一种神秘果树枝提取物及其在制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品中的应用

技术领域

本发明涉及天然药物化学技术领域，具体涉及一种神秘果树枝提取物及其在制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品中的应用。

背景技术

神秘果，其拉丁学名为SynsepalumdulcificumDaniell，是典型热带常绿灌木，

原产地在西非、加纳、刚果一带。20世纪60年代，周恩来总理到西非访问时，加纳共和国把神秘果作为国礼送给周总理。此后，神秘果开始在我国栽培。

专利CN102743421A公开了一种神秘果果树枝叶提取物，报道了其具有抗氧化以及抗痛风作用。但尚无具体报道称神秘果树枝的降血糖降血脂作用，更没有利用中药现代化技术制备有效部位的报道，本领域技术人员对于神秘果树枝中的降血糖、降血脂的有效部位以及有效成分还不明确，以及如何制备具有很好降血糖、降血脂效果的有效部位仍需研究探索。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术对神秘果树枝有效部位的开发不足，提供一种神秘果树枝提取物。该提取物具有非常显著的降血糖以及降血脂作用，可以用于制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品。

本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：

一种神秘果树枝提取物，首先将神秘果树枝粉碎，用有机溶剂提取得有机溶剂提取物，然后再采用超临界二氧化碳萃取方法提取得到。

优选地，所述的有机溶剂为乙醇，所述的超临界二氧化碳萃取方法为：将神秘果树枝有机溶剂提取物置于超临界二氧化碳萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为30~40兆帕，温度为40~50℃，流速为20~30升/小时，提取时间为1～4小时。

为了得到具有更好的降血糖以及降血脂效果的有效部位，所述的神秘果树枝经超临界二氧化碳萃取方法提取后，再用硅胶柱层析法富集。

优选地，所述的硅胶柱层析法包含如下步骤：首先将神秘果树枝经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物上硅胶柱，然后用体积比为99:1~93:7的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，再用体积比为88:12~90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，收集体积比为88:12~90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱部位，浓缩、干燥即得。

更优选地，所述的硅胶柱层析法包含如下步骤：首先将神秘果树枝经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物上硅胶柱，然后用体积比为93:7的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，再用体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，收集体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱部位，浓缩、干燥即得。

优选地，所述的硅胶用量为经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物重量的10~30倍；所述硅胶的目数为200~300目。

优选地，所述环己烷：丙酮混合溶剂的使用量为硅胶柱柱体积的3~8倍。

更优选地，所述的硅胶柱层析法包含如下步骤：首先将神秘果树枝经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物上装有提取物重量10~30倍的硅胶的硅胶柱，然后用体积比为99:1~93:7的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，混合溶剂的用量为硅胶柱柱体积的3~5倍；再用体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱，混合溶剂的用量为硅胶柱柱体积的5~8倍；收集体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱部位，浓缩、干燥即得。

所述的神秘果树枝提取物，在制备具有降血糖或降血脂作用的药物中的应用。

所述的神秘果树枝提取物，在制备具有降血糖或降血脂作用的保健品中的应用。

有益效果：本发明提供了一种利用中药现代化技术制备得到的一种全新的神秘果树枝提取物，实施例中的实验数据显示，其具有非常显著的降血脂以及降血糖作用。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。

实施例1

称取1kg干燥的神秘果树枝粉碎，再用5kg的乙醇加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，浓缩得神秘果树枝乙醇提取物；再将神秘果树枝乙醇提取物置于超临界CO2萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为30兆帕，温度为40℃，流速为20升/小时，提取时间为2小时，得神秘果树枝超临界CO2萃取物95.7g。

实施例2

称取1kg干燥的神秘果树枝粉碎，再用5kg的乙醇加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，浓缩得神秘果树枝乙醇提取物；再将神秘果树枝乙醇提取物置于超临界CO2萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为40兆帕，温度为50℃，流速为30升/小时，提取时间为2小时，得神秘果树枝超临界CO2萃取物90.3g。

实施例3

称取实施例1中所得的萃取物40g，用乙酸乙酯溶解后，用40g硅胶(100～200目)拌样，另取800g硅胶(200～300目)干法装柱，将样品装入柱上，先用3倍柱体积的体积比为93:7的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱；再用8倍柱体积的体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱；收集体积比为90:10的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱部位，浓缩、干燥提取物8.8g。

实施例4

称取实施例1中所得的萃取物40g，用乙酸乙酯溶解后，用40g硅胶(100～200目)拌样，另取800g硅胶(200～300目)干法装柱，将样品装入柱上，先用3倍柱体积的体积比为99:1的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱；再用8倍柱体积的体积比为88:12的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱；收集体积比为88:12的环己烷：丙酮混合溶剂洗脱部位，浓缩、干燥提取物9.6g。

实施例5降血脂实验

取SD大鼠70只，雌雄各半，分为正常组(喂普通饲料)、高脂饲料组、实验组1（实施例1制备得到的提取物）、实验组2（实施例2制备得到的提取物）、实验组3（实施例3制备得到的提取物）、实验组4（实施例4制备得到的提取物）、阳性对照组（洛伐他汀）每组各为10只，高脂饲料组、实验组、以及阳性对照组喂养高脂饲料，另外实验组1、2同时每天按20mg/kg的量喂相应实施例制备得到的提取物，实验组3、4同时每天按3mg/kg的量喂相应实施例制备得到的提取物，阳性对照组每天按3mg/kg的量喂洛伐他汀。

按组别喂养各组大鼠，自由饮水，连续给药35天后，处死动物，腹腔静脉取血，测定血脂。用酶法、沉淀法测定在全自动生化分析仪上测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量。实验结果如表1所示。

从表1中可以看出，高脂饲料组大鼠血清的TC，TG和LDL-C浓度均显著高于正常饲料组(P<0.01)，HDL-C浓度低于正常饲料组(P<0.05)说明建模成功。

实验组1、2大鼠的血清TC，TG和LDL-C浓度均明显低于高脂饲料组(P<0.01)；HDL-C的浓度明显高于高脂饲料组(P<0.05)，说明经超临界萃取得到的神秘果树枝提取物具有明显的降血脂作用。从表1中还可以看出，实验组3、4大鼠的血清TC，TG和LDL-C浓度降低得更为明显，与阳性对照药洛伐他汀相当，这也说明神秘果树枝在经超临界萃取后再通过硅胶柱层析技术后得到的神秘果树枝提取物的降血脂效果进一步提高，效果更显著。此外，从表1中还可以看出，实验组1、2的用量为20mg/kg，相比提取物来说，用量相当少了，这说明本发明提取得到了神秘果树枝具有降血脂作用的精华部位。更惊人的是实验组3、4的用量为3mg，与西药洛伐他汀用量一样，达到了少量高效的作用。

实施例6降血糖实验

取60只小鼠(7周龄雄性ICR小鼠)，体重22-25g，除10只作为正常对照组外，其余小鼠均腹腔注射100mg/kg链脲佐菌素溶液，72小时后测血糖值，11.1mmol/L以上者进行实验，随机分为5组，即：模型组和实验组1（实施例1制备得到的提取物）、实验组2（实施例2制备得到的提取物）、实验组3（实施例3制备得到的提取物）、实验组4（实施例4制备得到的提取物）。每组10只，每天灌胃给药1次（实验组1、2每天给药剂量为20mg/kg，实验组3、4每天给药剂量为3mg/kg），连续给药30d，每7d称体重1次，根据体重调整给药量；分别于第10，20，30d末次灌胃2h后(禁食12h)，小鼠尾部取血测血糖值。正常对照组及模型对照组灌胃给予等量生理盐水(10ml/kg)。实验结果如表2所述：

从表2中可以看出，模型组小鼠与正常对照组相比，血糖水平明显升高，说明链脲佐菌素造成糖尿病小鼠模型成功。实施例1、2制备的提取物在给药第10d后小鼠体内的血糖含量显著降低，在给药后20d和30d后，血糖含量进一步降低。说明实施例1、2制备的提取物具有显著的降血糖效果。实施例3、4所述的提取物是在实施例1、2经二氧化碳超临界萃取的基础上进一步用硅胶柱层析技术精制得到的提取物，从表2数据可以看出，其降血糖效果较实施例1、2制备得到的提取物进一步提高。此外，从表2中还可以看出，实施例1、2制备得到的提取物的用量为20mg/kg，相比提取物来说，用量相当少了，说明本发明提取得到了神秘果树枝具有降血糖作用的精华部位。更惊人的是实验组3、4的用量为3mg，与西药洛伐他汀用量一样，这说明本发明提取得到了神秘树枝提取物达到了少量高效的作用。