公开/公告号CN105866111A
专利类型发明专利
公开/公告日2016-08-17
原文格式PDF
申请/专利权人 北京倍肯恒业科技发展股份有限公司;
申请/专利号CN201610186016.5
申请日2016-03-29
分类号G01N21/78(20060101);G01N21/17(20060101);G01N1/28(20060101);G01N1/38(20060101);
代理机构11279 北京中誉威圣知识产权代理有限公司;
代理人蒋常雪
地址 102200 北京市昌平区科技园区兴昌路1号
入库时间 2023-06-19 00:17:55
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2018-05-08
授权
授权
2016-09-14
实质审查的生效 IPC(主分类):G01N21/78 申请日:20160329
实质审查的生效
2016-08-17
公开
公开
技术领域
本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测法及检测卡研制方法。
背景技术
近年来，随着百姓经济条件改善和健康意识提升，保健食品的市场前景一片大好。但是，不法商贩为了追求所谓的疗效，从而谋求巨额利润，往往在宣传为纯中药制剂的保健食品中违法添加化学成分。
目前，市场上常见的降压类保健产品多数被宣传为茶饮或纯中药制剂，但是不法商贩为在短期内达到降低血压的目的，部分产品被人为地添加钙拮抗剂硝苯地平。
硝苯地平，化学名为2,6-二甲基-4-（2-硝基苯基）-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸二甲酯，分子式为C17H18N2O6。硝苯地平是一种钙通道阻滞药，为黄色结晶性粉末；由于它能阻滞细胞膜慢通道，阻止钙离子跨膜流入细胞内，并阻止钙离子从细胞内贮库释放，使细胞处于缺钙状态，故又称为慢通道阻滞剂。硝苯地平用于治疗各类高血压及顽固性充血性心衰，也常用于预防或治疗心绞痛。本药主要损害心血管系统、消化系统。目前已经多次在保健食品中检出硝苯地平，在保健食品中添加化学成分硝苯地平，消费者在不知情的情况下，长期服用含有硝苯地平的降压类保健食品，针对患有冠心病、心绞痛或心肌梗塞的高血压患者持续多次服用后，易引起心悸、窦性心动过速、舌根麻木、口干、发汗、头痛、恶心、食欲不振等不良反应。因此，及时检测降压类保健食品中是否还有化学成分硝苯地平及其含量，对于维护消费者身心健康、打击不法商贩、维护市场秩序具有重要意义。
目前检测硝苯地平的方法主要包括高效液相色谱法、液-质联用法、薄层色谱法、质谱法，这些方法存在的共同问题是检测耗时长、操作复杂、对检测人员专业素质要求高，因而推广应用困难，应用范围受到局限。市面上针对降压类保健食品中化学成分硝苯地平的快速检测方法较少，只有二氢吡啶类快筛试剂盒可以进行硝苯地平的快速检测，但该快筛试剂盒只能进行定性检测，不能进行定量检测。试纸法适用于保健食品的现场快速检测化学成分硝苯地平。
而且目前在对硝苯地平实施检测前，样品前处理过程复杂繁琐。基本过程是：取硝苯地平片2片，去糖衣研细，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声2min使其溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，以0.22um滤膜过滤，精密量取续滤液3ml，置于10ml量瓶中，加流动相至刻度，作为样品前处理液，其样品去糖衣的过程相当费时，一颗含糖衣的片剂去糖衣过程约需要30分钟以上。
食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪：简称为手持式检测仪，利用反射光度法与显色物跟检测成分浓度呈正比的原理，通过内部公式计算得到检测成分的浓度数值的仪器。
发明内容
为了解决现有的针对降压类保健食品是否含有化学成分硝苯地平的检测方法存在的误检漏检、只能定性检测、检测成本高、耗时长、对人员专业素质要求高及样品前处理复杂繁琐等问题，本发明提供一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测法及检测卡研制方法。利用所述检测卡，依据所述检测方法，可现场快速检测降压类保健食品中硝苯地平的含量；大幅度降低了误检与漏检率；硝苯地平检测试纸对应标准色阶图谱可定性，配合手持金标检测仪可以进行定量分析；由于其便携、操作简单等特点，更适合现场快速对降压类保健食品非法掺入的化学药物硝苯地平进行鉴别检测，并且对检测人员的专业素质要求不高，待检样品的前处理过程也得到大幅简化。
为实现上述目标，本发明采用以下技术方案：
1、反应原理
硝苯地平（富含吡啶环的六元环化合物）溶于丙酮后与氢氧化钠反应，生成橙红色的络合物，如图1所示。硝苯地平含量浓度与显色深度成正比，制备标准色阶图进行对照即可目测进行定性对比，又可配合手持式金标显色仪依据反射光度法原理可进行定量检测。
>、检测方法
一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测方法，所述方法首先用提取剂A和提取液B浸泡待测样品，振荡后静置提取硝苯地平；其次，取浸泡液用微孔滤膜进行过滤；第三，取滤液若干，加入等体积的样品稀释液C，得到待检样品处理液；第四，取70微升待检样品处理液滴加到硝苯地平检测卡上，观察试纸颜色的变化，若试纸呈现黄色或橙红色，则初步证明待测样品中含有硝苯地平，可与标准色阶图谱进行对比定性；最后，配合手持式金标显色仪可进行定量检测。所述方法适合现场快速检测降压类保健食品中化学成分硝苯地平。
所述提取剂A为活性炭、聚酰胺粉、羟基磷灰石混合物，各组分的质量比为8:1:1，提取液B是浓度为80～95%的丙酮，样品稀释液C是浓度为95%的乙醇。
所述方法包括以下步骤：
1）待测样品前处理：针对两类待测样品分别进行前处理操作，制备待检样品处理液；
2）定性检测：取70微升待检样品处理液滴到硝苯地平检测卡上，若试纸呈现黄色或橙红色，则初步证明待测样品中含有硝苯地平，可与标准色阶图谱进行对比定性；
3）定量检测：在15分钟定性检测后，将检测卡放置于食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪中检测，利用反射光度法原理，读取样品中硝苯地平对应的浓度。
所述两类待测样品分别是指茶叶类降压保健饮品和胶囊类降压保健食品。
针对茶叶类降压保健饮品的前处理方法是：准确称取0.5g样品于5 ml试管中，加入0.1g提取剂A和1.5ml提取液B，震荡摇匀2分钟，静置10分钟，用0.45um微孔滤膜过滤后，取0.25 ml滤液加入样品稀释液C0.25ml，即为待检样品处理液；
针对胶囊类降压保健食品的前处理方法是：取1粒胶囊内容物于试管中，加入0.1g提取剂A和1.5 ml提取液B，震荡摇匀2分钟，静置10分钟，用0.45um微孔滤膜过滤后，取0.25 ml滤液加入样品稀释液C0.25 ml，即为待检样品处理液。
一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测卡研制方法，包括以下步骤：
1）制备试纸基材：以中性滤纸作为硝苯地平检测试纸的基材；
2）制备显色液：分别制备试剂显色液1和试剂显色液2；
3）浸泡试纸基材：首先，将硝苯地平检测试纸基材放入试剂显色液1中浸泡10分钟；其次，将硝苯地平检测试纸基材放在温度为37摄氏度的干燥器中，烘干20分钟后晾凉；最后，将硝苯地平检测试纸基材放入试剂显色液2中浸泡5分钟；
4）制备检测试纸：将浸泡后的硝苯地平检测试纸基材放在温度为-55摄氏度低温真空干燥箱中干燥3小时，得到硝苯地平检测试纸；
5）制备检测卡：将检测试纸裁剪成条状，制作检测卡。
所述显色液1的组分为：氢氧化钠（1～10%）和烷基糖苷（APG0810）（5～20%）的混合溶液组成；各组分的体积比是10:1。
所述显色液2的组分为：碳酸氢钠（1～10%）和脂肪醇醚硫酸盐（1～10%）的混合溶液组成；各组分的体积比是2:1。
所述硝苯地平检测卡的检出限为2.5mg/g，检测范围为1.6-7.5mg/g；所述硝苯地平检测卡与所述食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪相配合可进行硝苯地平定量检测。
本发明的优点和有益效果为：
1）快速检测：为了弥补高端仪器在检测降压类保健食品中化学成分硝苯地平时成本高、耗时较长、对检测人员素质要求高等缺点，本发明研制了硝苯地平快速检测卡，可现场快速检测降压类保健食品中化学成分硝苯地平，检测时间仅为15分钟，填补了降压类保健食品快速检测方法的空白；
2）简化了降压类保健食品的样品前处理过程：由于降压类的保健食品样品中分别富含茶多酚、叶绿素或是其他成分的配药，有必要对样品色素以及干扰成分进行相关的前处理，避免进行试纸检测时影响其快检试纸的检测结果；本发明利用物理吸附以及萃取的原理将检测干扰因子去除，其中物理吸附吸收相关干扰因子，溶液萃取将提取液中的待检成分分离出来，其样品前处理过程不超过30min，同时将硝苯地平成分用提取液萃取出来进行后期检测；
3）定量检测：硝苯地平检测卡配合食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪进行读数，可进行定量检测。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1为硝苯地平溶于丙酮后与氢氧化钠反应，生成橙红色络合物的原理图。
图中，1为橙红色络合物。
图2为本发明所述一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测方法的流程图。
图3为本发明所述一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测方法的操作示意图。
图中，1是手柄，2是硝苯地平检测试纸，3是PVC板，4是滴加待检样品处理液。
图4为本发明所述一种降压类保健食品中硝苯地平快速检测卡研制方法的流程图。
具体实施方式
实施例1：茶类降压保健饮品中硝苯地平快速检测方法
参见图2、图3，检测过程如下：
1）待测样品前处理：准确称取0.5g样品于5 ml试管中，加入0.1g提取剂A和1.5ml提取液B，震荡摇匀2分钟，静置10分钟，用0.45um微孔滤膜过滤后，取0.25 ml滤液加入样品稀释液C0.25ml，即为待检样品处理液；
2）定性检测：将70ul稀释液滴加到硝苯地平试纸卡上，若试纸呈现橙红色，则初步证明待测样品中含有硝苯地平，可与标准色阶图谱进行对比定性；
3）定量检测：在15分钟定性检测后，将检测卡放置于食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪中检测，利用反射光度法原理，读取样品中硝苯地平对应的浓度。
实施例2：胶囊类降压保健食品中硝苯地平快速检测方法
参见图2、图3，检测过程如下：
1）待测样品前处理：取1粒胶囊内容物于试管中，加入0.1g提取剂A和1.5 ml提取液B，震荡摇匀2分钟，静置10分钟，用0.45um微孔滤膜过滤后，取0.25 ml滤液加入样品稀释液C 0.25 ml，即为待检样品处理液。
2）定性检测：将70ul稀释液滴加到硝苯地平试纸卡上，若试纸呈现橙红色，则初步证明待测样品中含有硝苯地平，可与标准色阶图谱进行对比定性；
3）定量检测：在15分钟定性检测后，将检测卡放置于食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪中检测，利用反射光度法原理，读取样品中硝苯地平对应的浓度。
实施例3：硝苯地平快速检测卡制备方法
参见图4，制备过程如下：
1）制备试纸基材：以中性滤纸作为硝苯地平检测试纸的基材；
2）制备显色液：取氢氧化钠（1～10%）溶液20ml和烷基糖苷（APG0810）（5～20%）溶液2ml；将各组分放入反应器中混合制得显色液1；取碳酸氢钠（1～10%）溶液10ml和脂肪醇醚硫酸盐（1～10%）溶液5ml；将各组分放入反应器中混合制得显色液2
3）浸泡试纸基材：首先，将硝苯地平检测试纸基材放入试剂显色液1中浸泡10分钟；其次，将硝苯地平检测试纸基材放在温度为37摄氏度的干燥器中，烘干20分钟后晾凉；最后，将硝苯地平检测试纸基材放入试剂显色液2中浸泡5分钟；
4）制备检测试纸：将浸泡后的硝苯地平检测试纸基材放在温度为-55摄氏度低温真空干燥箱中干燥3小时，得到硝苯地平检测试纸；
5）制备检测卡：将检测试纸裁剪成条状，制作检测卡。
最后应说明的是：显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
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机译： 快速检测药物和保健食品中掺入的苯二氮哌啶的方法
机译： 公用电话机中伪造的预付卡的检测方法，公用电话机中伪造的预付卡的放电处理方法，公用电话机
