阶段的治疗，在后期可作为左旋多 巴的辅助药物。常用的抗胆碱能药物包括苯甲托品、苯海索。具有抗 胆碱能作用的抗组胺药物(如苯海拉明25～200mg/d口服，奥芬那君 50～200mg/d口服)对治疗震颤有用。具有抗胆碱能作用的三环类抗抑郁 剂(如阿米替林10～150mg临睡时口服)往往是左旋多巴有用的辅助药 物，且有助于治疗抑郁症。

儿茶酚对甲基转移酶(COMT)抑制剂如托卡朋(tolcapone)与 entacapone，能阻滞多巴胺的降解，也可作为左旋多巴有用的辅助药物。 心得安10mg每日2次至40mg每日4次口服，偶尔对某些病例中出现 的动作性震颤或意向性震颤有用。

现有技术中未见报道5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁对帕金 森氏病有疗效。本发明人发现这种化合物具有很强的抗氧化活性，对 神经具有很强的保护作用。

发明内容

本发明提供一种新的治疗帕金森氏病的治疗方法，该方法包括向 帕金森氏病病人使用药物有效量的5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹 宁。具体而言，本发明提供一种5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁 的新的药物用途，或者5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁在制备治 疗帕金森氏病药物中的用途。所述的药物是5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲 基)罗丹宁的片剂、丸剂、膜剂、滴丸、合剂、胶囊剂、颗粒剂或者注 射剂。优选为口服。

使用美国专利5523314所披露的方法可以获得化合物5-(4-羟基-3- 甲氧基苯亚甲基)罗丹宁，该化合物具体记载在说明书实施例20当中。

本发明所述的“药学上可接受的盐”是指化合物5-(4-羟基-3-甲氧 基苯亚甲基)罗丹宁对活的生物实质上无毒的盐化合物。其典型的盐化 合物包括但不限于药学上可接受的有机酸，矿物酸、或者药学上可接 受的碱金属或者有机碱与化合物5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁 反应形成的盐。药学上可接受的矿物酸包括盐酸、磷酸、硫酸、氢溴 酸、亚磷酸等等。优选为盐酸。具体来讲，本发明所述的盐还包括5-(4- 羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁的盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸 盐、偏磷酸盐、硫酸氢盐，亚硫酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢 盐、焦磷酸盐、氢碘酸盐、氢氟酸盐，丙酸盐、富马酸盐、草酸盐、 枸橼酸盐、乳酸盐、马来酸盐等等。5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗 丹宁药学上可接受的盐优选为5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁盐 酸盐。

本发明涉及的化合物5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁及其药 学上可接受的盐制成针剂、口服剂，优选口服剂型，该口服剂型包括 片剂、胶囊剂以及缓释剂型等等公知的剂型。在制备各类剂型时，根 据本领域技术人员公知的技术可将本发明化合物或者药学上可接受的 盐与药学上可接受的载体制成药物组合物。该化合物的口服剂量优选 为5mg/kg体重-25mg/kg体重。

5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁为-个具有很强抗氧化活性 的化合物，具有很强的神经保护作用。

具体实施方式

实施例1

5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁对6-OHDA致帕金森病(PD) 大鼠模型行为学的影响

实验目的：本实验通过向SD大鼠单侧纹状体内注射6-羟基多巴胺 (6-OHDA)制备帕金森病大鼠模型。使用剂量分别为35mg/kg体重、 70mg/kg体重的5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁进行治疗，与阳 性药组(左旋多巴10mg/kg+苄丝肼2.5mg/kg)及假手术组比较，观 察药物干预的行为学变化，以评价对抗PD的大作用效果。

一、材料及方法

1.材料

1.1受试品：5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁，为黄色粉末。 以1％CMC(羧甲基纤维素钠)水助溶制成悬浮液。

1.2试剂：6羟基多巴胺(6-OHDA)，Sigma公司产品，货号H116， 批号115K4613；阿扑吗啡(Apomorphine，APO)，Sigma公司产品， 货号A4393，批号085K1223。

1.3动物：SD大鼠，雄性，体重大于180g，由北京维通利化动物 公司提供。

2.方法

2.1大鼠帕金森病(PD)模型的建立

成年雄性健康SD大鼠购入后随机分为正常对照组、假手术组及模 型模组。筛模组腹腔注射1％戊巴比妥钠(50mg/kg体重)麻醉后，严 格按照颅平位(前囟与后囟水平高度相差0.1mm以下，颅骨矢状缝两 侧旁开4mm处水平高度相差0.1mm以下)固定于大鼠脑立体定向仪上。 剪开头皮，剥离骨膜后，根据大鼠体重和头颅大小在规定范围内确定 具体坐标并标记，用牙科钻小心钻透颅骨。根据Paxinos Watson图谱， 确定右侧纹状体(CPU)坐标，行两点注射 (AP：0.5mm，ML：-2.5mm，VD：-5mm；AP：-0.5mm，ML：-4.2mm，VD：-5mm) 按确定坐标将微量注射器缓慢进针到规定深度。向CPU两点各注射 6-OHDA 15μg，2μl(溶于质量分数为0.1％抗坏血酸的生理盐水)，注 射速度为1μl/分钟，留针10分钟，缓慢退针3分钟(1mm/分钟)。假 手术组用上述相同方法向两点分别注射同体积的含0.1％抗坏血酸的生 理盐水。术后，手术各组大鼠肌肉注射青霉素，以防治感染。

2.2大鼠帕金森病(PD)模型的筛选

术后第4周开始对大鼠6-OHDA PD模型进行旋转实验筛选，APO 颈部皮下注射(1mg/kg体重)，观察其30分钟行为变化，若大鼠恒定 转向健侧，且旋转圈数＞100r/30分钟，每分钟最大旋转次数大于等于 7r/分钟，表示毁损稳定，则视为成功帕金森病(PD)大鼠模型。

2.3试验分组

筛选成功的模型进行随机分为模型组(n＝10只)，5-(4-羟基-3-甲 氧基苯亚甲基)罗丹宁剂量组1(n＝11只)，5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基) 罗丹宁剂量组2(n＝11只)，阳性药组(n＝10只)，假手术组(n＝13只)， 正常对照组(n＝12只)。

2.4药物干预

分组后第1天开始给药治疗。5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹 宁剂量组1(70mg/kg)、5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁剂量组2 (35mg/kg)，阳性药组(左旋多巴10mg/kg+苄丝肼2.5mg/kg体重) 每天分别灌胃1次，正常对照组、模型组及假手术组给予相应体积的 1％CMC水，连续2周。

2.5行为学评价

连续给药2周后开始行为学检测。

2.5.1阿扑吗啡诱导旋转试验

用阿朴吗啡(Apomorphine，APO)行大鼠(包括模型组、给药组、 假手术组)颈部皮下注射(1mg/kg体重)，观察并记录其在30分钟内 转向健侧的圈数及每分钟平均转数。

2.5.2平衡杆试验

平衡杆长105cm×宽4cm×高3cm，木杆离地80cm，两端由木架支 撑。木杆的一端为起始区，长20cm，另一段为终点区，终点区后接一 个大鼠笼，木杆下有1m2，厚12cm垫子防止大鼠摔伤。实验时，将大 鼠放在起始区面对鼠笼方向，同时开始计时，记录大鼠走过起始区的 时间(潜伏期)和大鼠走过整个平衡杆的时间，潜伏期最大允许时间 为1分钟，走过横杆最大允许时间为2分钟。大鼠先训练3次，然后 开始正式实验。

2.6统计学方法

本实验结果用X±SD表示，用SPSS软件的单因素方差分析进行 统计学分析。

二、结果

1、阿扑吗啡诱导旋转实验：与模型组相比，5-(4-羟基-3-甲氧基苯 亚甲基)罗丹宁剂量组1能显著降低阿朴吗啡诱导的转次数有减少趋 势，但35mg/kg剂量组2却略有增高。(见表1)。

2、平衡杆实验：5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁在70mg/kg 剂量组1、35mg/kg剂量组2剂量下连续给药14天，缩短6-OHDA致 PD大鼠模型过杆的潜伏期，过杆时间显著减少(P＜0.05，P＜0.01)，(见 表2，3)。

表1阿扑吗啡诱导大鼠旋转实验结果

^###P＜0.001，与假手术组比较；与模型组比较，*P＜0.05

表2各组大鼠平衡杆潜伏期实验结果

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

表3各组大鼠平衡杆过杆实验结果分析

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

本实施例采用单侧纹状体内注射6-OHDA致PD模型。并进行了2 种动物行为学检测。结果表明：

1.阿朴吗啡实验：由于患侧黑质纹状体通路损伤导致动物模型向 健侧旋转运动明显增加(P＜0.001)。经5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗 丹宁灌胃治疗14天后，其旋转次数有减少趋势。

2.平衡杆实验：模型鼠的运动始动性及运动平衡能力均明显比假 手术差(P＜0.05，P＜0.01)。经5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁两 个剂量灌胃14天后，上述表现均有改善(P＜0.05)，其中剂量组1对运 动平衡能力的作用效果最佳(P＜0.01)。阳性药也有明显改善作用 (P＜0.01)。

5-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)罗丹宁经连续灌胃给药14天后，可 以显著改善6-OHDA致PD模型大鼠运行协调性，具有较好的抗帕金 森作用。