原儿茶醛在治疗男性不育症及体外处理精子中的应用

技术领域

本发明涉及一种原儿茶醛在治疗男性不育症及体外处理精子中的应用，特别是原儿茶醛在治疗由环磷酰胺导致的男性不育症中的应用，以及原儿茶醛用于防治环磷酰胺导致的男性生殖损伤的应用，属于治疗男性不育症及体外处理精子技术领域。

背景技术

随着工业化的发展、环境污染的加剧以及社会压力的增加，男性精液质量逐年下降，男性不育症患者明显增加。按世界卫生组织（WorldHealthOrganization，WHO）标准，育龄夫妇婚后同居一年以上，未采用任何避孕措施，由男方原因导致女方不孕者，称为男性不育症。男性不育症的治疗主要包括人类辅助生殖技术、药物治疗提高精子质量，以及手术治疗矫正生理结构异常。引起男性不育症的病因十分复杂，目前尚未找到导致男性不育症的确切病因，所以对男性不育症主要是经验性药物治疗。临床常用的药物治疗方式有：抗氧化治疗，包括常用的维生素E、辅酶Q10等；激素治疗，包括抗雌激素、促性腺激素、促性腺激素释放激素、雄激素、芳香化酶抑制药；其他药物，包括肉毒碱等。但这些药物都有各自的局限性，如价格昂贵、副反应多等，故研究开发新的男性不育症治疗药物具有重要的临床意义和广泛的应用前景。

人类辅助生殖技术可用于治疗男性不育症以及女性不孕症，包括人工授精和体外受精-胚胎移植技术，两种技术都需要对男性精液进行体外处理优选精子。精液体外处理优选精子是人类辅助生殖技术治疗中的常规必需步骤，目的是获得没有精浆、细胞碎片及病原微生物污染的精子悬液，回收足够数量具有正常形态和功能的精子。精液处理过程中需加入精子营养液以维持精子活力和功能。目前，背景技术所用的精子营养液仍有待改进，我国所用的大多为进口产品，价格昂贵。开发能提高精子活力的精子营养液成分对于精子体外优选和提高辅助生殖临床妊娠率具有关键作用和重要意义。

原儿茶醛（protocatechuicaldehyde，PAL）学名3，4-二羟基苯甲醛，是丹参水溶性成分丹酚酸B降解的主要产物之一，存在于唇形科植物丹参等植物中，也存在于鳞始蕨科植物乌蕨的叶中，冬青科植物四季青叶中，来源十分广泛。研究表明，原儿茶醛具有非常广泛的药理活性，包括抗动脉粥样硬化、保护心肌、抗血栓形成、神经保护、抗脓血、抗病毒、抗纤维化等方面。迄今为止，有关原儿茶醛在治疗男性不育症和体外处理精子中的用途还没有文献报道。

发明内容

本发明目的是提供一种原儿茶醛在治疗男性不育症及体外处理精子中的应用，解决背景技术中存在的上述问题。

本发明的技术方案是：

原儿茶醛在治疗男性不育症及体外处理精子中的应用，将原儿茶醛用于治疗男性不育症及体外处理精子。

所述原儿茶醛用于治疗男性不育症，原儿茶醛水溶液稳定性较差，使用固体制剂，如片剂、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊、滴丸等。

用药剂量：根据动物实验换算，推荐剂量为4.4mg/kg（约300mg/d）。

用药方法：口服。

用药疗程：推荐1-2个生精周期，即3-6个月。

可单独使用，也可与其他药物合用。

所述原儿茶醛用于体外处理精子，原儿茶醛水溶液稳定性较差，制成粉针剂，现用现配，用少量生理盐水溶解后，加入精子营养液中使用，推荐浓度范围为0.1mg/ml-1mg/ml。

本发明通过试验证明，原儿茶醛能增加环磷酰胺导致的雄性不育小鼠的睾丸指数及附睾指数，提高精子核成熟度，保护睾丸组织形态正常，增加睾丸中SOD活性，提高睾丸中DJ-1蛋白含量。原儿茶醛具有治疗男性不育症的药理活性。

本发明通过体外实验证明，原儿茶醛与精子在体外孵育后，能显著提高精子存活率及精子膜完整性，在体外处理精子方面有一定的应用前景。

男性不育症的治疗主要包括药物治疗和人类辅助生殖技术。男性不育症的治疗药物种类有限，亟需开发新的治疗药物。人类辅助生殖技术中必需对精子进行体外处理，其所需的精子营养液尚有待改善。本发明发现，原儿茶醛可用于男性不育症的治疗和精子体外处理，并具有出人意料的技术效果。

本发明中男性不育症的诱导剂环磷酰胺是临床上常用的抗肿瘤药物及免疫抑制剂，效果好且价格便宜，但环磷酰胺具有明显的男性生殖毒性，很大程度上限制了其应用。本发明表明，原儿茶醛也可以用于防治环磷酰胺导致的男性生殖损伤，从而推广环磷酰胺在临床上的使用，也可为患者减轻经济负担。

原儿茶醛治疗男性不育症的优点和有益效果：

对于男性不育症，目前临床常用的药物治疗方式有：激素治疗，包括抗雌激素、促性腺激素、促性腺激素释放激素、雄激素、芳香化酶抑制药；抗氧化治疗，包括常用的维生素E、辅酶Q10等；其他药物，包括肉毒碱等。

（一）激素治疗：抗雌激素疗效并不肯定，不适合长期治疗；促性腺激素的疗效有限，应用较少；促性腺激素释放激素费用较高，疗效欠佳，一般不推荐使用；雄激素治疗对妊娠率并无明显改善；芳香化酶抑制药不能改善精液质量，而且价格昂贵，故临床较少使用。由此可见，激素治疗在临床上并不常用，且价格昂贵；而原儿茶醛来源丰富，故价格相对低廉，可推广使用。

（二）抗氧化治疗：维生素E疗效较明确，其作用机制主要是抗氧化应激，维生素E不溶于水，制剂中含有食用油，治疗男性不育症长期服用维生素E制剂可能导致患者脂肪摄入增多，从而引发相关疾病，如血脂异常等；而原儿茶醛水溶性好，不会增加患者脂肪摄入量。辅酶Q10（400mg/d，6个月）可改善患者精液质量，按药品价格，患者每日费用约12元，改善精液质量（6个月）费用约2160元；而原儿茶醛价格较低廉。维生素E和辅酶Q10的作用机制是抗氧化，而原儿茶醛除了能对抗氧化应激外，还有其他作用机制（增加睾丸DJ-1蛋白含量）。

（三）其他：肉毒碱目前应用较广泛，肉毒碱治疗男性不育症常用剂量为2-3g/d，参考药品价格，患者每日费用22-33元，1个疗程（3个月）治疗费用1980-2970元，2个疗程（6个月）治疗费用3960-5940元，费用相对较高；而原儿茶醛来源丰富，而且每日用量少（300mg/d），故治疗费用比肉毒碱低。肉毒碱的作用机制主要是抗氧化，而原儿茶醛除了能对抗氧化应激外，还有其他作用机制（增加睾丸DJ-1蛋白含量）。综上所述，目前临床治疗男性不育症应用较多的药物是肉毒碱和维生素E，二者的主要作用机制是抗氧化应激，而原儿茶醛除具有抗氧化应激作用外，还能提高睾丸DJ-1蛋白含量，在治疗男性不育症机制上优于肉毒碱和维生素E。因此，我们认为，原儿茶醛在临床上可单独使用治疗男性不育症，也可与肉毒碱和维生素E联合使用。

原儿茶醛体外处理精子的优点和有益效果：

目前常用的精子营养液有Ham’s-F10、Earle’s、HTF等，其主要成分均是各种无机盐与氨基酸，没有添加其他成分。在精子营养液中加入原儿茶醛，可发挥其抗氧化应激作用，清除精子体外处理过程中产生的氧自由基，从而保护精子形态和功能，比单独应用精子营养液效果更加。此外，原儿茶醛价格低廉，不会增加体外处理精子的操作成本，而且使用方便（直接加入营养液中即可），不会明显增加操作步骤和时间。

附图说明

图1为本发明原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠的睾丸形态学的影响（×400）；

图2为本发明原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠的睾丸组织SOD活性的影响（±S，n=10）；

图3为本发明原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠的睾丸DJ-1蛋白表达的影响（±S，n=3）。

具体实施方式

以下结合附图，通过实例对本发明作进一步说明。

原儿茶醛在治疗男性不育症及体外处理精子中的应用，将原儿茶醛用于治疗男性不育症及体外处理精子。

所述原儿茶醛用于治疗男性不育症，使用固体制剂；

用药剂量：4.4mg/kg（约300mg/d）；

用药方法：口服。

用药疗程：1-2个生精周期，即3-6个月。

可单独使用，也可与其它药物合用。

所述原儿茶醛用于体外处理精子，制成粉针剂，现用现配，用少量生理盐水溶解后，加入精子营养液中使用，浓度为0.1mg/ml-1mg/ml。

本发明通过试验证明，原儿茶醛能增加环磷酰胺导致的雄性不育小鼠的睾丸指数及附睾指数，提高精子核成熟度，保护睾丸组织形态正常，增加睾丸中SOD活性，提高睾丸中DJ-1蛋白含量。原儿茶醛具有治疗男性不育症的药理活性。

本发明通过体外实验证明，原儿茶醛与精子在体外孵育后，能显著提高精子存活率及精子膜完整性，在体外处理精子方面有一定的应用前景。

男性不育症的治疗主要包括药物治疗和人类辅助生殖技术。男性不育症的治疗药物种类有限，亟需开发新的治疗药物。人类辅助生殖技术中必需对精子进行体外处理，其所需的精子营养液尚有待改善。本发明发现，原儿茶醛可用于男性不育症的治疗和精子体外处理，并具有出人意料的技术效果。

具体试验如下：

1实验材料

1.1主要药物与试剂

原儿茶醛，北京百灵威科技有限公司，产品批号：LC70N14；注射用环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司，产品批号：13052125；苯胺蓝，北京雷根生物技术有限公司，产品批号：0409A15；伊红，北京雷根生物技术有限公司，产品批号：0409A15；DJ-1抗体，美国santacruze；β-actin抗体，沈阳万类生物技术有限公司；HRP标记的山羊抗兔二抗，北京中杉金桥生物技术有限公司；ECL超敏发光液、SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒，北京索莱宝科技有限公司；SOD试剂盒，南京建成生物工程研究所。

1.2仪器

XL90低温离心机（德国Beckman产品），MK3酶标仪（美国Thermo产品），IX83显微镜（日本OLYMPUS产品）；电泳仪、转膜仪、凝胶成像系统（美国bio-rad产品）。

1.3动物

雄性昆明种小鼠，6-7周龄，由华北理工大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（冀）2010-0038。在恒温（21~23℃）、恒湿（45%~65%）、各12h明暗周期条件下饲养，自由进食和饮水。

实验方法

2.1整体实验

2.1.1小鼠的分组和给药

40只小鼠随机分为4组，分别为：对照组、模型组及原儿茶醛低、高剂量组。模型组及原儿茶醛低、高剂量组腹腔注射环磷酰胺溶液60mg/kg/d，连续5天，对照组腹腔注射生理盐水；同时原儿茶醛低、高剂量组灌胃给予10、40mg/kg/d的原儿茶醛溶液，对照组及模型组灌胃给予等量生理盐水，共35天。

2.1.2小鼠睾丸及附睾指数测定

末次给药24h后，将小鼠称重并处死，迅速摘取小鼠双侧睾丸及附睾，仔细剔除周围脂肪组织及筋膜组织，称重，计算小鼠睾丸及附睾指数。睾丸指数=睾丸重/小鼠体重，附睾指数=附睾重/小鼠体重。

2.1.3小鼠精子核成熟度评价

称取0.05g苯胺蓝，加入20ml无水乙醇和80ml纯水溶解，滤纸过滤，备用。将小鼠双侧附睾置于37℃预温的生理盐水中，洗去毛发和血液，放入盛有1ml生理盐水的小烧杯中，用眼科剪将附睾剪碎，静止3-5min，轻轻摇动。用四层擦镜纸过滤，吸滤液涂片、干燥，无水乙醇固定10min，干燥，苯胺蓝染色7min，加盖玻片，干燥后光镜400×观察，成熟精子头部着色浅，非成熟精子头部为深蓝色。计数200个精子中成熟精子的百分率。

2.1.4小鼠睾丸形态学观察

取小鼠左侧睾丸于10%中性甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，常规HE染色。显微镜下观察并拍照。

2.1.5小鼠睾丸SOD含量测定

小鼠睾丸组织剪碎，于生理盐水中匀浆，3000rpm4℃离心10min，取上清，严格按照试剂盒说明书测定小鼠睾丸组织中SOD活性及蛋白含量。

2.1.6小鼠睾丸DJ-1蛋白检测

小鼠睾丸组织剪碎，于RIPA裂解液中匀浆，12000rpm4℃离心20min，取上清，严格按照试剂盒说明书测定小鼠睾丸组织总蛋白含量，确定蛋白上样量。

按照试剂盒说明书配置凝胶，蛋白样品加入5×上样缓冲液，100℃煮沸5min，使蛋白质变性。按蛋白定量结果上样，50V恒压电泳0.5h，待蛋白进入浓缩胶后改变电压，100V恒压电泳2h。

电泳结束后将凝胶置于转膜液中平衡30min，PVDF膜在甲醇中活化1min，按照“膜正胶负”原则将胶和PVDF膜置于转膜装置中。转膜时使用200mA恒流电泳40min，将样品蛋白转移到PVDF膜上。

转膜结束后将PVDF膜置于5%脱脂奶粉中封闭3h。

加入DJ-1抗体（兔源，1：500稀释），4℃孵育过夜。用TBST漂洗，10min×3，加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG（1：2000稀释），37℃孵育60min。再用TBST漂洗，10min×3。

加入ECL发光液，反应5min，凝胶成像系统成像分析。

2.2体外实验

2.2.1精子悬液的制备：取小鼠双侧附睾，置于37℃预温的生理盐水中，洗去毛发和血液，将附睾放入成有1.5ml生理盐水的EP管中，眼科剪剪碎，待精子游离后，将上清液用4层擦镜纸过滤，计数板计数，细胞浓度调至2×10⁷/ml，37℃备用。

2.2.2伊红染色检测精子存活率：称取0.5g伊红Y，加入100ml生理盐水，充分溶解，过滤。将精子悬液平均分为4组，对照组加入生理盐水，原儿茶醛低、中、高浓度组加入原儿茶醛，使其浓度分别为0.01、0.1、1mg/ml，37℃水浴孵育0.5h。取处理后的精子悬液与伊红溶液各1滴，混匀，滴加于载玻片上，加盖玻片，放置30~60s，光镜400×观察，死精子头部被染色呈粉红色，活精子不被染色。计数200个精子，计算精子存活率。

2.2.3精子低渗膨胀（hypo-osmoticswelling,HOS）实验检测精子膜的完整性：称取0.3625g柠檬酸钠，0.675g果糖加纯水至50ml，配制成离子强度0.15，渗透压150mOsm的低渗液。将精子悬液平均分为4组，对照组加入生理盐水，原儿茶醛低、中、高浓度组加入原儿茶醛，使其浓度分别为0.01、0.1、1mg/ml，每组加入低渗液0.8ml，37℃水浴0.5h。水浴后吸取沉淀物滴在清洁载玻片上，加盖玻片湿片封片，光镜400×观察，精子尾部形状发生变化的为肿胀精子，计数200个精子中的尾部肿胀精子数为总膨胀率。

2.3数据处理

实验数据均以±s表示，用ANOVA进行统计学检验，组间比较P<0.05视为差异有统计学意义。

实验结果与讨论

3.1原儿茶醛对小鼠睾丸指数、附睾指数及精子核成熟度的影响

模型组小鼠睾丸指数、附睾指数明显降低（P＜0.01），而原儿茶醛能明显增加小鼠的睾丸指数及附睾指数（P＜0.05）。此外模型组小鼠精子核成熟度显著下降（P＜0.01），原儿茶醛能明显提高小鼠精子核成熟度（P＜0.01），结果详见表1。

睾丸是精子发生的重要器官，附睾是精子成熟的场所，腹腔注射环磷酰胺后小鼠睾丸指数及附睾指数降低，说明小鼠睾丸及附睾受到损伤，提示小鼠精子发生过程受损、精子成熟度降低；原儿茶醛给药后小鼠睾丸及附睾指数均增加，说明原儿茶醛能促进受损睾丸及附睾的修复。

精子发生过程中，精核DNA结合的蛋白会经历从组蛋白到鱼精蛋白的自然成熟过程，该过称为精子核蛋白组型转换，这种组型转换具有重要的生理意义。核蛋白组型转换异常，则不成熟精子增多，会产生大量的氧自由基，破坏精子膜，使精子膜通透性改变，从而引发精子死亡，进而影响男性生育力，也会造成受孕的胚胎流产。苯胺蓝染色实验显示，模型组小鼠精子核成熟度明显降低，提示环磷酰胺可导致精子核蛋白组型转换异常，进而可能使小鼠生育力降低；而原儿茶醛能提高小鼠精子核成熟度，提示原儿茶醛能提高雄性小鼠的生育力。

3.2原儿茶醛对小鼠睾丸形态学的影响

小鼠睾丸的组织学检测（参照图1）显示，模型组小鼠生精小管上皮变薄，管腔内径增大，生精细胞排列紊乱、生精细胞层数减少，管腔内精子减少，生精小管间隙明显增加；原儿茶醛高剂量组小鼠睾丸形态与正常组相似，各生精小管间排列紧密，生精小管生精上细胞层数明显增多，各期生精细胞排列整齐紧密有序，管腔可见较多的精子，提示原儿茶醛能改善和恢复生精上皮损伤，使生精小管结构恢复正常，从而使精子发生过程恢复正常。

图1为原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠的睾丸形态学的影响（×400），图中：a:正常组，b:模型组，c:原儿茶醛低剂量组（10mg/kg），d:原儿茶醛高剂量组（40mg/kg）。

3.3原儿茶醛对小鼠睾丸组织SOD活性的影响

与正常组相比，模型组小鼠睾丸组织SOD活性明显降低（P＜0.01），原儿茶醛高剂量组小鼠睾丸组织SOD的活性显著增加（P＜0.05，参照图2）。

图2为原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠睾丸组织SOD活性的影响（±S，n=10），图中：与正常对照组相比，^##P<0.01；与模型组相比，^*P<0.05。

有研究认为,环磷酰胺致生精功能损害的机制可能是环磷酰胺经肝微粒体P450酶系代谢生成有毒的亲电子物质，这些亲电子产物导致自由基清除酶活性下降，造成自由基蓄积，影响类固醇激素合成酶的活性，并发生脂质过氧化反应，使生物膜结构破坏，造成生殖细胞损伤，使精子微环境发生改变。SOD是细胞清除超氧阴离子自由基及过氧化氢等氧自由基的特异性酶。本实验中模型组小鼠睾九组织SOD活性明显下降，提示模型组小鼠睾丸受到氧化应激损伤，从而影响精子发生过程及精子功能。原儿茶醛能提高小鼠睾丸组织SOD活性，使睾丸组织中氧化应激水平降低，从而恢复小鼠的生精功能。

3.4原儿茶醛对小鼠睾丸组织DJ-1蛋白表达的影响

与正常组相比，模型组小鼠睾丸组织DJ-1表达明显降低（P＜0.01），原儿茶醛低、高剂量组小鼠睾丸组织DJ-1表达显著增加（P＜0.05，参照图3）。

图3为原儿茶醛对环磷酰胺致雄性不育小鼠睾丸组织DJ-1表达的影响（±S，n=3），图中：与正常对照组相比，^##P<0.01；与模型组相比，^*P<0.05，^**P<0.01。

DJ-1蛋白具有明显的抗氧化应激功能，在雄性生殖系统高度表达，在睾丸各期生精细胞及间质细胞均有表达。大量文献表明，DJ-1蛋白与生殖毒素导致的雄性动物不育密切相关，也有文献证明DJ-1蛋白与人类弱精症相关。本发明发现，环磷酰胺导致小鼠睾丸组织DJ-1蛋白含量明显降低，这会导致DJ-1蛋白的抗氧化应激功能减弱，进而使睾丸组织氧化应激水平增加，从而影响精子发生过程。而原儿茶醛能提高小鼠睾丸组织DJ-1蛋白含量，从而对抗睾丸组织氧化应激，使精子发生过程恢复正常，进而提高小鼠生育力。

3.4原儿茶醛体外孵育对精子存活率的影响

生理盐水与精子悬液（对照组）孵育0.5h后精子存活率为21.58%±5.98%，0.01、0.1、1mg/ml原儿茶醛与精子悬液孵育，均可显著提高精子存活率，结果见表2。

精子存活是精子执行功能活动的基础，无论在体内或体外，精子必须存活一定时间才能进入超激活运动状态、经历获能等受精前生理变化。本研究显示，原儿茶醛与小鼠精子孵育后，可显著提高小鼠精子的体外存活率，提示原儿茶醛可提高精子功能。

3.5原儿茶醛体外孵育对精子膜完整性的影响

对照组精子总膨胀率为20.90%±3.38%，0.01、0.1、1mg/ml原儿茶醛与精子悬液孵育，可显著提高精子总膨胀率，结果见表3。

精子尾是精子的运动器官，其功能好坏直接影响到精子的活动力。HOS是测定精子尾膜完整性和功能的简易方法。精子尾部比头部结构疏松，故对低渗十分敏感，在低渗环境可呈现各种类型的肿胀。发生肿胀是精子膜正常的表现，故临床上多以此评价精子的膜功能。本研究显示，原儿茶醛与小鼠精子孵育后，可显著提高膨胀精子的百分数，提示原儿茶醛在体外可保护精子膜完整性，提高精子膜功能。

原儿茶醛治疗男性不育症的优点和有益效果：

对于男性不育症，目前临床常用的药物治疗方式有：激素治疗，包括抗雌激素、促性腺激素、促性腺激素释放激素、雄激素、芳香化酶抑制药；抗氧化治疗，包括常用的维生素E、辅酶Q10等；其他药物，包括肉毒碱等。

（一）激素治疗：抗雌激素疗效并不肯定，不适合长期治疗；促性腺激素的疗效有限，应用较少；促性腺激素释放激素费用较高，疗效欠佳，一般不推荐使用；雄激素治疗对妊娠率并无明显改善；芳香化酶抑制药不能改善精液质量，而且价格昂贵，故临床较少使用。由此可见，激素治疗在临床上并不常用，且价格昂贵；而原儿茶醛来源丰富，故价格相对低廉，可推广使用。

（二）抗氧化治疗：维生素E疗效较明确，其作用机制主要是抗氧化应激，维生素E不溶于水，制剂中含有食用油，治疗男性不育症长期服用维生素E制剂可能导致患者脂肪摄入增多，从而引发相关疾病，如血脂异常等；而原儿茶醛水溶性好，不会增加患者脂肪摄入量。辅酶Q10（400mg/d，6个月）可改善患者精液质量，按药品价格，患者每日费用约12元，改善精液质量（6个月）费用约2160元；而原儿茶醛价格较低廉。维生素E和辅酶Q10的作用机制是抗氧化，而原儿茶醛除了能对抗氧化应激外，还有其他作用机制（增加睾丸DJ-1蛋白含量）。

（三）其他：肉毒碱目前应用较广泛，肉毒碱治疗男性不育症常用剂量为2-3g/d，参考药品价格，患者每日费用22-33元，1个疗程（3个月）治疗费用1980-2970元，2个疗程（6个月）治疗费用3960-5940元，费用相对较高；而原儿茶醛来源丰富，而且每日用量少（300mg/d），故治疗费用比肉毒碱低。肉毒碱的作用机制主要是抗氧化，而原儿茶醛除了能对抗氧化应激外，还有其他作用机制（增加睾丸DJ-1蛋白含量）。

综上所述，目前临床治疗男性不育症应用较多的药物是肉毒碱和维生素E，二者主要的作用机制是抗氧化应激，原儿茶醛除具有抗氧化应激作用外，还能提高睾丸DJ-1蛋白含量，在治疗男性不育症机制上优于肉毒碱和维生素E。因此，我们认为，原儿茶醛在临床上可单独用药治疗男性不育症，也可与肉毒碱和维生素E联合使用。

原儿茶醛体外处理精子的优点和有益效果：

目前常用的精子营养液有Ham’s-F10、Earle’s、HTF等，其主要成分均是各种无机盐与氨基酸，没有添加其他成分。在精子营养液中加入原儿茶醛，可发挥其抗氧化应激作用，清除精子体外处理过程中产生的氧自由基，从而保护精子形态和功能，比单独应用精子营养液效果更加。此外，原儿茶醛价格低廉，不会增加体外处理精子的操作成本，而且使用方便（直接加入营养液中即可），不会明显增加操作步骤和时间。